ФС.2.1.0103.18. Фармакопейная статья. Инозин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том III»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n1["ФС.2.1.0103.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0103-18" "ФС.2.1.0103.18. Фармакопейная статья. Инозин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.1.0103"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0103" "ФС.2.1.0103. Фармакопейная статья. Инозин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

9-( \beta -D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он
C10H12N4O5	М.м. 268,23

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% C10H12N4O5 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно (медленно) растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.

Подлинность.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку (Приложение).

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора (раздел «Количественное определение») должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме стандартного раствора.

3. Качественная реакция. 0,1 г субстанции растворяют в 20 мл воды. К 2 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 0,1% раствора железа (III) хлорида в хлористоводородной кислоте концентрированной и 5 мл 10% раствора орцина в спирте 96%. Смесь выдерживают в течение 20 мин в кипящей водяной бане; должно появиться зеленое окрашивание.

<*> Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).

<*> Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Удельное вращение. От -47 до -54 в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции, ОФС «Поляриметрия»).

pH. От 4,8 до 5,8 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). 2,72 г калия дигидрофосфата растворяют в 700 мл воды, доводят pH 10% раствором калия гидроксида до 5,55 +/- 0,05, доводят объем раствора водой до 1 л, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Испытуемый раствор. Около 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до 25,0 мл.

Раствор сравнения А. 1,0 мл испытуемого раствора доводят ПФ до 100,0 мл.

Раствор сравнения Б. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца инозина, около 50 мг (точная навеска) гипоксантина и около 50 мг (точная навеска) гуанозина помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем ПФ до метки.

Примечание.

Гуанозин — 2-амино-9-( \beta -D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он, CAS 118-00-3.

Хроматографические условия

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А и Б.

Идентификация примесей. Примеси гуанозина и гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора идентифицируют по хроматограмме раствора сравнения Б. Относительные времена удерживания компонентов: инозин — 1 (около 10 мин); гипоксантин — около 0,5; гуанозин — около 1,1.

Пригодность хроматографической системы с использованием растворов сравнения А и Б определяется в соответствии с ОФС «Хроматография» со следующими уточнениями.

На хроматограмме раствора сравнения А:

• фактор асимметрии пика (As) инозина должен быть не более 1,2;
• относительное стандартное отклонение площади пика инозина должно быть не более 5,0% (6 определений);
• эффективность хроматографической системы (N), рассчитанная по пику инозина, должна составлять не менее 3400 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение между пиками инозина и гуанозина должно быть не менее 1,25.

Содержание гипоксантина и гуанозина в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика гипоксантина или гуанозина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика гипоксантина или гуанозина на хроматограмме раствора сравнения Б;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска гипоксантина или гуанозина, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание гипоксантина или гуанозина в соответствующей субстанции, %.

Допустимое содержание примесей:

Суммарное содержание гипоксантина и гуанозина должно быть не более 2,5%.

Суммарная площадь пиков неидентифицированных примесей на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05%).

Вода. Не более 1,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы», метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Железо. Не более 0,0015%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Железо» в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).

Медь. 1,5 г субстанции прокаливают в фарфоровом тигле, остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, разбавляют водой до 15 мл и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл 10% раствора аммиака и фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

<*> Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 4 мг субстанции в 0,5 мл 0,8% раствора N-метилглюкамина на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

<*> Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора», «Аномальная токсичность» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 20 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 60 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при 241 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Содержание инозина C10H12N4O5 в процентах (X) в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot 100 \cdot 100 \cdot 100}{455 \cdot a \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

455 — удельный показатель поглощения инозина A_{1\text{см}}^{1\%} ;

a — навеска субстанции, г;

W — содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

Хранение. В защищенном от света месте.