ПНСТ 1048-2026. Предварительный национальный стандарт Российской Федерации. Продукция алкогольная, слабоалкогольная, безалкогольная и соковая. Определение сукралозы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
(утв. и введен в действие Приказом Росстандарта от 05.02.2026 № 5-пнст)
Примечание
Документ вводится в действие с 01.01.2027 на период до 01.01.2028 с правом досрочного применения (Приказ Росстандарта от 05.02.2026 № 10-пнст). Документ вводится в действие с 01.01.2027.
Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 5 февраля 2026 г. № 5-пнст
ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПРОДУКЦИЯ АЛКОГОЛЬНАЯ, СЛАБОАЛКОГОЛЬНАЯ, БЕЗАЛКОГОЛЬНАЯ И СОКОВАЯ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУКРАЛОЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Alcoholic, low-alcohol, non-alcoholic and juice products. Determination of sucralose content by high performance liquid chromatography
67.160.20
Срок действия с 1 января 2027 года до 1 января 2028 года с правом досрочного применения
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом технологии консервирования — филиалом Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН (ВНИИТеК — филиал ФГБНУ «ФНЦ пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН)
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 175 «Пивоваренная продукция и напитки безалкогольные»
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 5 февраля 2026 г. № 5-пнст
Правила применения настоящего стандарта и проведения его мониторинга установлены в ГОСТ Р 1.16-2011 (разделы 5 и 6).
Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии собирает сведения о практическом применении настоящего стандарта. Данные сведения, а также замечания и предложения по содержанию стандарта можно направить не позднее чем за 4 мес до истечения срока его действия разработчику настоящего стандарта по адресу: 143700 Московская область, г. Видное, ул. Школьная, д. 78, и/или в Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии по адресу: 123112 Москва, Пресненская набережная, дом 10, стр. 2.
В случае отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты» и также будет размещена на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.rst.gov.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на алкогольную, слабоалкогольную, безалкогольную и соковую продукцию (далее — продукты) и устанавливает метод определения (измерения) массовой концентрации (массовой доли) сукралозы с применением обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Диапазон измерений массовой концентрации (массовой доли) сукралозы — от 5 до 500 мг/дм3 (мг/кг) включительно.
Примечание — 1 мг/кг соответствует 1 млн-1 (или 0,0001%). При необходимости пересчет из одних величин в другие проводят по ГОСТ 8.417.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 8.315 Государственная система обеспечения единства измерений. Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения
ГОСТ 8.417 Государственная система обеспечения единства измерений. Единицы величин
ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.019 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
ГОСТ 12.2.007.0 Система стандартов безопасности труда. Изделия электротехнические. Общие требования безопасности
ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3117 Реактивы. Аммоний уксуснокислый. Технические условия
ГОСТ 6687.0 Продукция безалкогольной промышленности. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 9293 (ИСО 2435-75) Азот газообразный и жидкий. Технические условия
ГОСТ 12786 Продукция пивоваренная. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 26313 Продукты переработки фруктов и овощей. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 26671 Продукты переработки фруктов и овощей, консервы мясные и мясорастительные. Подготовка проб для лабораторных анализов
ГОСТ 29169 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
ГОСТ 31643-2012 Продукция соковая. Определение аскорбиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
ГОСТ 31730 Продукция винодельческая. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 32080 Изделия ликероводочные. Правила приемки и методы анализа
ГОСТ 33276 Продукция соковая. Методы определения относительной плотности
ГОСТ 34128 Продукция соковая. Рефрактометрический метод определения массовой доли растворимых сухих веществ
ГОСТ ISO 7886-1 Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования
ГОСТ ISO/IEC 17025 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
ГОСТ OIML R 76-1 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания
ГОСТ Р 58144 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения
ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Сущность метода
Определение сукралозы основано на выделении из пробы и очистки от мешающих компонентов с применением твердофазной экстракции и последующем количественном определении в очищенном экстракте методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Разделение проводят в изократическом режиме. Детектирование сукралозы осуществляется с применением рефрактометрического детектора.
