ОФС.1.2.2.2.0012. Общая фармакопейная статья. Тяжелые металлы

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 1. Общие методы анализа"
  n1["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n2["ОФС.1.2.2.2.0012.15"]:::rst
  click n2 "https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-2-2-0012-15" "ОФС.1.2.2.2.0012.15. Общая фармакопейная статья. Тяжелые металлы (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n3["ОФС.1.2.2.2.0012 (от 20.07.2023 N 377)"]:::rst
  click n3 "https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-2-2-0012" "ОФС.1.2.2.2.0012. Общая фармакопейная статья. Тяжелые металлы (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n4["ОФС.1.2.2.2.0012 (от 11.04.2025 N 188)"]:::doc
  n3 --> n4
  n2 --> n3
  n1 --> n2
  n0 --> n2
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Методы определения тяжелых металлов (свинец, ртуть, висмут, сурьма, олово, кадмий, серебро, медь, молибден, ванадий, рутений, платина, палладий) основаны на образовании окрашенных сульфидов. Кроме указанных элементов окрашенные сульфиды образуют железо в количестве более 0,05% и мышьяк.

В качестве источника сульфидов используют раствор натрия сульфида или тиоацетамидный реактив.

После проведения реакции интенсивность окраски испытуемого раствора сравнивают с окраской эталонного раствора. Окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать окраску эталонного раствора.

Определение считается достоверным, если в эталонном растворе наблюдается слабое коричневое окрашивание по сравнению с контрольным раствором.

Определение тяжелых металлов в растворах лекарственных средств возможно для субстанций, образующих прозрачные, бесцветные растворы и не влияющих на взаимодействие ионов металлов с сульфид-ионом вследствие наличия комплексообразующих свойств. В остальных случаях определение проводят из сульфатной золы или после другого способа минерализации испытуемого лекарственного средства.

Предельно допустимое содержание тяжелых металлов, метод испытания и условия подготовки испытуемого образца должны быть указаны в фармакопейной статье.

Приведенные в данной ОФС методы не являются селективными и могут быть использованы только для определения предельного суммарного содержания перечисленных тяжелых металлов в лекарственных средствах.

Для количественного определения отдельных ионов следует использовать следующие методы:

• атомно-абсорбционную спектрометрию;
• атомно-эмиссионную спектрометрию с индуктивно связанной плазмой;
• масс-спектрометрию с индуктивно связанной плазмой.

Методики количественного определения тяжелых металлов в лекарственных средствах должны быть валидированы и описаны в фармакопейной статье.

Метод 1

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Эталонный раствор. К 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл прибавляют 8 мл воды.

Контрольный раствор. 10 мл воды.

Примечание. Если при приготовлении испытуемого раствора используется органический растворитель, то эталонный, контрольный и стандартный растворы готовят с использованием того же растворителя.

К полученным растворам прибавляют по 1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, 2 капли натрия сульфида раствора 2%, перемешивают и через 1 мин сравнивают окраску растворов.

В сравниваемых растворах допустима слабая опалесценция от выделившейся серы.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

Метод 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Эталонный раствор. К 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл прибавляют 8 мл воды.

Контрольный раствор. 10 мл воды.

Примечание. Если при приготовлении испытуемого раствора используется органический растворитель, то эталонный, контрольный и стандартный растворы готовят с использованием того же растворителя.

К полученным растворам прибавляют по 2 мл ацетатного буферного раствора pH 3,5, перемешивают, прибавляют по 1 мл тиоацетамидного реактива, перемешивают и через 2 мин сравнивают окраску растворов.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

Метод 3А

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г (если не указано иначе в фармакопейной статье) испытуемого образца в присутствии серной кислоты концентрированной, обрабатывают при нагревании на сетке 2 мл аммония ацетата насыщенного раствора, нейтрализованного натрия гидроксида раствором 10%, прибавляют 3 мл воды и фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый 1% раствором уксусной кислоты, а затем горячей водой. Тигель и фильтр промывают 5 мл воды, пропуская ее через тот же фильтр в ту же пробирку.

Эталонный раствор 1. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Эталонный раствор 2. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Контрольный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но без испытуемого образца.

К полученным растворам прибавляют по 1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, 2 капли натрия сульфида раствора 2%, перемешивают и через 1 мин сравнивают окраску растворов.

В сравниваемых растворах допустима слабая опалесценция от выделившейся серы.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

Метод 3Б

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г (если не указано иначе в фармакопейной статье) испытуемого образца в присутствии серной кислоты концентрированной, обрабатывают при нагревании на сетке 2 мл аммония ацетата насыщенного раствора, нейтрализованного натрия гидроксида раствором 10%, прибавляют 3 мл воды и фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый 1% раствором уксусной кислоты, а затем горячей водой. Тигель и фильтр промывают 5 мл воды, пропуская ее через тот же фильтр в ту же пробирку.

