ФС.2.5.0031. Фармакопейная статья. Пижмы обыкновенной цветки

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0031.15"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gf-xiii-minzdrav-rossii-ministerstvo-375" "ФС.2.5.0031.15. Фармакопейная статья'Пижмы обыкновенной цветки.'"
  n2["ФС.2.5.0031"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0031" "ФС.2.5.0031. Фармакопейная статья. Пижмы обыкновенной цветки (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в начале цветения и высушенные соцветия (цветки) дикорастущего многолетнего травянистого растения пижмы обыкновенной — Tanacetum vulgare L., сем. астровых — Asteraceae.

Содержит не менее 1,25% суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. В соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырье. Части сложного щитковидного соцветия и отдельные цветочные корзинки. Корзинки полушаровидной формы с вдавленной серединой, диаметром 6 — 8 мм, состоят из мелких трубчатых цветков: краевых — пестичных, срединных — обоеполых. Цветоложе голое, неполое, слегка выпуклое, окружено обверткой из черепитчато расположенных ланцетных с пленчатым краем листочков. Данные листочки — простые, сидячие, перисто-раздельные, от 0,5 до 1,0 см длиной, при детальном рассмотрении заметно опушенные. Цветоносы бороздчатые, голые, реже слабоопушенные. Цвет цветков желтый, листочков обвертки — коричневато-зеленый, цветоносов — светло-зеленый. Запах характерный.

Измельченное сырье. Цельные цветочные корзинки, отдельные трубчатые цветки, цветоложа и кусочки цветоносов, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x) видны отдельные полушаровидные цветочные корзинки с вдавленной серединой и их части с трубчатыми цветками желтого цвета с многорядной черепитчатой обверткой; слегка выпуклые отдельные цветоложа и их части.

Цвет измельченного сырья зеленовато-желтый. Запах характерный.

Порошок. Смесь кусочков трубчатых цветков, листочков обвертки, цветоносов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет порошка желтовато-зеленый с желтыми, зелеными, коричневато-зелеными, желтовато-серыми вкраплениями, изредка встречаются вкрапления темно-коричневого и зеленовато-фиолетового цвета. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье. Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата листочка обвертки с поверхности должна быть видна центральная жилка, сопровождающаяся секреторными ходами; клетки эпидермиса с наружной стороны листочка крупные, с прямыми или слегка извилистыми стенками, заметна складчатость кутикулы; клетки эпидермиса с внутренней стороны узкие и сильно вытянутые. Эпидермис листочка представляет собой клетки неправильной, изодиаметричной формы с сильно утолщенными стенками, на нижнем эпидермисе имеются устьица аномоцитного типа. Эпидермис цветоложа представлен округлыми изодиаметричными клетками с темным содержимым; устьица и волоски только с наружной стороны листочка обвертки по центральной жилке и по краю: устьица окружены 4 — 6 околоустьичными клетками, волоски многоклеточные, бичевидные. Клетки эпидермиса венчика — многоугольные, тонкостенные, некоторые из них имеют четковидные утолщения. На поверхности цветков имеются эфирномасличные железки, расположенные на завязи и у основания трубочки венчика. Железки 4-, 6-клеточные, двухрядные, двух-, трехъярусные. В мезофилле и клетках эпидермиса венчика встречаются друзы кальция оксалата. Эпидермис листочка обвертки с наружной стороны состоит из крупных клеток с прямыми или слегка извилистыми стенками и со складчатой кутикулой. Клетки эпидермиса с внутренней стороны листочка узкие и сильно вытянутые. При рассмотрении листочков обвертки с поверхности заметна центральная жилка. Устьица и волоски встречаются только на эпидермисе с наружной стороны листочка. Волоски эпидермиса многоклеточные, бичевидные. Внутренний эпидермис обвертки представлен крупными клетками с тонкой оболочкой, под ним расположена паренхима в 1 — 2 слоя крупных тонкостенных клеток. Внутренний эпидермис покрыт выраженной кутикулой. Эпидермис внешней стороны обвертки отличается меньшими размерами клеток, более выраженной кутикулой.

Цветоложе состоит из губчатой паренхимы с большим количеством межклетников. Клетки губчатой паренхимы округлой изодиаметрической формы, практически бесцветны, изредка содержат хромопласты желтого цвета. Наружный слой паренхимы цветоложа содержит большое количество мелких сосудистых пучков.

