МУК 4.1.1583-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 2-[4-(1,2-дифенил-1-бутенил)фенокси]-N,N-диметилэтанамина-(Z)-2-гидрокси-1,2,3-пропантрикарбоксилата (тамоксифен цитрата) и 2-[4-(1,2-дифенил-1-бутенил)фенокси]-N,N-диметилэтанамина (тамоксифен основания) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 29.06.2003)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-[4-(1,2-ДИФЕНИЛ-1- БУТЕНИЛ)ФЕНОКСИ]-N,N-ДИМЕТИЛЭТАНАМИНА-(Z)-2-ГИДРОКСИ- 1,2,3-ПРОПАНТРИКАРБОКСИЛАТА (ТАМОКСИФЕН ЦИТРАТА) И 2-[4- (1,2-ДИФЕНИЛ-1-БУТЕНИЛ)ФЕНОКСИ]-N,N-ДИМЕТИЛЭТАНАМИНА (ТАМОКСИФЕН ОСНОВАНИЯ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 38) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

    Тамоксифена цитрат                   Тамоксифена основание
    (структурная формула                 (структурная формула
    не приводится)                        не приводится)

    C  H  NO x C H O    М. м. 563,64     C  H  NO     М. м. 371,51
     26 29      6 8 7                     26 29

Тамоксифена цитрат, почти белый мелкокристаллический порошок, с температурой плавления 142 — 145 °C, растворим в метиловом и этиловом спирте, мало растворим в ацетоне, практически не растворим в воде.

Тамоксифена основание, белый кристаллический порошок с температурой плавления 101 — 102 °C, не растворим в воде, растворим в 95% этиловом спирте и хлороформе.

В воздухе находятся в виде аэрозоля.

Оказывают выраженное раздражающее действие на кожу.

ПДК тамоксифена цитрата и тамоксифена основания в воздухе — 0,001 мг/куб. м. 1 класс опасности.

Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания веществ в хроматографируемом объеме (20 мкл) — 0,08 мкг.

Нижний предел измерения концентрации веществ в воздухе — 0,0005 мг/куб. м (при отборе 1600 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций веществ в воздухе от 0,0005 до 0,0075 мг/куб. м.

Определение веществ избирательно на стадиях сушки, просеивания, фасовки и хранения.

Определению не мешают лимонная кислота, пары этилового и изопропилового спиртов.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Микроколоночный жидкостной хроматограф «Милихром» или другие модели с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка размером 80 х 2 мм, заполненная твердым сорбентом Силасорб NH . 2

Весы аналитические ВЛА-200 2-го кл., ГОСТ 24104-88 Е.

Микрошприц МШ-10, ТУ 2833-106.

Аспирационное устройство ПУ-3Э/220 или ПУ-3Э/12.

Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74 Е.

Колбы круглодонные вместимостью 50 мл, ГОСТ 19908-74.

Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.

Фильтры типа «Миллипор» или «Владипор» с диаметром пор 0,45 мкм, ТУ 6-05-221-433-79.

Роторный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917.76.

Секундомер, ГОСТ 5072-97.

Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.

Тамоксифен цитрат, ВФС 42-2421-94.

Тамоксифен основания (полупродукт в синтезе тамоксифен цитрата. Временный технологический регламент на производство тамоксифен цитрата. ПЭЗ ВНИХФИ (М., 1992 г.)).

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.

Метиловый спирт, х.ч., ГОСТ 6995-77.

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

Элюент: метиловый спирт: вода в соотношении 2:8.

Стандартный раствор № 1 тамоксифена основания с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г вещества в этаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор хранят в склянке оранжевого стекла в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор № 2 тамоксифена цитрата с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г вещества в этаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор хранят в склянке оранжевого стекла в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор № 3 тамоксифена основания с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 этанолом. Растворы используют свежеприготовленными.

Стандартный раствор № 4 тамоксифена цитрата с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 2 этанолом. Растворы используют свежеприготовленными.

Градуировочные растворы с концентрацией 0,16-0,32-0,48-0,8-1,6-2,4 мкг/мл тамоксифена основания и тамоксифена цитрата готовят соответствующим разбавлением этанолом стандартных растворов № 3 и № 4. Растворы используют свежеприготовленными.

Фильтры АФА-ВП-20, ТУ 95-7181-76.

