ФС.2.5.0105. Фармакопейная статья. Чистотела большого трава

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0105.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0105-18" "ФС.2.5.0105.18. Фармакопейная статья. Чистотела большого трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.5.0105"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0105" "ФС.2.5.0105. Фармакопейная статья. Чистотела большого трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения высушенная трава дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения чистотела большого — Chelidonium majus L., сем. маковых — Papaveraceae.

Содержит не менее 0,6% суммы алкалоидов в пересчете на хелидонин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырье. Цельные или частично измельченные олиственные стебли с бутонами, цветками и плодами разной степени зрелости, кусочки стеблей, бутоны, листья, цветки и плоды. Стебли слегка ребристые, иногда вверху ветвистые, в междоузлиях полые, слабоопушенные, около 3 — 7 мм в диаметре, длиной до 50 см. Листья очередные, черешковые, в очертании широкоэллиптические, пластинки непарноперисторассеченные с 3 — 4 парами городчатолопастных сегментов, с верхней стороны голые, с нижней стороны опушенные. Бутоны обратнояйцевидные с двумя опушенными чашелистиками. Цветки по 4 — 8 в пазушных зонтиковидных соцветиях на цветоносах, удлиняющихся в период плодоношения. Венчик из 4 обратнояйцевидных лепестков, тычинок много. Плод — продолговатая, стручковидная, двустворчатая коробочка. Семена многочисленные, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью (под лупой), с мясистым белым придатком.

Цвет: стеблей — серовато-зеленый, зеленовато-желтый, желтовато-коричневый, зеленовато-коричневый и желтовато-зеленый с желтыми, коричневыми и черными вкраплениями; листьев с верхней стороны — коричневато-зеленый, зеленовато-коричневый или зеленый, с нижней стороны — светло-зеленый, зеленовато-серый или серовато-зеленый, бутонов — желтовато-зеленый, цветков — ярко-желтый или темно-желтый, плодов — серовато-зеленый или коричневый, семян — от темно-коричневого до черного. Запах характерный.

Измельченное сырье. Кусочки листьев, стеблей, бутонов, цветков, плодов различной формы и семян, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При просмотре под лупой (10x и др.) должны быть видны: кусочки листьев коричневато-зеленого или зеленого цвета с верхней стороны, светло-зеленого, серовато-зеленого цвета с нижней стороны; также встречаются кусочки стеблей слегка ребристые, серовато-зеленого, зеленовато-желтого, желтовато-коричневого или желтовато-зеленого цвета; фрагменты цветков желтого или темно-желтого цвета; кусочки створок плодов серовато-зеленого или коричневого цвета; семена от темно-коричневого до черного цвета, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью.

Цвет от серовато-зеленого до зеленовато-коричневого с желтыми, коричневыми и черными вкраплениями. Запах характерный.

Порошок. Смесь частиц листьев, стеблей, бутонов, цветков, плодов и семян различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При просмотре под лупой (10x и др.) видны: кусочки листьев коричневато-зеленого, зеленого, светло-зеленого, зеленовато-серого цвета; кусочки стеблей серовато-зеленого, зеленовато-желтого, желтовато-коричневого или желтовато-зеленого цвета; фрагменты лепестков желтого или темно-желтого цвета; кусочки створок плодов серовато-зеленого или коричневого цвета; семена от темно-коричневого до черного цвета, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью.

Цвет от серовато-зеленого до зеленовато-коричневого с желто-зелеными, желтыми вкраплениями, реже — с беловатыми, коричневыми и черными вкраплениями. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица только на нижней стороне листа с 4 — 7 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). На нижней стороне листа по жилкам встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные, состоящие из 7 — 20 клеток, иногда перекрученные или с отдельными спавшимися члениками. На верхушках городчатых зубцов при схождении жилок расположена гидатода с сосочковидным эпидермисом и 2 — 5 крупными водяными устьицами. Клетки губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима) и с крупными водяными устьицами. Жилки сопровождаются млечными трубками с темно-коричневым зернистым содержимым (после кипячения в щелочи).

При рассмотрении микропрепаратов лепестков с поверхности должны быть видны продольно вытянутые клетки эпидермиса с желто-коричневым содержимым, имеющие с наружной и внутренней стороны прямые или слабоизвилистые стенки. В мезофилле лепестка вдоль сосудов встречаются призматические кристаллы оксалата кальция.

Клетки эпидермиса чашелистиков и цветоножек продольно вытянутые и имеют прямые или слабоизвилистые стенки. Устьица аномоцитного типа, крупные, расположенные на чашелистиках с наружной стороны. На поверхности чашелистиков и цветоножек имеются многочисленные длинные простые волоски, характерные для сырья чистотела, и их фрагменты. В основании чашелистиков жилки сопровождаются млечными трубками с темно-коричневым зернистым содержимым. Пыльца округлая, шиповатая.