Эталонный раствор 1. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Эталонный раствор 2. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Контрольный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но без испытуемого образца.

К полученным растворам прибавляют по 2 мл ацетатного буферного раствора pH 3,5, перемешивают, прибавляют по 1 мл тиоацетамидного реактива, перемешивают и через 2 мин сравнивают окраску растворов.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

Метод 4

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г субстанции в 20 мл воды.

Эталонный раствор. К 1,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 2,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл прибавляют 9,0 мл (при норме 0,001%) или 8,0 мл (при норме 0,002%) воды и 2,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10,0 мл воды прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

К 12,0 мл каждого раствора прибавляют 2,0 мл буферного раствора pH 3,5. Перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают. Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов.

Пригодность системы. Эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в светло-коричневый цвет.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 5

Испытуемый раствор. Растворяют 2,0 г субстанции в 20 мл смеси вода — ацетон 15:85 или вода — диоксан 15:85, или иной, указанной в фармакопейной статье.

Эталонный раствор. К 2,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 4,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл прибавляют 8,0 мл (при норме 0,001%) или 6,0 мл (при норме 0,002%) воды и 2,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10 мл смеси растворителей, использованной для приготовления испытуемого раствора, прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

К 12,0 мл каждого раствора прибавляют 2,0 мл буферного раствора pH 3,5. Перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают. Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов.

Пригодность системы. Эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в светло-коричневый цвет.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 6

Испытуемый раствор. В кварцевый тигель помещают 2,0 г субстанции, прибавляют 4 мл магния сульфата раствора 25% в серной кислоты растворе 1 М, перемешивают тонкой стеклянной палочкой, осторожно выпаривают на водяной бане до сухого остатка и сжигают. Переносят тигель в муфельную печь, нагревают до температуры 800 °C и выдерживают при этой температуре до получения остатка почти белого или белого с сероватым оттенком цвета. Полученный остаток охлаждают до комнатной температуры, смачивают несколькими каплями серной кислоты разведенной 9,8%, выпаривают до сухого остатка, повторно прокаливают и охлаждают до комнатной температуры. Общее время прокаливания не должно превышать 2 ч. Полученный остаток количественно переносят двумя порциями по 5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3% в мерную колбу вместимостью 20 мл, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1%, затем осторожно прибавляют аммиака раствор концентрированный 25% до перехода окраски в розовую. Охлаждают, к полученному раствору прибавляют уксусную кислоту ледяную до обесцвечивания раствора и дополнительно 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. Доводят объем раствора водой до метки. При необходимости фильтруют.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемой субстанции 2,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 4,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Раствор для проверки пригодности системы. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к испытуемой субстанции 2,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 4,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10,0 мл воды прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

К 12,0 мл каждого раствора прибавляют 2,0 мл буферного раствора pH 3,5. Перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают. Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов.

Пригодность системы:

• эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в светло-коричневый цвет;
• окраска раствора для проверки пригодности системы должна быть не менее интенсивна, чем окраска эталонного раствора.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 7

Испытуемый раствор. В кварцевом тигле смешивают 2,0 г субстанции с 0,5 г магния оксида, прокаливают при 700 °C до получения однородной белой или серовато-белой массы. Если после 30 минут прокаливания смесь остается окрашенной, тигель охлаждают, содержимое перемешивают тонкой стеклянной палочкой и повторяют прокаливание. Полученную массу выдерживают при температуре 800 °C в течение 1 ч. Полученный остаток охлаждают, количественно переносят двумя порциями по 5 мл смеси равных объемов хлористоводородной кислоты 25% и воды в мерную колбу вместимостью 20 мл, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1%, затем осторожно прибавляют аммиака раствор концентрированный 25% до перехода окраски в розовую. Охлаждают, к полученному раствору прибавляют уксусную кислоту ледяную до обесцвечивания раствора и дополнительно 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. Доводят объем раствора водой до метки. При необходимости фильтруют.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемой субстанции 2,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 4,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл, который выпаривают при температуре 102,5 +/- 2,5 °C. Далее поступают, как указано для испытуемого раствора, начиная со слов: «прокаливают при 700 °C ...». К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Раствор для проверки пригодности системы. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к субстанции 2,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 4,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 5 мкг/мл и выпаривают при температуре 102,5 +/- 2,5 °C. Далее поступают, как указано для испытуемого раствора, начиная со слов: «прокаливают при 700 °C ...». К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10,0 мл воды прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

К 12,0 мл каждого раствора прибавляют 2,0 мл буферного раствора pH 3,5. Перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают. Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов.

