ФС.2.5.0012. Фармакопейная статья. Душицы обыкновенной трава
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 15.03.2024. В соответствии с Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120 данный документ введен в действие с 13.03.2024. Взамен ФС.2.5.0012.15.
ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ
flowchart LR n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье" n1["ФС.2.5.0012.15"]:::rst click n1 "https://bukva.ai/docs/gf-xiii-minzdrav-rossii-ministerstvo-399" "ФС.2.5.0012.15. Фармакопейная статья'Душицы обыкновенной трава.'" n2["ФС.2.5.0012"]:::doc click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0012" "ФС.2.5.0012. Фармакопейная статья. Душицы обыкновенной трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)" n1 --> n2 n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
| Душицы обыкновенной трава Origani vulgaris herba | ФС.2.5.0012 |
| Взамен ФС.2.5.0012.15 |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная во время цветения, высушенная трава многолетнего культивируемого и дикорастущего травянистого растения душицы обыкновенной — Origanum vulgare L., сем. яснотковых — Lamiaceae. Содержит:
- цельное сырье: не менее 0,1% эфирного масла в пересчете на сухое сырье;
- измельченное сырье: не менее 0,08% эфирного масла в пересчете на сухое сырье;
- не менее 0,8% суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин в сухом сырье.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».
Цельное сырье. Цельные или частично измельченные цветоносные, олиственные стебли длиной до 20 см. Листья супротивные, черешковые, продолговато-яйцевидные, к верхушке заостренные, мелкозубчатые или почти цельнокрайние длиной 2 — 4 см, с белесыми волосками, расположенными, в основном, по жилкам, и коричневатыми блестящими точками (погруженные железки), главным образом, с нижней стороны. Стебли четырехгранные, опушенные или почти голые, вверху разветвленные. Соцветия щитковидно-метельчатые на концах ветвей, раскидистые, многоцветковые, состоят из компактных или удлиненно-колосовидных полумутовок, на цветоносах видны блестящие мелкие округлые железки. Прицветники длиннее чашечки, продолговатые или яйцевидные, острые, без железок. Чашечка с треугольно-ланцетовидными зубцами, снаружи с редкими волосками, блестящими округлыми железками и торчащими из зева белесыми волосками, которые растут с внутренней стороны чашечки по линии вдоль оснований зубцов. Цветки длиной 3 — 5 мм, венчик двугубый, слегка опушенный. Семена мелкие, длиной около 1 мм, округлые с заостренным кончиком.
Цвет листьев сверху — зеленый, иногда с фиолетовым оттенком, снизу — светло-зеленый; стеблей — зеленый, коричневато-зеленый, редко — светло-коричневый, как правило, с фиолетовым оттенком; цвет прицветников — зеленовато-фиолетовый, чашечки — зеленовато-фиолетовый или фиолетовый; венчика — коричневато-розовый, реже коричневый; семян — коричневый или светло-коричневый. Запах характерный.
Измельченное сырье. Кусочки стеблей, часто продольно-расщепленных, листьев, а также отдельные цветки и семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.
При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x и др.) видны кусочки стеблей зеленых, коричневато-зеленых или светло-коричневых, часто с фиолетовым оттенком, нередко продольно-расщепленных с беловатой губчатой сердцевиной; кусочки зеленых листьев с блестящими коричневатыми точками (погруженные железки) и белесыми волосками; цельные зеленовато-фиолетовые или фиолетовые чашечки или их кусочки с железками и редкими волосками снаружи и длинными белесыми волосками на уровне зубцов с внутренней стороны; кусочки коричневого или коричневато-розового венчика с белесыми волосками; мелкие округлые коричневые или светло-коричневые семена.
Цвет измельченного сырья зеленый, серовато-зеленый с белыми, коричневыми, фиолетовыми, коричневато-фиолетовыми, беловато-зелеными и розовыми вкраплениями. Запах характерный.
Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».
Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса верхней стороны листа со слабоизвилистыми стенками, нижней стороны листа — с более извилистыми стенками; стенки клеток нередко четковидно-утолщенные. Устьица на обеих сторонах листа окружены 2 клетками эпидермиса, смежные стенки которых расположены перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Волоски 2 типов (простые и головчатые) расположены по всей пластинке листа, в большем количестве — на нижней его стороне. Простые волоски, главным образом, многоклеточные, с бородавчатой поверхностью и утолщенными стенками (у крупных волосков часто одна или более клеток спавшиеся); головчатые волоски на одноклеточной ножке с овальной одноклеточной головкой. Округлые эфирномасличные железки, у которых можно иногда видеть 8 радиально расположенных выделительных клеток, преобладают на нижней стороне листа и находятся в углублении ниже уровня эпидермиса (погруженные), у места прикрепления железки эпидермальные клетки образуют розетку, как правило, из 10 — 16 клеток. Клетки эпидермиса стебля почти многоугольные, вытянутые, волоски и устьица характерного строения, железки мелкие, редко встречаются ветвистые многоклеточные волоски. Эпидермис наружной поверхности чашечки с редкими устьицами, многочисленными простыми 2 — 3-клеточными волосками и крупными железками; с внутренней стороны чашечки клетки эпидермиса сильноизвилистые с хорошо заметной складчатостью кутикулы, по всей поверхности — мелкие головчатые волоски, по линии вдоль оснований зубцов расположены длинные многоклеточные волоски с бородавчатой кутикулой; в нижней части чашечки видны сосудистые пучки, окруженные пористыми толстостенными одревесневшими склеренхимными волокнами. Клетки эпидермиса венчика с наружной стороны извилистые, на лопастях видны многоклеточные волоски и редкие непогруженные железки; с внутренней стороны лопасти покрыты сосочковидными выростами, среди которых иногда встречаются пальцевидные волоски со штриховатой кутикулой, в средней трети венчика эти волоски многочисленные. В покровной ткани пыльников видны клетки с лучистым утолщением стенок; пыльцевые зерна — сферические, со слегка бородавчатой экзиной и 6 порами.
Рисунок 1 — Душицы обыкновенной трава
1 — фрагмент чашечки с наружной стороны: а — многоклеточные
волоски, просвечивающиеся с внутренней стороны зева,
б — многоклеточный волосок с наружной стороны, в — железка,
г — склеренхимные одревесневшие волокна (40x); 2 — фрагмент
эпидермиса верхней стороны листа: а — железка,
б — головчатый волосок, в — устьица диацитного типа
(200x); 3 — фрагмент эпидермиса нижней стороны листа:
а — многоклеточный волосок, б — головчатый волосок,
в — железка, г — устьица диацитного типа (200x);
4 — фрагмент эпидермиса прицветного листа:
а — многоклеточный волосок, б — головчатый волосок (200x);
5 — фрагмент чашечки с наружной стороны: а — многоклеточный
волосок, б — непогруженная железка (200x); 6 — фрагмент
эпидермиса листа: а — устьица диацитного типа, б — железка
с розеткой клеток вокруг, в — простой волосок фрагмента
эпидермиса прицветного листа (200x); 7 — фрагмент пыльника:
а — сферическая пыльца с шестью порами, б — клетки
с лучистым утолщением стенок (200x).
Определение основных групп биологически активных веществ
Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.
Подвижная фаза (ПФ). Вода — муравьиная кислота безводная — этилацетат — толуол 2:5:20:10.
Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл спирта 96%, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.
Раствор рутина. Растворяют 0,001 г рутина в 10 мл спирта 96%.
Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1% в спирте 96%.
Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5%.
На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 20 мкл испытуемого раствора и раствора рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку нагревают при температуре 100 — 105 °C в течение 2 — 3 мин, еще теплую обрабатывают последовательно реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2 и через 30 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желто-оранжевого или оранжевого цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желто-оранжевого цвета выше зоны адсорбции рутина (флавоноиды); над ней зона адсорбции синего или фиолетово-синего цвета, еще выше зона адсорбции ярко-голубого или голубого цвета со слабым светло-зеленым оттенком, над ней зона голубовато-синего цвета (фенолкарбоновые кислоты); допускается обнаружение других зон адсорбции.
ИСПЫТАНИЯ
Влажность. Не более 13,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).
Зола общая. Не более 10,0% (ОФС «Зола общая»).
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 5,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).
Измельченность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%.
Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%.
Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Сырье, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 7%.
Кусочки стеблей и боковых веточек, в том числе отделенные при анализе. Не более 40%.
Органическая примесь. Не более 1%.
Минеральная примесь. Не более 1%.
Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Эфирное масло. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 2, из 25,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, время перегонки 2 ч).
Сумма флавоноидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».
Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,80 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 50,0 мл спирта 60% и взвешивают с погрешностью +/- 0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1,5 ч. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят спиртом 60% до первоначальной массы. Извлечения фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 25 мл фильтрата.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Исходный раствор стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолина, прибавляют 25 мл спирта 96% и нагревают на водяной бане. Затем раствор охлаждают, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина, прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор сравнения стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца лютеолина в аналогичных условиях относительно раствора сравнения стандартного образца лютеолина.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot a_{\text{о}} \cdot 1 \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100 \cdot 100 \cdot P}{A_{\text{о}} \cdot a \cdot 50 \cdot 25 \cdot 1 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
Aо — оптическая плотность раствора стандартного образца лютеолина;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца лютеолина, г;
P — содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце лютеолина, %;
Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом по формуле:
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
549 — удельный показатель поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм (A_{1\text{см}}^{1\%}) ;
УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА
В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».
ХРАНЕНИЕ
В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».