--- title: "\"ГОСТ Р 50479-93. Государственный стандарт Российской Федерации. Продукты переработки плодов и овощей. Метод определения содержания витамина PP\"" number: "ГОСТ Р 50479-93" issuer: "Государственный комитет Российской Федерации по стандартизации и метрологии" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-50479-93" --- ## "ГОСТ Р 50479-93. Государственный стандарт Российской Федерации. Продукты переработки плодов и овощей. Метод определения содержания витамина PP" # "ГОСТ Р 50479-93. Государственный стандарт Российской Федерации. Продукты переработки плодов и овощей. Метод определения содержания витамина PP" (утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта России от 26.01.1993 N 23) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" (ТР ТС 023/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 28.01.2020 N 19). > Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности пищевой продукции" (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 24.12.2019 N 236). > Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности отдельных видов специализированной пищевой продукции, в том числе диетического лечебного и диетического профилактического питания" (ТР ТС 027/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 16.10.2018 N 168). > Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности отдельных видов специализированной пищевой продукции, в том числе диетического лечебного и диетического профилактического питания" (ТР ТС 027/2012) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 18.10.2012 N 191). > Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" (ТР ТС 023/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 882). > Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента "О безопасности пищевой продукции" (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 880). > Документ включен в Перечень национальных стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения Федерального закона "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" и осуществления оценки соответствия (Распоряжение Правительства РФ от 19.05.2009 N 690-р). > С 01.07.2003 до вступления в силу технических регламентов акты федеральных органов исполнительной власти в сфере технического регулирования носят рекомендательный характер и подлежат обязательному исполнению только в части, соответствующей целям, указанным в п. 1 ст. 46 Федерального закона от 27.12.2002 N 184-ФЗ. > Документ [введен](#p100009) в действие с 01.01.1994. Утвержден и введен в действие Постановлением
Госстандарта России
от 26 января 1993 г. N 23 **ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**
**ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ** **МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ВИТАМИНА PP** Products of fruits' and vegetables' processing. Method for determination of vitamin PP (niacin) content **ГОСТ Р 50479-93** Группа Н59 ОКСТУ 9109
Дата введения
1 января 1994 года
## Информационные данные
1. Разработан и внесен Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП), Институтом Питания РАМН и Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 "Продукты переработки плодов и овощей".
Разработчики: В.И. Рогачев, д-р техн. наук; С.Ю. Гельфанд, канд. техн. наук; Т.Н. Медведева, канд. техн. наук; В.Ю. Громаков; Л.Л. Белко; В.А. Тутельян, д-р мед. наук; Е.Н. Степанова, канд. сельхоз. наук 2. Утвержден и введен в действие Постановлением Госстандарта России от 26.01.93 N 23.
3. Срок проверки - 1998 г.; периодичность проверки - 5 лет.
4. Введен впервые.
5. Ссылочные нормативно-технические документы:
Обозначение НТД, на который дана ссылкаНомер раздела
ГОСТ 1770-743
ГОСТ 3118-773
ГОСТ 4109-793
ГОСТ 4139-753
ГОСТ 4174-773
ГОСТ 4204-773
ГОСТ 4328-773
ГОСТ 4530-763
ГОСТ 4919.1-773
ГОСТ 6709-723
ГОСТ 9147-803
ГОСТ 9262-773
ГОСТ 12026-763
ГОСТ 12083-783
ГОСТ 14919-833
ГОСТ 18300-873
ГОСТ 20292-743
ГОСТ 21400-753
ГОСТ 24104-88
3
ГОСТ 25336-823
ГОСТ 25664-833
ГОСТ 26313-841
ГОСТ 26671-851
ГОСТ 27067-863
ГОСТ 28498-903
ФС 42-2357-853
ТУ 6-09-1678-773
Настоящий стандарт распространяется на продукты переработки плодов и овощей и устанавливает фотометрический метод определения содержания витамина PP (ниацина).