Пригодность системы:

• эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в светло-коричневый цвет;
• окраска раствора для проверки пригодности системы должна быть не менее интенсивна, чем окраска эталонного раствора.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 8

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г (при норме 0,001%) или 50 мг (при норме 0,002%) субстанции в 30 мл воды.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо субстанции 1,0 мл свинца стандартного раствора 1 мкг/мл.

Цилиндр шприца вместимостью 50 мл прикрепляют без поршня к держателю мембранного фильтра (номинальный размер пор — 3 мкм) и помещенного над ним предфильтра (рис. 1).

Помещают испытуемый раствор в шприц, устанавливают поршень и равномерно надавливают на него до тех пор, пока вся жидкость не будет отфильтрована. Открывают держатель, извлекают предфильтр и проверяют, не загрязнен ли мембранный фильтр. В случае загрязнения заменяют его другим мембранным фильтром и повторяют операцию.

К полученному фильтрату прибавляют 2 мл буферного раствора pH 3,5, перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают, выдерживают 10 мин и снова фильтруют, как описано выше, но меняют порядок фильтров так, чтобы жидкость сначала проходила через мембранный фильтр, а затем через предфильтр. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. После завершения фильтрования открывают держатель, удаляют мембранный фильтр и высушивают его с помощью фильтровальной бумаги.

Аналогичным образом обрабатывают эталонный раствор.

Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 9

Испытуемый раствор. В колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл помещают 1,0 г субстанции, закрепляют колбу под углом 45°, тщательно смачивают субстанцию достаточным количеством смеси серная кислота концентрированная — азотная кислота концентрированная 8:10, осторожно нагревают до начала реакции, позволяют реакции угаснуть, порциями добавляют смесь кислот, нагревая после каждого раза, пока объем добавленной смеси кислот не достигнет 18 мл. Увеличивают нагрев и осторожно кипятят до потемнения раствора. Охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Продолжают нагревать, прибавляя азотную кислоту концентрированную, до прекращения потемнения раствора, затем сильно нагревают, пока раствор не загустеет, образуются белые пары. Охлаждают до комнатной температуры, осторожно прибавляют 5 мл воды, осторожно нагревают, пока раствор не загустеет и объем не уменьшится до 2 — 3 мл, образуются белые пары. Охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 5 мл воды и определяют цвет раствора. Если цвет желтый, то осторожно прибавляют 1 мл водорода пероксида, нагревают, пока раствор не загустеет и объем не уменьшится до 2 — 3 мл, образуются белые пары. Если раствор до сих пор желтый, то повторно прибавляют 5 мл воды и 1 мл водорода пероксида. Охлаждают до комнатной температуры, осторожно разбавляют водой и смывают в цилиндр Несслера вместимостью 50 мл, объем раствора не должен превышать 25 мл. Доводят значение pH до 3,5 +/- 0,5 аммиаком водным, используя индикаторную бумагу с узким диапазоном pH, доводят объем раствора водой до 40 мл и перемешивают. Прибавляют 2,0 мл буферного раствора pH 3,5, перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива, сразу перемешивают, доводят объем раствора водой до 50 мл и перемешивают.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо субстанции 1,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 2,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 10 мкг/мл. Вместо смачивания просто прибавляют несколько миллилитров смеси кислот.

Контрольный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, без субстанции.

Раствор для проверки пригодности системы. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к субстанции 1,0 мл (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 2,0 мл (при норме 0,002%) свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне.

Пригодность системы:

• эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в коричневый цвет;
• окраска раствора для проверки пригодности системы должна быть не менее интенсивна, чем окраска эталонного раствора.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 10

Внимание! При использовании сосудов для разложения под высоким давлением необходимо соблюдать меры предосторожности и инструкции по эксплуатации, предоставляемые производителем. Циклы сжигания должны быть разработаны в зависимости от типа используемой микроволновой печи (например, микроволновые печи с контролем мощности, микроволновые печи с контролем температуры или печи высокого давления). Цикл должен соответствовать инструкции производителя. Цикл сжигания приемлем при получении прозрачного раствора.

Испытуемый раствор. В химический стакан помещают 0,5 г (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 0,25 г (при норме 0,002%) испытуемой субстанции. Медленно прибавляют 2,7 мл серной кислоты концентрированной, 3,3 мл азотной кислоты концентрированной и 2,0 мл водорода пероксида, перемешивая компоненты с использованием магнитной мешалки. После прибавления каждого реактива выдерживают пробу до окончания видимой реакции. Переносят смесь в выдерживающий высокое давление сосуд из фторополимера или кварцевого стекла.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо субстанции 1,0 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Раствор для проверки пригодности системы. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к субстанции дополнительно 1,0 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Контрольный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо субстанции 0,5 мл воды очищенной.