4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы
4.1 Хроматограф жидкостный утвержденного типа, состоящий из насоса высокого давления с верхним рабочим пределом не менее 25 МПа, петлевого дозатора с рабочим объемом петли не более 0,1 см3, рефрактометрического детектора, с относительным среднеквадратичным отклонением выходного сигнала по площади пика — не более 3%, по времени удерживания — не более 1%, в комплекте с программным обеспечением для сбора и обработки данных, обеспечивающим создание и сохранение градуировочных зависимостей методом наименьших квадратов, с последующим автоматическим расчетом концентрации по ним.
4.2 Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1 специального (I) или высокого (II) класса точности с действительной ценой деления 0,0001 г и максимальной нагрузкой не менее 110 г.
4.3 Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1 высокого (II) класса точности с действительной ценой деления 0,01 г и максимальной нагрузкой не менее 200 г.
4.4 Микрошприцы любого типа, вместимостью от 5 до 100 мм3 (используются по выбору пользователя стандарта при ручном вводе пробы).
4.5 Дозаторы пипеточные одноканальные переменного объема 100 — 1000 мм3, 1000 — 5000 мм3 с относительной погрешностью дозирования не более +/- 3%.
4.6 Стандартный образец состава сукралозы по ГОСТ 8.315, с границами допускаемых значений относительной погрешности аттестованного значения не более +/- 5% при P = 0,95 <1>.
Примечание - Стандартный образец сукралозы хранят при температуре от +2 °C до +6 °C в течение срока, указанного в паспорте или на упаковке.
<1> Например, ГСО 12734-2024 состава сукралозы (Скр-ВНИИМ).
4.7 Твердотельный блок для выпаривания проб, оснащенный вставками для пробирок, устройством для подачи газа, терморегулятором для поддержания и контроля температуры в диапазоне от 50 °C до 70 °C с точностью +/- 2,5 °C.
4.8 Колонка хроматографическая <2> длиной не менее 150 мм и с внутренним диаметром не более 4,6 мм, заполненная силикагелем с привитыми октадецильными группами C18 с размером частиц от 3 до 5 мкм, в комплекте с защитной предколонкой или без нее.
<2> Например, колонка Hypersil Gold, каталожный номер 25003-154630, колонка Nucleosil 120-3 C18ec, каталожный номер 720740.46. Данная информация является рекомендуемой, приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не исключает возможности использования хроматографических колонок иных типов при условии соблюдения требований эффективности разделения.
4.9 Устройство (манифолд) для твердофазной экстракции любой конструкции, в комплекте с вакуумным насосом.
4.10 Устройство (колба Бунзена с воронкой и фриттой) для фильтрования подвижной фазы с вакуумным насосом.
4.11 Ванна ультразвуковая лабораторная, рабочей частотой не менее 40 кГц.
4.12 Фильтры мембранные из нейлона, диаметром пор 0,45 мкм, диаметром 47 мм и диаметром 25 мм с насадкой на шприц типа «Луер».
4.13 Картриджи для твердофазной экстракции <3>, заполненные обращенно-фазовым сорбентом C18, вместимостью не менее 3 см3, массой сорбента не менее 200 мг.
<3> Например, картридж Agilent Bond Elut C18 или Chromabond C18ec. Данная информация является рекомендуемой, приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не исключает возможности использования иных картриджей других производителей.
4.14 Шприцы медицинские однократного применения вместимостью 2 — 5 см3 по ГОСТ ISO 7886-1.
4.15 Центрифуга настольная, оснащенная ротором с адаптером для пробирок соответствующей вместимости, со скоростью вращения не менее 4000 мин-1.
Примечание - Используется по выбору пользователя стандарта для подготовки проб соковой продукции.
4.16 Холодильник фармацевтический, обеспечивающий поддержание температуры от 2 °C до 8 °C.
4.17 Устройство для перемешивания (вортекс).
4.18 Цилиндры мерные 2-го класса точности исполнения 1, 3 вместимостью 50, 1000 см3 по ГОСТ 1770.
4.19 Колбы мерные 2-го класса точности исполнений 1, 2, 2а вместимостью 50, 100 см3 по ГОСТ 1770.
