ФС.2.5.0007. Фармакопейная статья. Бессмертника песчаного цветки
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 15.03.2024. В соответствии с Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120 данный документ введен в действие с 13.03.2024. Взамен ФС.2.5.0007.15.
ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ
flowchart LR n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье" n1["ФС.2.5.0007.15"]:::rst click n1 "https://bukva.ai/docs/gf-xiii-minzdrav-rossii-ministerstvo-394" "ФС.2.5.0007.15. Фармакопейная статья'Бессмертника песчаного цветки.'" n2["ФС.2.5.0007"]:::doc click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0007" "ФС.2.5.0007. Фармакопейная статья. Бессмертника песчаного цветки (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)" n1 --> n2 n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Бессмертника песчаного цветки Helichrysi arenarii flores | ФС.2.5.0007 |
| Взамен ФС.2.5.0007.15 |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные до распускания цветков и высушенные корзинки дикорастущего многолетнего травянистого растения бессмертника (цмина) песчаного — Helichrysum arenarium (L.) Moench, сем. астровых — Asteraceae.
Содержит не менее 3,0% суммы флавоноидов в пересчете на изосалипурпозид в сухом сырье.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Цветки».
Цельное сырье. Щитковидные соцветия, состоящие из 20 — 35 мелких корзинок, или части этих соцветий, иногда отдельные корзинки и цветки. Корзинки по форме шарообразные или слабо-вытянутые, одиночные или по несколько вместе, диаметром 4 — 7 мм каждая, с остатками беловойлочных цветоносов (осевых частей соцветия) длиной не более 1 см. Цветки расположены на голом цветоложе и окружены многочисленными неплотно прижатыми листочками обвертки. Все цветки в корзинке трубчатые обоеполые, с хохолком; отгибы венчика пятизубчатые. Обвертка корзинки 3 — 4-рядная, состоит из черепитчато расположенных, лепестковидных, неплотно прижатых, выпуклых листочков лимонно-желтого цвета. Листочки обвертки сухие, пленчатые, блестящие, неоднородные по форме: наружные — широко ланцетовидные; внутренние — линейные. Все листочки обвертки с пленчатым краем и коричневатой или зеленовато-серой полоской посередине. Цветоложе корзинок плоское или слегка выпуклое, мелко-ямчатое. Цветки корзинки, как правило, морфологически различимы и разделяются на срединные и краевые.
Краевые цветки немногочисленные (обычно 5 — 7), пестичные или обоеполые, с длинной узкой трубкой околоцветника; венчики по форме нитевидные, пятизубчатые, лимонно-желтого цвета.
Срединные цветки многочисленные, мелкие, в 1,5 — 2 раза мельче краевых; обоеполые, трубки их венчиков 5-зубчатые и с 3 — 4 дополнительными менее выраженными зубцами, обычно желтые или оранжевые.
Цвет листочков обвертки лимонно-желтый, иногда с красновато-оранжевыми верхушками, венчиков цветков — лимонно-желтый или оранжевый; цветоносов и листьев — серый, зеленовато- или коричневато-серый.
Измельченное сырье. Отдельные цветоложа и их кусочки с остатками или цельными листочками обвертки, отдельные листочки обвертки, трубчатые цветки и их части, кусочки цветоносов, листьев и стеблей, корзинки одиночные шаровидные, редко по 2 — 3 вместе, размером до 10 мм.
При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x, 16x) видны цельные корзинки, отдельные мелкоямчатые цветоложа или их кусочки зеленовато-коричневого цвета; цветоложа с остатками или цельными листочками обвертки; отдельные пленчатые листочки обвертки лимонно-желтого цвета с коричневатой или зеленовато-серой полосой по центру в нижней части; трубчатые цветки с пятизубчатым венчиком желтого или оранжевого цвета, как правило, без хохолка и завязи; белесые кусочки многоклеточных волосков хохолка, отдельные завязи коричневого цвета; кусочки опушенных цветоносов, листьев и стеблей беловато- или зеленовато-серого, редко серовато-коричневого цвета; кусочки цветоносов, листьев и стеблей почти голые (волоски удалены при измельчении) от темно-коричневого до зеленовато-коричневого цвета; редко встречаются продольно расщепленные кусочки стеблей с белесой сердцевиной.
Цвет серовато-желтый с лимонно-желтыми, оранжевыми, беловато- или зеленовато-серыми, редко серовато-коричневыми, темно-коричневыми и зеленовато-коричневыми вкраплениями.
Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».
Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны: листочки обвертки, мезофилл которых состоит из клеток с утолщенными пористыми стенками, в суженной части листочка — многочисленные простые бичевидные волоски, состоящие из нескольких коротких клеток основания и одной длинной конечной клетки; эфирномасличные железки, овальные, двухрядные, многоярусные, состоящие из 8 — 12 клеток; слегка вытянутые клетки эпидермиса с устьицами аномоцитного типа; по центру листочка, в мезофилле — многочисленные короткие трахеиды проводящего пучка; отдельные цветки, у которых видна овальная завязь, сплошь покрытая крючкообразно-загнутыми волосками, в основании завязи — кольцо из четырехугольных клеток с утолщенными одревесневшими оболочками, на верхушке завязи кольцом расположен хохолок, состоящий из длинных многоклеточных волосков, сросшихся у основания, хохолок часто отломан и встречаются только отдельные волоски или их фрагменты; венчик пятизубчатый трубчатый, клетки эпидермиса внутренней стороны зубцов с сосочковидными выростами и складчатой кутикулой, наружной стороны — с многочисленными железками характерного строения; пыльники пленчатые в количестве 5, пестик с двухлопастным рыльцем; пыльца округлая и округло-трехгранная шиповатая трехпоровая с шиповатой экзиной; фрагменты цветоложа незрелого соцветия с многочисленными зачатками трубчатых цветков с железками и волосками хохолка; фрагменты цветоложа зрелого соцветия с многочисленными ответвлениями проводящих пучков, окруженные кольцом округло-многоугольных клеток с утолщенными одревесневшими оболочками (места прикрепления завязей трубчатых цветков); фрагменты листа, клетки эпидермиса которого с нижней стороны с извилистыми, с верхней — с почти прямыми стенками, устьица аномоцитного типа с обеих сторон листа, многочисленные волоски, состоящие из крупного многоклеточного основания и длинной конечной шнуровидной клетки с расширенным основанием, железки характерного строения, более многочисленные с нижней стороны листа; фрагменты цветоносов и стеблей, эпидермис которых состоит из продольно-вытянутых клеток и сплошь покрыт волосками характерного строения, встречаются железки и устьица; в сердцевине стебля, среди удлиненно-прямоугольных клеток паренхимы, расположены сосудистые пучки, представленные сетчато-лестничными, лестничными и спиральными сосудами.
Рисунок 1 — Бессмертника песчаного цветки
1 — фрагмент эпидермиса лепестка венчика:
а — эфирномасличные железки, б — сосочковидные выросты
(200x); 2 — фрагмент завязи: а — крючкообразно-загнутые
волоски, б — кольцо механических клеток (200x); 3 — волоски
хохолка (200x); 4 — фрагмент эпидермиса листа: а — устьица
аномоцитного типа, б — простой многоклеточный волосок
(100x); 5 — фрагмент эпидермиса листа с бичевидными
волосками (100x); 6 — лестничные (а)
и спиральные (б) сосуды (200x).
Определение основных групп биологически активных веществ
Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.
Подвижная фаза (ПФ). Вода — спирт 96% — хлороформ 3:16:26.
Раствор стандартного образца лютеолин-7-глюкозида. Около 10 мг лютеолин-7-глюкозида растворяют в 10 мл спирта 70% при нагревании.
Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1% в спирте 96%.
Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5%.
На линию старта пластинки наносят 20 мкл исходного раствора (раздел «Количественное определение») и 10 мкл раствора стандартного образца лютеолина-7-глюкозида. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 2 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования 1, затем опрыскивают реактивом для детектирования 2 и выдерживают при температуре 100 — 105 °C в течение 3 — 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца лютеолин-7-глюкозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией ярко-желтого цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 — 3 зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета выше линии старта, над ними — зона адсорбции с флуоресценцией желто-оранжевого цвета слабой интенсивности; зона адсорбции с флуоресценцией ярко-желтого цвета выше уровня зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида, над ней зона адсорбции с флуоресценцией светло-голубого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.
ИСПЫТАНИЯ
Влажность. Не более 12,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).
Зола общая. Не более 8,0% (ОФС «Зола общая»).
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).
Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%.
Измельченное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5%.
Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Кусочки стеблей и цветоносов. Не более 10%.
Соцветия с остатками стеблей длиной свыше 1 см. Цельное сырье: не более 5%.
Остатки корзинок (цветолож с обвертками). Цельное сырье: не более 5%.
Сырье, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 3%.
Органическая примесь. Не более 0,5%.
Минеральная примесь. Не более 0,5%.
Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья в колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70% и взвешивают с погрешностью +/- 0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Затем содержимое колбы охлаждают, доводят при необходимости содержимое колбы до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 4 капли алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, 1 каплю уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 каплю уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Исходный раствор стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,025 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца изосалипурпозида, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца изосалипурпозида, прибавляют 4 капли алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96% и 1 каплю уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор сравнения стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца изосалипурпозида, прибавляют 1 каплю уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 418 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца изосалипурпозида относительно раствора сравнения стандартного образца изосалипурпозида.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на изосалипурпозид в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot 50 \cdot 50 \cdot 100 \cdot 100 \cdot P}{A_{0} \cdot a \cdot 1 \cdot 25 \cdot 25 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца изосалипурпозида;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца изосалипурпозида, г;
P — содержание изосалипурпозида в фармакопейном стандартном образце изосалипурпозида, %;
Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на изосалипурпозид вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса изосалипурпозида с алюминия хлоридом по формуле:
X = \frac{A \cdot 50 \cdot 50 \cdot 100}{500 \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} ,
500 — удельный показатель поглощения комплекса изосалипурпозида с алюминия хлоридом при длине волны 418 нм (A_{1\text{см}}^{1\%}) ;
УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА
В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».
ХРАНЕНИЕ
В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».