## 1. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ Отбор проб - по [ГОСТ 26313](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84), подготовка проб к анализу - по [ГОСТ 26671](https://bukva.ai/docs/gost-26671-85). ## 2. СУЩНОСТЬ МЕТОДА Метод основан на освобождении витамина PP путем гидролиза, очистке гидролизата от мешающих определению веществ, количественном получении окрашенного глутаминового альдегида, интенсивность окраски которого измеряют фотометрически. ## 3. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ Колориметр фотоэлектрический лабораторный по ГОСТ 12083 с пределами измерений оптической плотности 0 - 2 и пределом допускаемой основной абсолютной погрешности при измерении коэффициента пропускания не более +/- 1%, со светофильтром с длиной волны, соответствующей максимуму пропускания (400 - 425) нм, и кварцевыми кюветами рабочей длиной 30 мм; или спектрофотометр с диапазоном измерения, позволяющим проводить измерения оптической плотности раствора при длине волны 420 нм с допускаемой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%, снабженный кварцевыми кюветами с рабочей длиной 10 мм. Весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104, с наибольшим пределом взвешивания до 200 г, 2-го класса точности. Весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104, с наибольшим пределом взвешивания до 1 кг, 3-го класса точности. Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919 или газовая горелка. Баня водяная. Баня ледяная. Бюретки по [ГОСТ 20292](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) исполнений 1-2-25-0,1 или 2-2-25-0,1, или 3-2-25-0,1; исполнений 1-2-50-0,1 или 2-2-50-0,1, или 3-2-50-0,1. Колбы по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) 2-100-2, 2-250-2, 2-500-2, 2-1000-2. Колбы по ГОСТ 25336 Кн-1-100-14/23 ТС, Кн-1-1000-24/29 ТС. Цилиндры по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) 1-50, 1-100. Стаканы по ГОСТ 25336 13-1-1000 ТС, В-1-2000 ТС. Воронки Бюхнера по ГОСТ 9147 2, 3 или 4. Воронки по ГОСТ 25336 В-36-80 ХС или В-56-80 ХС. Термометр жидкостный стеклянный по [ГОСТ 28498](https://bukva.ai/docs/gost-28498-90) с пределами измерения 0 - 100 °C, с пределом допускаемой погрешности 2 °C
Пипетки по [ГОСТ 20292](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) 6-1-5, 6-1-10.
Пипетки по [ГОСТ 20292](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) 2-1-1 или 3-1-1, 2-1-2 или 3-1-2.
Эксикатор по ГОСТ 25336 с подходящим агентом для сушки.
Палочки из химико-лабораторного стекла по [ГОСТ 21400](https://bukva.ai/docs/standart-gost-21400-75). Пробирки по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) 2-20-14/23 ХС, 2-25-14/23 ХС. Ступка по ГОСТ 9147 N 2. Витамин PP (ниацин) по ФС 42-2357. Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч., растворы $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 0,05\text{моль}/\text{дм}^{3}$ , $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 1,0\text{моль}/\text{дм}^{3}$ и $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 2,5\text{моль}/\text{дм}^{3}$ . Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч., растворы c (HCl) = 0,5 моль/дм3 и c (HCl) = 5 моль/дм3. Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч., растворы c (NaOH) = 4,0 моль/дм3, c (NaOH) = 10 моль/дм3. Бром по [ГОСТ 4109](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4109-79), х.ч. Калий роданистый по [ГОСТ 4139](https://bukva.ai/docs/gost-4139-75), х.ч., или аммоний роданистый по [ГОСТ 27067](https://bukva.ai/docs/gost-27067-86), х.ч., растворы массовой концентрации 100 г/дм3 и 10 г/дм3. Кальций углекислый по [ГОСТ 4530](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4530-76), х.ч. Кальция гидроокись по [ГОСТ 9262](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-9262-77), ч. Метол по [ГОСТ 25664](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-25664-83), перекристаллизованный, раствор массовой концентрации 80 г/дм3 в соляной кислоте c (HCl) = 0,5 моль/дм3. Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300. Цинк сернокислый по [ГОСТ 4174](https://bukva.ai/docs/gost-4174-77), х.ч., раствор массовой концентрации 800 г/дм3. Фенолфталеин по ГОСТ 4919.1 раствор массовой концентрации 10 г/дм3. Уголь активированный. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709. Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026. Фильтры обеззоленные по ТУ 6-09-1678. *Примечание.* Допускается использование другой аппаратуры, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не ниже указанных. ## 4. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ #### 4.1 Приготовление основного стандартного раствора витамина PP концентрации 0,1 мг/см3 Навеску витамина PP массой 0,050 г помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, добавляют 300 см3 воды и 5 см3 раствора серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 2,5\text{моль}/\text{дм}^{3}$ . После растворения витамина PP доводят объем до метки водой, тщательно перемешивают и переносят в склянку из темного стекла с притертой пробкой. Хранят раствор в холодильнике не более 3 мес. #### 4.2 Приготовление рабочего стандартного раствора витамина PP концентрации 2 мкг/см3 В день проведения анализа 2 см3 основного стандартного раствора витамина PP [(п. 4.1)](#p100090) пипеткой вносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, объем доводят водой до метки и тщательно перемешивают. #### 4.3 Приготовление бромной воды За 5 дней до проведения анализа в склянку темного стекла с притертой пробкой вносят 100 см3 воды и (в вытяжном шкафу) 5 - 6 см3 брома, энергично встряхивают. Склянку с бромной водой хранят в вытяжном шкафу в защищенном от света эксикаторе. #### 4.4 Приготовление роданбромидного раствора Роданбромидный раствор готовят в вытяжном шкафу непосредственно перед применением. К охлажденной на льду бромной воде [(п. 4.3)](#p100094), взятой в объеме, необходимом для анализа, прибавляют по каплям охлажденный раствор роданистого калия или аммония массовой концентрации, вначале 100 г/дм3, затем 10 г/дм3 до полного обесцвечивания брома. После этого постепенно, небольшими порциями вносят углекислый кальций до прекращения выделения пузырьков газа и образования осадка. Раствор фильтруют в склянку из темного стекла с притертой пробкой и оставляют на ледяной бане. #### 4.5 Перекристаллизация метола В стакане вместимостью 1000 см3 нагревают до кипения 500 см3 раствора серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 0,05\text{моль}/\text{дм}^{3}$ , добавляют 100 г метола и продолжают нагревать смесь до начала кипения. Если раствор сильно окрашен, то к нему добавляют 10 г активированного угля, перемешивают и сразу же фильтруют через воронку для горячего фильтрования или воронку Бюхнера, предварительно нагретую кипящей водой, в химический стакан вместимостью 2000 см3. К фильтрату добавляют 700 см3 этилового спирта, перемешивают, стакан помещают в ледяную баню и оставляют в темноте на 4 - 5 ч. Выпавший осадок фильтруют через воронку Бюхнера, кристаллы на фильтре промывают небольшими (по 30 - 40 см3) количествами охлажденного спирта и высушивают на воздухе в темноте. Перекристаллизованный метол сохраняют в склянке из темного стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте. #### 4.6 Приготовление раствора метола Непосредственно перед применением в мерной колбе вместимостью 100 см3 растворяют 8,0 г перекристаллизованного метола в растворе соляной кислоты c (HCl) = 0,5 моль/дм3. Доводят объем до метки раствором соляной кислоты. ## 5. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 5.1. В зависимости от вида исследуемого продукта для освобождения связанных форм витамина PP используют различные способы гидролиза. 5.1.1. При анализе продуктов переработки плодов и овощей без и с добавлением круп, молока и творога применяют щелочной гидролиз. Навеску пробы массой 1,0 - 10,0 г растирают в фарфоровой ступке с 1,5 г гидроокиси кальция. Затем количественно переносят содержимое ступки в коническую колбу вместимостью 100 см3, смывая 50 - 60 см3 воды небольшими порциями. Колбу с пробой нагревают в течение 90 мин на кипящей водяной бане, предварительно закрыв горлышко колбы маленькой воронкой или специальной стеклянной пробкой-вкладышем, периодически встряхивая. После нагревания колбу охлаждают до комнатной температуры. Затем объем гидролизата доводят водой до 75 см3, перемешивают, охлаждают 2 ч на ледяной бане или оставляют на ночь в холодильнике. Охлажденный гидролизат фильтруют или центрифугируют. 25 см3 фильтрата помещают в цилиндр вместимостью 50 см3, добавляют 1 - 2 капли раствора фенолфталеина и по каплям раствор серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 2,5\text{моль}/\text{дм}^{3}$ до обесцвечивания. Далее проводят обработку, как указано в [п. 5.2](#p100116). 