4.20 Пипетки с одной меткой 2-го класса точности исполнений 1 или 2 вместимостью 20, 25, 50 см3 по ГОСТ 29169.
4.21 Стаканы лабораторные типа B или H по ГОСТ 25336.
4.22 Воронки лабораторные типа B по ГОСТ 25336.
4.23 Пробирки полимерные центрифужные подходящей вместимости с завинчивающейся крышкой.
4.24 Контейнеры (банки, бутылки) из полимерного материала или стекла, снабженные герметичными крышками, подходящей вместимости, для хранения проб.
4.25 Виалы из стекла с завинчивающимися крышками и септами номинальной вместимостью 2 см3.
4.26 Пробирки из термостойкого стекла вместимостью 10 — 15 см3, с завинчивающейся крышкой.
4.27 Банки лабораторные с завинчивающимися крышками с резьбой GL45 вместимостью 25, 50, 100, 500 и 1000 см3 для хранения растворов и подвижной фазы.
4.28 Метанол для жидкостной хроматографии, с массовой долей основного вещества не менее 99,5%.
4.29 Аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117, ч.д.а.
4.30 Азот газообразный, с объемной долей не ниже 99,95% по ГОСТ 9293.
4.31 Вода дистиллированная по ГОСТ Р 58144.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, испытательного и вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов и материалов по качеству не хуже указанных в настоящем стандарте.
5 Отбор и подготовка проб
5.1 Отбор проб безалкогольных и слабоалкогольных напитков — по ГОСТ 6687.0, алкогольной продукции — по ГОСТ 32080, ГОСТ 31730, ГОСТ 6687.0, пива и пивных напитков — по ГОСТ 12786, соковой продукции — по ГОСТ 26313.
5.2 Подготовка проб соковой продукции — по ГОСТ 26671, ГОСТ 31643-2012 (пункты 6.2.1, 6.2.2).
5.3 Концентрированную соковую продукцию предварительно разбавляют водой до заданного в [1] (приложение 2) значения массовой доли растворимых сухих веществ по ГОСТ 33276, ГОСТ 34128.
5.4 Продукты с содержанием двуокиси углерода (газированные) предварительно дегазируют с применением ультразвуковой ванны в течение 10 — 15 мин.
6 Условия проведения измерений
При подготовке к проведению измерений и при проведении измерений условия окружающей среды в лабораторном помещении должны соответствовать требованиям, указанным в документах на средства измерений, приведенные в разделе 4.
7 Подготовка к проведению испытаний
7.1 Подготовка хроматографа к работе
Включение и подготовку прибора к работе, вывод его на режим, операции заполнения системы растворителями и промывку отдельных частей и системы в целом, выключение по окончании работы выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации.
Перед проведением измерений хроматографическую систему кондиционируют подвижной фазой до установления стабильной базовой линии в соответствии с рекомендациями производителя.
Примечание - Для продления срока службы и более эффективной работы колонки рекомендуется использовать систему защиты (предколонку), периодическую промывку (не реже одного-двух раз в неделю) колонки растворителем (в зависимости от числа проведенных измерений) в соответствии с рекомендациями изготовителя. После проведения измерений и длительных перерывов между ними во избежание образования кристаллов солей всю систему промывают водой.
7.2 Приготовление раствора уксуснокислого аммония молярной концентрации 100 ммоль/дм3
Взвешивают (7,8 +/- 0,1) г уксуснокислого аммония по 4.29, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят водой до метки и перемешивают.
Раствор хранят в герметичной емкости в холодильнике по 4.16 при температуре от 2 °C до 8 °C не более одной недели.
7.3 Приготовление подвижной фазы
С помощью мерного цилиндра смешивают 650 см3 раствора уксуснокислого аммония по 7.2 и 350 см3 метанола по 4.28, тщательно перемешивают.
Раствор хранят не более семи дней в холодильнике по 4.16 при температуре не выше 10 °C, при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ. Перед использованием подвижную фазу дегазируют путем фильтрации через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм по 4.12 на установке по 4.10 или на ультразвуковой ванне.