Пыльники тычинок крупные вытянутые, с заостренными верхушками. Теки пыльников двухгнездные, заполненные пыльцой желтого цвета. Тычиночные нити длинные, бесцветные с заметным проводящим пучком, из 2 спиральных сосудов. Эпидермис тычиночных нитей представлен слабовытянутыми, тонкостенными клетками. Пестик имеет 2 рыльца, поверхность которых неровная, ворсинчатая. Столбик пестика крупный, бесцветный. Паренхима завязи содержит друзы кальция оксалата. На поверхности цветков имеются эфирномасличные железки. Железки 4-, 6-клеточные, двухрядные, двух-, трехъярусные. В столбике два проводящих пучка.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка должны быть видны фрагменты листочков обвертки с крупными клетками эпидермиса с прямыми или слегка извилистыми стенками, складчатой кутикулой, устьицами аномоцитного типа, многоклеточными, бичевидными волосками (наружная сторона), сосредоточенные главным образом по центральной жилке и по краю, и с узкими, сильно вытянутыми клетками эпидермиса (внешняя сторона); фрагменты эпидермиса нижней части трубки венчика трубчатого цветка, состоящего из тонкостенных изодиаметричных клеток; фрагменты эпидермиса средней части трубки венчика прозенхимной формы; фрагменты эпидермиса трубки венчика с многочисленными железистыми трихомами; фрагменты эпидермиса тычиночных нитей со слабо вытянутыми, тонкостенными клетками; фрагменты эпидермиса с эфирномасличными железками 4-, 6-клеточными, двухрядными, двух-, трехъярусными; фрагменты центральной жилки с секреторными ходами; отдельные эфирномасличные железки; мелкие друзы кальция оксалата.

с маслянистым содержимым вдоль центральной жилки (200x); 4 — фрагмент бичевидного волоска (200x).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная — вода — этилацетат 1:1:8.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1 г сырья, помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл спирта 96%, нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1% в спирте 96%.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5%. На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида (раздел «Количественное определение»). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе и помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают раствором для детектирования 1, сушат, затем обрабатывают раствором для детектирования 2, высушивают и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции желто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от желто-оранжевого до коричневато-красного цвета на уровне зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида, чуть ниже нее — зона адсорбции желто-оранжевого цвета и выше нее пластинки зона адсорбции желто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

Затем хроматограмму просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции желто-оранжевого цвета; выше нее — голубого или сине-голубого цвета, над ней на уровне зона адсорбции лютеолин-7-глюкозида зона адсорбции желто-оранжевого цвета, выше две зоны адсорбции голубого или сине-голубого цвета, и над ней зона адсорбции желто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

В нижней трети хроматографической пластинки, в средней трети пластинки — зона адсорбции желто-оранжевого цвета, чуть выше зона адсорбции желто-оранжевого цвета на уровне лютеолин-7-глюкозида, в верхней трети пластинки 2 зоны адсорбции с флуоресценцией голубого или сине-голубого цвета, над ними зона адсорбции желто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 9,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм — не более 5%.

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 5%.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цветочные корзинки и их части. Цельное сырье, измельченное сырье — не менее 60%, в том числе корзинки, изменившие окраску (потемневшие и почерневшие) — не более 8%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 1%.

Минеральная примесь. Не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Раствор стандартного образца А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида, растворяют в 15 — 20 мл спирта 70% при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы доводят объем раствора спиртом 70% до метки.

Раствор стандартного образца Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца А, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Раствора сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца А и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96% до метки.

Исходный раствор. Аналитическую пробу препарата измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) сырья, прибавляют 50 мл спирта 70%. Колбу закрывают пробкой и взвешивают с точностью до +/- 0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане (умеренное кипение) в течение 1 ч. Затем колбу охлаждают и взвешивают, при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом 70%. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96% до метки.

Через 40 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения Б.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца Б лютеолин-7-глюкозида, относительно раствора сравнения А.

X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot 25 \cdot 1 \cdot 100 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 25 \cdot 1 \cdot 25 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

Ao — оптическая плотность раствор стандартного образца лютеолин-7-глюкозида Б;

a — навеска сырья, г;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида, г;

P — содержание лютеолин-7-глюкозида в фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида;

W — влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-глюкозида вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса лютеолин-7-глюкозида с алюминия хлоридом по формуле:

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100}{365 \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

a — навеска сырья, г;

365 — удельный показатель поглощения комплекса лютеолин-7-глюкозида с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм, равный 365; (A_{1\text{см}}^{1\%}) ;

W — влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».