Сосуды со стандартным раствором, раствором для проверки пригодности системы и контрольным раствором закрывают и помещают в лабораторную микроволновую печь. Проводят разложение с использованием двух подходящих программ. После первой программы охлаждают до комнатной температуры и осторожно открывают сосуды. К содержимому каждого сосуда прибавляют 2,0 мл водорода пероксида. Снова закрывают и проводят повторное разложение в микроволновой печи с использованием второй программы. Охлаждают до комнатной температуры перед открытием. Для получения прозрачного раствора повторяют прибавление водорода пероксида и выполнение второй программы сжигания.

Охлаждают, осторожно разводят содержимое каждого сосуда водой и количественно переносят в мерные колбы вместимостью 25 мл. Доводят pH растворов до 3,5 +/- 0,5 аммиака раствором концентрированным 32% и аммиака раствором 10% с использованием подходящей индикаторной бумаги, охлаждая на ледяной бане с использованием магнитной мешалки. Доводят объемы растворов водой до 40 мл, прибавляют по 2,0 мл буферного раствора pH 3,5 и 1,2 мл тиоацетамидного реактива, перемешивают, доводят объемы растворов водой до 50 мл и выдерживают в течение 2 мин.

Медленно и с одинаковой скоростью фильтруют растворы через мембранные фильтры с размером пор 0,45 мкм и сравнивают пятна на фильтрах, полученные после фильтрования различных растворов.

Пригодность системы:

• пятно, полученное после фильтрования эталонного раствора, должно быть окрашено в коричневый цвет по сравнению с пятном, полученным после фильтрования контрольного раствора;
• окраска пятна, полученного после фильтрования раствора для проверки пригодности системы, должна быть не менее интенсивна, чем окраска пятна, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 11

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 0,5 г (при норме 0,002%) субстанции в 20 мл указанного в фармакопейной статье растворителя или смеси растворителей.

Эталонный раствор. Доводят 1,0 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл указанным в фармакопейной статье растворителем или смесью растворителей до 20 мл.

Контрольный раствор. 20 мл указанного в фармакопейной статье растворителя или смеси растворителей.

К каждому раствору прибавляют 2 мл буферного раствора pH 3,5 и перемешивают. В случае выпадения осадка необходимо провести повторное растворение в определенном объеме растворителя, как указано в фармакопейной статье. Прибавляют по 1,2 мл тиоацетамидного реагента, немедленно перемешивают и выдерживают в течение 2 мин. Фильтруют растворы через подходящие мембранные фильтры с номинальным размером пор 0,45 мкм и сравнивают пятна на фильтрах.

Пригодность системы. Пятно, полученное после фильтрования эталонного раствора, должно быть окрашено в коричневый цвет по сравнению с пятном, полученным после фильтрования контрольного раствора.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Метод 12

Испытуемый раствор. В кварцевый или платиновый тигель помещают 2,0 г (при норме содержания тяжелых металлов 0,001%) или 1,0 г (при норме 0,002%) субстанции, смачивают 1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают при возможно низкой температуре до обугливания образца. После охлаждения к полученной массе прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной, 5 капель серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до прекращения выделения белых паров. Затем помещают в муфельную печь и сжигают при температуре от 550 +/- 50 °C до полного выгорания углерода, охлаждают, прибавляют 4 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М, закрывают тигель крышкой и выдерживают на водяной бане в течение 15 мин. Открывают и медленно выпаривают на водяной бане досуха. К полученному сухому остатку прибавляют 1 каплю хлористоводородной кислоты концентрированной, 10 мл горячей воды и выдерживают в течение 2 мин. Прибавляют по каплям аммиака раствор 6 М до щелочной реакции по лакмусовой бумаге и разводят водой до 25 мл. Доводят значение pH уксусной кислоты раствором 1 М до 3,5 +/- 0,5, используя подходящую индикаторную бумагу с узким диапазоном. При необходимости раствор фильтруют и промывают тигель и фильтр 10 мл воды. Фильтрат и промывные воды объединяют в цилиндре Несслера вместимостью 50 мл и доводят объем раствора водой до 40 мл.

Эталонный раствор. В цилиндр Несслера вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, разводят водой до 25 мл, доводят значение pH уксусной кислоты раствором 1 М или аммиака раствором 6 М до 3,5 +/- 0,5 и доводят объем раствора водой до 40 мл.

К полученным растворам прибавляют по 2 мл ацетатного буферного раствора pH 3,5, перемешивают, прибавляют по 1,2 мл тиоацетамидного реактива, доводят водой до 50 мл, перемешивают и через две минуты сравнивают окраски полученных растворов сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне.

Допустимое содержание тяжелых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать окраску эталонного раствора.