7.4 Приготовление градуировочных и контрольного растворов
7.4.1 Исходный раствор сукралозы номинального значения массовой концентрации 1000 мг/дм3
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,100 +/- 0,001) г стандартного образца сукралозы, добавляют 50 см3 дистиллированной воды, растворяют с применением ультразвуковой бани, доводят до метки раствор дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
При расчете массы стандартного образца mсо,i учитывают содержание основного вещества в нем согласно информации, приведенной в паспорте, по формуле
m_{co,i} = 0,1 \cdot \frac{100}{\text{Х}_{\text{со},i}} , (1)
где Xсо,i — фактическая массовая доля сукралозы, указанная в паспорте на стандартный образец, %.
Раствор хранят в герметичной емкости в холодильнике по 4.16 при температуре от 2 °C до 8 °C не более одного месяца.
7.4.2 Градуировочные растворы
Из исходного раствора по 7.4.1 готовят ряд градуировочных растворов в соответствии с таблицей 1, для чего отбирают пипетками по 4.19 указанный объем исходного раствора по 7.4.1, помещают в мерную колбу указанной вместимости и доводят объем до метки подвижной фазой по 7.3, тщательно перемешивают.
Приготовление растворов для построения градуировочной зависимости
| № градуировочного раствора (i = 1 ... 4) | Вместимость мерной колбы, см3 | Объем исходного раствора по 7.4.1, см3 | Массовая концентрация сукралозы в градуировочном растворе Cгр,i, мг/дм3 |
|---|---|---|---|
| 1 | 50 | 0,5 | 10 |
| 2 | 50 | 2,5 | 50 |
| 3 | 50 | 5,0 | 100 |
| 4 | 50 | 10,0 | 200 |
Все градуировочные растворы готовят непосредственно перед проведением измерений.
7.5 Установление и контроль стабильности градуировочной характеристики (градуировка хроматографа)
7.5.1 Проводят измерения всех градуировочных растворов, проводя по три параллельных измерения для каждого уровня, в порядке возрастания массовой концентрации сукралозы в них, полностью заполняя петлю инжектора в условиях, указанных в 8.1.
7.5.2 Обрабатывают полученные хроматограммы в соответствии с руководством пользователя программного обеспечения прибора, используемого для сбора и обработки данных, пик сукралозы идентифицируют по абсолютному значению времени удерживания.
7.5.3 Устанавливают градуировочную характеристику в виде зависимости площади пика от массовой концентрации сукралозы. В параметрах обработки данных указывают параметры в соответствии с таблицей 2.
Параметры программного обеспечения при построении и расчете градуировочного графика
Градуировочные коэффициенты в уравнении прямой вычисляют методом линейной регрессии скорректированных площадей пиков в соответствии с руководством пользователя программным обеспечением.
7.5.4 Градуировочную характеристику считают приемлемой при выполнении следующих условий:
- значение коэффициента корреляции не менее 0,995;
- относительное отклонение измеренного значения массовой концентрации сукралозы от фактического значения в каждой точке градуировочной характеристики не превышает +/- 5%.
Градуировку хроматографа проводят при смене колонки, партии реактивов, при получении отрицательных результатов контроля стабильности градуировочной характеристики и после ремонта хроматографа.
7.5.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале рабочего дня перед началом измерений.
Для контроля стабильности градуировочной характеристики в качестве контрольного используют градуировочный раствор № 3 (см. таблицу 1). Регистрируют не менее двух хроматограмм контрольного раствора в тех же условиях, в которых была установлена градуировочная характеристика.
7.5.6 Вычисляют массовую концентрацию сукралозы в контрольном растворе для каждого ввода (Cк1 и Cк2, мг/дм3), используя действующую на данный момент градуировочную характеристику по 7.5, и проверяют выполнение условия:
|C_{\text{к}1} - C_{\text{к}2}| \leq 0,05 \cdot \overline{C_{\text{к}}}, (2)
где \overline{C_{\text{к}}} — среднее арифметическое результатов двух последовательных измерений массовой концентрации сукралозы в контрольном градуировочном растворе, мг/дм3;
Градуировочную характеристику считают стабильной в случае, если выполняется условие:
|\overline{C_{\text{к}}} - C_{\text{к}0}| \leq 0,15 \cdot C_{\text{к}0}, (3)
где Cк0 — массовая концентрация сукралозы в контрольном градуировочном растворе, Cк1 = 100 мг/дм3.