5.1.2. При анализе продуктов переработки овощей с добавлением мяса, рыбы, яиц применяют кислотный гидролиз. Навеску пробы массой 1,0 - 10,0 г количественно переносят в коническую колбу вместимостью 100 см3, смывая 50 - 60 см3 раствора серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 1\text{моль}/\text{дм}^{3}$ небольшими порциями. Колбу с пробой нагревают в течение 90 мин на кипящей водяной бане, предварительно закрыв горлышко колбы маленькой воронкой или специальной стеклянной пробкой-вкладышем, периодически встряхивая. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры. Объем гидролизата доводят водой до 75 см3, тщательно перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр (первые 5 - 6 см3 фильтрата отбрасывают). 25 см3 фильтрата помещают в цилиндр вместимостью 50 см3, добавляют 1 - 2 капли фенолфталеина и нейтрализуют раствором гидроокиси натрия c (NaOH) = 10 моль/дм3 до слабо-розового окрашивания и охлаждают. Избыток щелочи устраняют добавлением 1 - 2 капель раствора серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 2,5\text{моль}/\text{дм}^{3}$ . Далее проводят обработку, как указано в [п. 5.2](#p100116). 5.1.3. Если фильтраты интенсивно окрашены, то pH раствора доводят до 8 по универсальной индикаторной бумаге растворами кислоты или щелочи тех же концентраций, которые применялись при гидролизе. #### 5.2 Очистка фильтрата В колбу с нейтральным фильтратом вносят 2 см3 раствора сернокислого цинка и затем раствор гидроокиси натрия c (NaOH) = 4 моль/дм3 по каплям до слабо-розового окрашивания. Тщательно перемешивают, удаляют розовое окрашивание добавлением 1 - 2 капель раствора серной кислоты $\text{с }(H_{2}SO_{4}) = 2,5\text{моль}/\text{дм}^{3}$ , выдерживают в течение 10 мин, затем добавляют 1 - 2 капли этилового спирта для устранения пены. Объем доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр. #### 5.3 Проведение цветной реакции Для проведения цветной реакции используют 8 пробирок или колб с притертыми пробками. В три пробирки пипеткой вносят по 5 см3 рабочего стандартного раствора витамина PP, приготовленного по [п. 4.2](#p100092). В 4 пробирки вносят пипеткой по 5 см3 полученного фильтрата, в контрольную пробирку - 5 см3 воды вместо фильтрата. Все пробирки закрывают пробками и нагревают на водяной бане при температуре 48 - 52 °C в течение 5 - 10 мин. Затем в пробирки со стандартным раствором витамина, в пробирку с водой и в две пробирки с испытуемым фильтратом добавляют из бюретки в вытяжном шкафу по 2 см3 роданбромидного раствора. Все пробирки закрывают пробками, встряхивают и оставляют на водяной бане при температуре (50 +/- 2) °C 10 мин. Через 10 мин все пробирки охлаждают водой до комнатной температуры, оставляют на 10 мин в темном месте, затем в каждую из них добавляют по 3 см3 раствора метола, встряхивают и оставляют на 1 ч в темном месте. После этого измеряют оптическую плотность растворов на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре. Контрольным раствором служит дистиллированная вода. Если растворы, полученные по [п. 5.3](#p100118), мутные, то перед измерением оптической плотности их фильтруют в кювету через бумажный фильтр. ## 6. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ #### 6.1 Массовую долю витамина PP (X) в процентах вычисляют по формуле $X = \frac{(A_{I} - A)V \cdot V_{I} \cdot m}{(B_{I} - B)m_{I} \cdot V_{2} \cdot V_{3}} \cdot 10^{- 4},$
где $A_{I}$ - значение оптической плотности испытуемого раствора;
A - значение оптической плотности раствора для поправки на окрашенные посторонние вещества;
V - общий объем гидролизата, см3;
$V_{I}$ - объем раствора после очистки сернокислым цинком, см3;
m - масса витамина PP в 5 см3 рабочего стандартного раствора, мкг, m = 10 мкг;
$B_{I}$ - значение оптической плотности рабочего стандартного раствора витамина PP (среднее значение из трех параллельных определений);
B - значение оптической плотности контрольного раствора;
$m_{I}$ - масса навески, г;
$V_{2}$ - объем гидролизата, взятого на очистку, см3;
$V_{3}$ - объем очищенного гидролизата, взятого для проведения цветной реакции, см3.
6.2. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое значение $(\overline{X})$ двух параллельных определений, рассчитанных до четвертого и округленных до третьего десятичного знака, расхождение между которыми при P = 0,95 не должно превышать 13% по отношению к среднему арифметическому значению.
6.3. Минимальная концентрация витамина PP, определяемая указанным методом, составляет 0,5 мкг в 1 см3 колориметрируемого раствора.
6.4. Допускаемое расхождение между результатами испытаний, выполненных в двух разных лабораториях при P = 0,95, не должно превышать 30% по отношению к среднему арифметическому значению.
---