ФС.2.1.0690. Фармакопейная статья. Дигоксин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Дигоксин	ФС.2.1.0690
Дигоксин
Digoxinum	Взамен ФС 42-1537-98

C41H64O14 [20830-75-5]	М.м. 780,94

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

12\beta ,14-Дигидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% дигоксина C41H64O14 в пересчете на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим в смеси равных объемов метанола и метиленхлорида, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дигоксина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксина (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +13,9 до +15,9 в пересчете на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество (2% раствор субстанции в смеси метанол — метиленхлорид 1:1). (ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 0,5% в смеси метанол — метиленхлорид (1:1) должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Цветность раствора. Раствор субстанции 0,5% в смеси метанол — метиленхлорид (1:1) должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил — вода 10:90.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода — ацетонитрил 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дигоксигенина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дигоксигенина (примесь C), растворяют в метаноле, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг ланатозида Ц (примесь H) и растворяют в метаноле, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца дигоксина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, E, F, G и K, доводят объем раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь A: 14-гидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигитоксин) [71-63-6].

Примесь B: 14, 16\beta -дигидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (гитоксин) [4562-36-1].

Примесь C: 3\beta , 12\beta ,14-тригидрокси- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигоксигенин) [1672-46-4].

Примесь D: 12\beta ,14-дигидрокси- 3\beta -(2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозилокси)- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигоксигенина монодигитоксозид) [5352-63-6].

Примесь E: 12\beta ,14, 16\beta -тригидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигинатин) [52589-12-5].

Примесь F: 12\beta ,14-дигидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигоксигенина бисдигитоксозид) [5297-05-2].

Примесь G: 12\beta ,14-дигидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-арабино-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (неодигоксин) [55576-67-5].

Примесь H: 12\beta ,14-дигидрокси- 3\beta -{[ \beta -D-глюкопиранозил-(1->4)-3-O-ацетил-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (ланатозид Ц) [17575-22-3].

Примесь I: 3\beta -{[3-O-ацетил-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 12\beta ,14-дигидрокси- 5\beta -кард-20(22)-енолид (\alpha - \text{ацетилдигоксин}) [5511-98-8].

Примесь J: 3\beta -{[4-O-ацетил-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 12\beta ,14-дигидрокси- 5\beta -кард-20(22)-енолид (\beta - \text{ацетилдигоксин}) [5355-48-6].

Примесь K: 12\beta ,14-дигидрокси- 3\beta -{[2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-(1->4)-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид (дигоксигенина тетракисдигитоксозид) [31539-05-6].

Примесь L: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 5	78	22
5 — 15	78 \rightarrow 30	22 \rightarrow 70

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца дигоксигенина, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дигоксин — 1 (около 4,3 мин); примесь C — около 0,3; примесь E — около 0,5; примесь F — около 0,6; примесь G — около 0,8; примесь L — около 1,4; примесь K — около 1,6; примесь B — около 2,2; примесь A — около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дигоксина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, E, F, G и K.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками ланатозида Ц (примесь H) и дигоксина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси F не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,5%);
• площадь пика примеси C не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксигенина (не более 1,0%);
• площадь каждого из пиков примеси E, K не должна превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);
• площадь пика примеси G не должна превышать 0,8 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8%);
• площадь каждого из пиков примеси A, B не должна превышать 0,5 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
• площадь пика примеси L не должна превышать 0,3 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
• сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей A, B, C, E, F, G, K, L не должна превышать 0,7 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 3,5 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г (точная навеска) субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

<*> Бактериальные эндотоксины. Менее 200 МЕ/мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

---

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца дигоксина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дигоксина, растворяют в метаноле, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца дигоксина и испытуемый раствор.

Содержание дигоксина C41H64O14 в субстанции в пересчете на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 100 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика дигоксина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца дигоксина, мг;

P — содержание дигоксина в фармакопейном стандартном образце дигоксина, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---