При невыполнении условий заново регистрируют еще две хроматограммы контрольного раствора. При повторных отклонениях, превышающих указанные нормативы, градуировку хроматографа проводят заново.
8 Порядок проведения измерений
8.1 Условия хроматографического разделения
Измерения проводят при следующем режиме работы хроматографа:
Примечание - Число эффективных теоретических тарелок Nтеор, рассчитанное с применением программного обеспечения хроматографа по пику сукралозы, должно составлять не менее 4000. Если этот критерий не достигается, то для достижения требуемой эффективности разделения допускается изменение экспериментальным путем указанных в настоящем пункте режимов в соответствии с рекомендациями изготовителя хроматографической системы и колонки.
8.2 Измерение проб
8.2.1 Подготовка раствора пробы
Измерения проводят не менее двух раз в условиях повторяемости в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 (подраздел 3.14).
При определении массовой концентрации в две мерные колбы вместимостью 100 см3 отбирают соответствующей пипеткой по 4.20 объем V1, см3, подготовленной по разделу 5 пробы продукта, указанный в таблице 3, доводят до метки подвижной фазой по 7.3 и тщательно перемешивают.
При определении массовой доли в двух стаканах взвешивают массу m, г, подготовленной по разделу 5 пробы продукта, указанную в таблице 3, с записью результата взвешивания до 0,001 г, переносят содержимое из них в две мерные колбы вместимостью 100 см3, доводят до метки подвижной фазой по 7.3 и тщательно перемешивают.
Рекомендуемые объем или масса пробы продукта в зависимости от ожидаемого содержания сукралозы
При наличии в полученном растворе пробы визуально видимых нерастворимых частиц, осадка, мякоти его фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента», отбрасывая первые порции фильтрата.
8.2.2 Твердофазная экстракция
Операции проводят с применением манифолда по 4.9.
Картридж для твердофазной экстракции по 4.13 подготавливают (кондиционируют) пропусканием последовательно 3 см3 метанола по 4.28 и 3 см3 дистиллированной воды.
Сразу же, не допуская осушения рабочей поверхности, пропускают через подготовленный картридж 3 см3 раствора пробы по 8.2.1 со скоростью 1 — 2 капли в секунду, затем промывают три раза по 1 см3 воды, отбрасывая эти порции. Затем промывают картридж 3 см3 метанола, собирая элюат в пробирку по 4.23.
Пробирку помещают в твердотельный блок по 4.7 и проводят выпаривание содержимого в токе азота при температуре не более 70 °C до получения сухого остатка на дне.
Полученный сухой остаток растворяют, добавляя в пробирку 3 см3 подвижной фазы по 7.3, тщательно перемешивают на вортексе и фильтруют через мембранный фильтр по 4.12 в виалу для дальнейшего хроматографического определения по 8.2.3.
8.2.3 Хроматографическое определение
Вводят в инжектор хроматографа элюат, полученный по 8.2.2, и проводят определения в условиях, указанных в 8.1.
Пример типовой хроматограммы приведен в приложении А.
Идентификацию пика сукралозы проводят по времени удерживания, сравнивая с пиками на хроматограммах, полученных для градуировочных растворов по 7.5.
9 Обработка и оформление результатов измерений
9.1 Обработка результатов измерений
9.1.1 Обработку хроматограмм проводят с помощью программного обеспечения в составе хроматографа с использованием градуировочной зависимости по 7.5.
9.1.2 Относительное расхождение времени удерживания на хроматограмме пробы не должно отличаться более чем на 5% от времени удерживания, установленного по 7.5. Если данное условие не выполняется, определения проводят заново.
При отсутствии пика на хроматограмме пробы, соответствующем времени удерживания, установленного по 7.5, делают вывод, что сукралоза в пробе отсутствует.
9.1.3 Полученные значения площади пика на хроматограмме пробы используют для расчета содержания сукралозы при условии, что они не выходят за диапазон градуировочной зависимости.