Воздух с объемным расходом 100 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. В патрон за фильтром следует установить металлическую сетку. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 1600 л воздуха. Пробы хранят в защищенном от света месте в течение суток.

По 5 мл каждого градуировочного раствора, что соответствует 0,8-1,6-2,4-4,0-8,0-12,0 мкг, переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха под вакуумом в роторном испарителе при температуре 50 — 60 °C. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл элюента (метанол-вода в соотношении 2:8 мл) и анализируют на хроматографе, инжектируя по 20 мкл (0,02 мл), что соответствует 0,08; 0,16; 0,24; 0,40; 0,80; 1,2 мкг вещества.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки                    20 °C
    Скорость подачи элюента                           100 мкл/мин.
    Чувствительность измерения детектора              0,4
    Длина волны УФ-детектора                          240 нм
    Скорость движения диаграммной ленты               180 мм/мин.
    Диапазон измерения самописца                      100 мв
    Максимальный объем вводимой пробы                 20 мкл.

Время удерживания тамоксифенов в колонке для цитрата и основания одно и то же — 2,3 мин. в связи с разложением соли тамоксифена до тамоксифена основания в условиях среды подвижной фазы.

На основании полученных хроматограмм строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр с отобранной пробой переносят в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, приливают 5 мл этанола и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра 97%. Отгоняют этанол при 50 — 60 °C в роторном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл подвижной фазы и хроматографируют.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания тамоксифена основания и тамоксифена цитрата в хроматографируемом объеме (мкг) проводят по предварительно построенным градуировочным графикам.

Концентрацию определяемых веществ «С» в воздухе (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                             а х в

С = -----, б х V

где:

а — количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б — хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл;

в — общий объем раствора пробы, мл;

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °C и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                     V  х (273 + 20) х Р
                      t

                   V   = -------------------,
                    20   (273 + t) х 101,33

где:

V — объем воздуха, отобранный для анализа, л; t

Р — барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t — температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°C	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/730	97,86/734	98,4/738	98,93/742	99,46/746	100/750	100,53/754	101,06/758	101,33/760	101,86/764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	0,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9830	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

Не приводится

Приложение 4

Не приводится

Приложение 5

Не приводится

Белая магнезия

Бромгексин

Бура

Гидразинобензол солянокислый

Глибенкламид

Диэтиламинопропиламин

Иминодибензил

Лидокаин

Метаран

МЦ-100

Масло «Турбомас»

Неопентилгликоль

Нимодипин

Нитрендипин

Нитроглицерин

Оксипропилметилцеллюлоза

Ондансетрон

Ранитидин гидрохлорид

Реагент ААК или Таллактам

СМБА

Сульфаметоксазол

Тамоксифен основание

Тамоксифен цитрата

Тиаприд

Триметоприм

Хладон-14

Ципрофлоксацин гидрохлорида моногидрат

Экосорб

Эналаприла малеат

Этиниловый спирт

Наименование вещества	Методические указания
1. Ароматизатор из мяты перечной 16433	МУ по газохроматографическому измерению концентраций ментола (L-2-изопропил-5-метициклогексанола) в воздухе рабочей зоны. Вып. 30, М., 2000, с. 189, МУК 4.1.240-96
2. Ванадий-алюминиевая лигатура	Измерение концентрации ванадия методом атомноабсорбционной спектрофотометрии. Сб. «МУ по определению вредных веществ в сварочном аэрозоле», М., 1992, стр. 67, МУ № 4945-88
3. Мультиинзимная композиция МЭК-СХ-1	МУ по спектрофотометрическому измерению концентраций амилазы в воздухе рабочей зоны. Вып. 38
4. Мультиинзимная композиция МЭК-СХ-2	МУ по спектрофотометрическому измерению концентрации целлюлазы в воздухе рабочей зоны. Вып. 38
5. Опаспрей белый	МУ по газохроматографическому измерению метилового спирта в воздухе рабочей зоны. Вып. 19, М., 1984, стр. 102, МУ № 2902-83
6. Опаспрей желтый	МУ по газохроматографическому измерению метилового спирта в воздухе рабочей зоны. Вып. 19, М., 1984, стр. 102, МУ № 2902-83
7. Пыль периклазохромитовых и хромитопериклазовых огнеупорных изделий	МУ на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок. Вып. 1 — 5, М., 1981, стр. 235, МУ № 1719-77
8. Хладон СМ-1	МУ по газохроматографическому измерению концентраций 1,1,1,2-тетрафторэтана в воздухе рабочей зоны. Вып. 35, МУК 4.1.860-99, утв. 30.12.99
9. Биовит-160	МУ по фотометрическому измерению концентраций хлортетрациклина в воздухе рабочей зоны. Вып. 11 переработ., М., 1992, стр. 149, № 5866-91
10. М0624М смесь (смесь четвертичных аммониевых	МУ по фотометрическому измерению концентраций диалкилдиметиламмоний хлорида (С — С ) и
соединений)	17 20 алкилбензилдиметиламмоний хлорида (С — С ) — 10 16 дон-2, диалкиламинопропионитрила (С — С ) — 7 9 ифхангаз, алкилтриметиламмоний хлорида (С — 10 С ), дон-52 в воздухе рабочей зоны. 16 Вып. 25, М., 1989, стр. 49, МУ № 4905-88

Приведено в МВИ	Принятые предположения	Расчет составляющей погрешности
ДЕЛЬТА (информация о структуре погрешности отсутствует)	ДЕЛЬТА — незначимо с	0 дельта (ДЕЛЬТА) = ДЕЛЬТА / 1,96
ДЕЛЬТА — характеристика погрешность).	результатов	КХА (суммарная
ДЕЛЬТА — характеристика с погрешности.	систематической	составляющей
0 дельта (ДЕЛЬТА) погрешности.	- характеристика	случайной составляющей

N	Алгоритм оперативного контроля	Вид контроля
		Внутренний оперативный контроль	Внешний контроль по схеме оперативного контроля
1	С применением образцов для контроля (ОК)	|К | = |Х — С| < К к
		К = 0,84 ДЕЛЬТА где ДЕЛЬТА — характеристика погрешност понента в ОК	К = ДЕЛЬТА и, соответствующая содержанию ком-
2	С применением метода добавок	|К | = |Х' — Х - С| < К к
		_______________________ / 2 2 К = 0,84 \/(ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х' Х где ДЕЛЬТА (ДЕЛЬТА ) — характеристик _ _ Х' Х держанию компонента в пробе с добавкой	_______________________ / 2 2 К = \/(ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х' Х а погрешности, соответствующая со- (пробе без добавки)
3	С применением метода разбавления	|К | = |RХ' — Х| < К к
		__________________________ /2 2 2 К = 0,84 \/R (ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х' Х где ДЕЛЬТА (ДЕЛЬТА ) — характеристик _ _ Х' Х держанию компонента в разбавленной про	__________________________ /2 2 2 К = \/R (ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х' Х а погрешности, соответствующая собе (рабочей пробе) соответственно
4	С применением другой (контрольной) методики	|К | = |Х — Х | < К к к
		_______________________ / 2 2 К = 0,84 \/(ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х Х к где ДЕЛЬТА (ДЕЛЬТА ) — характеристик _ _ Х Х к тодики, соответствующая содержанию ком	_______________________ / 2 2 К = \/(ДЕЛЬТА ) + (ДЕЛЬТА ) _ _ Х Х к а контрольной (контролируемой) мепонента в пробе

Оперативный контроль погрешности (точности) проводят в одинаковых условиях, т.е. результаты анализа получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

    ВОК  воспроизводимости  проводят с использованием рабочих проб
путем   сравнения   результата   контрольной   процедуры,  равного
расхождению двух результатов КХА (х  и х ) содержания компонента в
                                   1    2

одной и той же пробе, с нормативом ВОК воспроизводимости Д.

                          _    _
                          х  - х  <= Д.
                           1    2

Норматив ВОК воспроизводимости рассчитывают по формуле:

Д = Q(Р, m) дельта (ДЕЛЬТА),

    где    дельта (ДЕЛЬТА)    -    показатель    воспроизводимости
(характеристика       случайной      составляющей     погрешности,

соответствующая среднему содержанию компонента в пробе):

                                _    _
                                х  + х
                          _      1    2
                          х   = -------,
                           ср      2

Q(Р, m) = 2,77, при m = 2, Р = 0,95.

При осуществлении ВОК воспроизводимости отбирают две пробы, объем которых равен объему, необходимому для проведения анализа по методике, и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа, используя разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. В работе должны участвовать два аналитика.

При превышении норматива ВОК воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

---