ФС.2.1.0103. Фармакопейная статья. Инозин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n1["ФС.2.1.0103.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0103-18" "ФС.2.1.0103.18. Фармакопейная статья. Инозин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.1.0103"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0103" "ФС.2.1.0103. Фармакопейная статья. Инозин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

9-( \beta -D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% C10H12N4O5 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно или мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца инозина.

2. ВЭЖХ. (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца инозина (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 20 мл воды. К 2 мл полученного раствора прибавляют 5 мл железа (III) хлорида 0,1% раствора в хлористоводородной кислоте концентрированной и 5 мл орцина раствора 10% в спирте 96%. Смесь выдерживают в течение 20 мин в кипящей водяной бане; должно появиться зеленое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Удельное вращение. От -47 до -54 в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

pH раствора. От 4,8 до 5,8 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 700 мл воды и доводят значение pH калия гидроксида раствором 10% до 5,55, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B и 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A (гуанозин): 2-амино-9-( \beta -D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [118-00-3].

Примесь B (гипоксантин): 1,7-Дигидро-6H-пурин-6-он.

Хроматографические условия

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Инозин — 1 (около 10 мин); примесь B — около 0,5; примесь A — около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и B используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

• фактор асимметрии пика (AS) инозина должен быть не более 1,2;
• относительное стандартное отклонение площади пика инозина должно быть не более 5,0% (6 введений);

На хроматограмме стандартного раствора:

• разрешение (RS) между пиками инозина и примеси A должно быть не менее 1,25;
• разрешение (RS) между пиками примеси B и инозина должно быть не менее 1,25.

Содержание примеси A или примеси B в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 25 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot 100} ,

где S1 — площадь пика примеси A или примеси B на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика примеси A или примеси B на хроматограмме испытуемого раствора;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца примеси A или фармакопейного стандартного образца примеси B, мг;

P — содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце индапамида, %.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• сумма площадей пиков примесей A и B не должна превышать площадь пика инозина на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,5%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади пика инозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 1,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Железо. Не более 0,0015%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Железо», в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 3 мкг/мл).

Медь. В фарфоровом тигле прокаливают 1,5 г субстанции, остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, осторожно разбавляют водой до 15 мл и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл аммиака раствора 10% и фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

<*> Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 4 мг субстанции в 0,5 мл N-метилглюкамина раствора 0,8% на мышь, внутривенно. Срок наблюдения — 48 ч.

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

<*> Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 20 мг/мл. Для проведения испытания препарат разводят не менее чем в 60 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца инозина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца и раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца инозина:

• относительное стандартное отклонение площади пика инозина должно быть не более 0,73% (6 введений);
• фактор асимметрии пика (AS) инозина должен быть не более 1,5.

Содержание инозина C10H12N4O5 в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 25 \cdot 1 \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot 1 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика инозина на хроматограмме раствора сравнения;

S0 — площадь пика инозина на хроматограмме раствора стандартного образца инозина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца инозина, мг;

P — содержание инозина в фармакопейном стандартном образце инозина, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.