В случае если значение площади пика на хроматограмме пробы выходит за нижнюю или верхнюю границу диапазона градуировочной зависимости, измерение проводят заново, подбирая величину разбавления пробы (см. таблицу 3) так, чтобы ожидаемое значение площади пика находилось внутри диапазона градуировочной зависимости.
9.1.4 Массовую концентрацию сукралозы C, мг/дм3, вычисляют по формуле
\text{С } = \frac{\text{С}_{\text{гр},\text{п}} \cdot V}{V_{1}} , (4)
где Cгр,п — массовая концентрация сукралозы в пробе продукта, найденная по градуировочной зависимости, мг/дм3;
V — объем мерной колбы, взятой для разбавления, V = 100 см3;
V1 — объем пробы, см3 (см. таблицу 3).
Полученный результат округляют с точностью до второго десятичного знака.
9.1.5 Массовую долю сукралозы X, мг/кг (млн-1), вычисляют по формуле
X = \frac{\text{С}_{\text{гр},\text{п}} \cdot V \cdot 1000}{m \cdot 1000} , (5)
где Cгр,п — массовая концентрация сукралозы в пробе продукта, найденная по градуировочной зависимости, мг/дм3;
m — масса пробы, г (см. таблицу 3);
1000 — коэффициент согласования единиц массы и объема.
Полученный результат округляют с точностью до второго десятичного знака.
9.2 Приемлемость результатов, полученных в условиях повторяемости (в одной лаборатории)
Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (два единичных измерения, n = 2), проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6.
Результаты определений считаются приемлемыми при условии
|C_{1} - C_{2}| \leq 0,01 \cdot r_{\text{отн}} \cdot \overline{\text{С}} или |\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}| \leq 0,01 \cdot r_{\text{отн}} \cdot \overline{\text{Х}}, (6)
где C1, C2 — результаты параллельных измерений массовой концентрации сукралозы, мг/дм3;
X1, X2 — результаты параллельных измерений массовой доли сукралозы, мг/кг (млн-1);
\overline{\text{С}} — среднеарифметическое значение результатов параллельных измерений массовой концентрации сукралозы, мг/дм3;
\overline{\text{Х}} — среднеарифметическое значение результатов параллельных измерений массовой доли сукралозы, мг/кг (млн-1);
rотн — предел повторяемости (см. таблицу 4), %.
При невыполнении условия (6) получают еще два результата в соответствии с процедурой, описанной в стандарте, и в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов четырех параллельных измерений в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (пункты 5.3.3, 5.3.4). Если расхождение между результатами параллельных измерений превышает критический диапазон CR0,95, указанный в таблице 4, выясняют и устраняют причины плохой повторяемости результатов и повторяют измерения.
9.3 Приемлемость результатов, полученных в условиях воспроизводимости
9.3.1 Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:
а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;
б) проверке совместимости результатов измерений, полученных при сравнительных испытаниях.
9.3.2 Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует контрольные пробы, оставленные на хранение.
9.3.3 Результаты измерений, полученные в двух лабораториях, считаются приемлемыми при выполнении условия:
|\overline{C_{1,\text{лаб}}} - \overline{C_{2,\text{лаб}}}| \leq 0,01 \cdot R_{\text{отн}} \cdot \overline{\text{С}_{c\text{р}.\text{лаб}}} или |\overline{X_{1,\text{лаб}}} - \overline{X_{2,\text{лаб}}}| \leq 0,01 \cdot R_{\text{отн}} \cdot \overline{X_{c\text{р}.\text{лаб}}}, (7)
где \overline{C_{1,\text{лаб}}} , \overline{C_{2,\text{лаб}}} — результаты измерений массовой концентрации сукралозы, полученные в первой и второй лабораториях соответственно, мг/дм3;
\overline{X_{1,\text{лаб}}} , \overline{X_{2,\text{лаб}}} — результаты измерений массовой доли сукралозы, полученные в первой и второй лабораториях соответственно, мг/кг (млн-1);
\overline{\text{С}_{c\text{р}.\text{лаб}}} — среднеарифметическое значение результатов измерений массовой концентрации сукралозы, полученных в первой и второй лабораториях, мг/дм3;
\overline{X_{c\text{р}.\text{лаб}}} — среднеарифметическое значение результатов измерений массовой доли сукралозы, полученных в первой и второй лабораториях, мг/кг (млн-1);
Rотн — предел воспроизводимости (см. таблицу 4), %.