При рассмотрении «давленого» микропрепарата стебля должны быть видны продольно вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками, устьица аномоцитного типа, на поверхности встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные. Паренхима характеризуется клетками вытянутой формы, наличием крахмальных зерен, механических волокон, сосудов спирального, лестничного, сетчатого и кольчатого типа.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны фрагменты клеток эпидермиса листа с извилистыми стенками. На фрагментах нижней стороны листа и наружной стороне чашелистиков обнаруживаются устьица аномоцитного типа. Во фрагментах эпидермиса лепестков имеется желто-коричневое содержимое. На некоторых фрагментах нижней стороны листа и чашелистиков встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные, состоящие из 7 — 20 клеток, иногда перекрученные или с отдельными спавшимися члениками, и их фрагменты. Фрагменты клеток губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима). В мезофилле фрагментов встречаются млечные трубки вдоль жилок с темно-коричневым содержимым, механические волокна. Проводящие пучки представлены спиральными, лестничными, сетчатыми и кольчатыми сосудами.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная — вода — пропанол 1:9:90

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Помещают 0,4 г измельченного сырья в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл уксусной кислоты разведенной 12% и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин при периодическом перемешивании. После охлаждения раствор фильтруют через беззольный фильтр в делительную воронку вместимостью 250 мл, к фильтрату прибавляют аммиака раствор концентрированный 25% до pH 9,0 и встряхивают с 30 мл метиленхлорида. После разделения органическую фазу (нижний слой) фильтруют через беззольный фильтр с 5 г натрия сульфата безводного в круглодонную колбу вместимостью 100 мл и выпаривают на роторном испарителе в вакууме при температуре 40 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл метанола.

Раствор сравнения. Около 2 мг метилового красного и около 2 мг папаверина гидрохлорида растворяют в 10 мл спирта 96%.

Реактив для детектирования 1. Реактив Драгендорфа.

Реактив для детектирования 2. Натрия нитрита раствор 10%.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают реактивом для детектирования 1 и высушивают, затем обрабатывают реактивом для детектирования 2, высушивают и просматривают при дневном свете.

Результат

На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться в нижней трети пластинки зона адсорбции серо-коричневого или коричневого цвета (папаверина гидрохлорид) и в верхней трети пластинки зона адсорбции красного цвета (метиловый красный).

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться в средней трети пластинки две интенсивные зоны адсорбции коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Качественные реакции

1. Измельченное сырье или порошок равномерно рассыпают на листе черного цвета и рассматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм. Должны наблюдаться частицы с флуоресценцией желтого или зеленовато-желтого цвета (соответствует изломам черешков листьев и внутренней поверхности стеблей; обусловлена наличием алкалоидов) и с флуоресценцией сине-голубого цвета (соответствует поверхности листьев и стеблей; обусловлена наличием кутикулы).

2. Около 2,0 г измельченного сырья или порошка помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл аммиака раствора 10%, тщательно перемешивают, прибавляют 20 мл дихлорэтана, настаивают в течение 10 мин при периодическом встряхивании в закрытой колбе и фильтруют через беззольный фильтр. Затем 10 мл фильтрата помещают в пробирку с притертой пробкой, прибавляют 1 мл серной кислоты разведенной 9,8% и встряхивают в течение 3 мин; должно наблюдаться желто-оранжевое окрашивание верхнего слоя и хлопьевидные сгустки в нем (алкалоиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 15,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 5%.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырье, изменившее окраску (потемневшее, почерневшее). Цельное сырье — не более 3%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье: не более 1%.

Минеральная примесь. Не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В колбу со шлифом вместимостью 500 мл помещают 0,75 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 200 мл уксусной кислоты разведенной 12% и нагревают в водяной бане 30 мин при периодическом перемешивании. После охлаждения содержимое колбы с помощью уксусной кислоты разведенной 12% количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 20 мл фильтрата.

В делительную воронку вместимостью 250 мл переносят 25,0 мл фильтрата, в которую затем последовательно добавляют 6 мл аммиака раствора концентрированного 25% и 100 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 30 мин. После расслоения нижний (органический) слой отделяют. В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мл органического слоя и выпаривают при температуре 40 °C на роторном испарителе в вакууме досуха. Сухой остаток растворяют в 2 — 3 мл спирта 96%, слегка нагревая колбу в горячей воде, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 2 раза по 10 мл серной кислоты разведенной 9,8% и переносят в ту же мерную колбу, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 1,0% сернокислого, закрывают пробкой и тщательно перемешивают. Доводят объем раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл серной кислоты разведенной 9,8% и 5 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 1,0% сернокислого. Колбу закрывают пробкой и тщательно перемешивают и доводят объем раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Оба раствора помещают в водяную баню на 20 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры и, при необходимости, доводят объем раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 570 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы алкалоидов в пересчете на хелидонин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

933 — удельный показатель поглощения продуктов реакции хелидонина с хромотроповой кислотой при длине волны 570 нм, A_{\text{см}}^{1\%} ;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Примечание — В случае завышенного содержания суммы алкалоидов (в пересчете на хелидонин, в %) расчет количества лекарственного растительного сырья, необходимого для производства лекарственного препарата следует проводить по формуле, приведенной в ОФС «Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции растительного происхождения».

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».