Метрологические характеристики метода при P = 0,95
При невыполнении условия (7) производят процедуры в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (пункты 5.2.2, 5.3.3, 5.3.4).
9.3.4 Приписанные характеристики неопределенности метода и ее составляющих при P = 0,95 приведены в таблице 4.
10 Протокол испытаний
10.1 Окончательный результат измерений оформляют в протоколе испытаний согласно ГОСТ ISO/IEC 17025 с указанием настоящего стандарта в виде
\overline{C} \pm 0,01 \cdot \overline{C} \cdot U_{\text{отн}} или \overline{\text{Х}} \pm 0,01 \cdot \overline{\text{Х}} \cdot U_{\text{отн}}, при P = 0,95, (8)
где \overline{C} — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой концентрации сукралозы, мг/дм3;
\overline{\text{Х}} — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой доли сукралозы, мг/кг (млн-1);
Uотн — относительное значение границ расширенной неопределенности результата измерений (см. таблицу 4), %.
Числовые значения границ расширенной неопределенности выражают числом, содержащим не более двух значащих цифр, при этом наименьший разряд числового значения окончательного результата измерений принимают таким же, как и наименьший разряд числового значения границ расширенной неопределенности.
10.2 Если числовое значение результата измерений выходит за нижнюю границу диапазона измерений, то приводят следующую запись: «Массовая концентрация (массовая доля) сукралозы менее 5 мг/дм3 (мг/кг)».
11 Контроль качества результатов измерений в лаборатории
11.1 Контроль качества результатов измерений осуществляют путем проверки приемлемости результатов определений, получаемых в условиях повторяемости по 9.2, путем поверки применяемых средств измерений, а также путем контроля правильности результатов измерений. В качестве средств контроля правильности используют государственные (межгосударственные) стандартные образцы состава сукралозы по ГОСТ 8.315.
11.2 Контроль стабильности результатов измерений осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (пункты 6.2.2, 6.2.3), используя методы контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости и среднеквадратического отклонения промежуточной прецизионности с применением контрольных карт Шухарта.
Периодичность контроля и процедуры контроля качества результатов измерений регламентируют в соответствии с внутренними процедурами системы менеджмента лаборатории и [2].
12 Сведения о метрологической прослеживаемости результатов измерений
Метрологическая прослеживаемость результатов измерений к единице величины «Массовая концентрация компонента», воспроизводимой ГЭТ 208 Государственным первичным эталоном единиц массовой (молярной) доли и массовой (молярной) концентрации органических компонентов в жидких и твердых веществах и материалах на основе жидкостной и газовой хромато-масс-спектрометрии с изотопным разбавлением и гравиметрии, обеспечивается применением стандартного образца с установленной прослеживаемостью <1>.
<1> Например, ГСО 12734-2024 состава сукралозы (Скр-ВНИИМ).
13 Требования безопасности
При проведении испытаний следует соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроприборами по ГОСТ 12.2.007.0 и ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на используемые приборы и реактивы.
14 Требования к персоналу
К выполнению и обработке результатов измерений допускаются специалисты, имеющие опыт работы на жидкостном хроматографе и прошедшие инструктаж по технике безопасности при работе с вредными веществами и пожарной безопасности. Внедрение метода в лаборатории проводят под руководством специалиста, владеющего методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и имеющего практические навыки в этой области.
Пример типовой хроматограммы приведен на рисунке А.1.
1 — компоненты напитка; 2 — сукралоза
Рисунок А.1 — Хроматограмма безалкогольного напитка типа «Кола»
Условия регистрации хроматограммы:
БИБЛИОГРАФИЯ
| [1] | Технический регламент Таможенного союза ТР ТС 023/2011 |
Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей |
|---|---|---|
| [2] | РМГ 76-2014 | Государственная система обеспечения единства измерений. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа |