МУК 4.1.1615-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций аллохола (по сумме желчных кислот) в воздухе рабочей зоны. Методические указания

(утв. Минздравом России 29.06.2003)

29 июня 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АЛЛОХОЛА (ПО СУММЕ ЖЕЛЧНЫХ КИСЛОТ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

с момента утверждения

1. Методические указания подготовлены творческим коллективом специалистов Научно-исследовательского института медицины труда РАМН (Л.Г. Макеева — руководитель, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова) при участии А.И. Кучеренко (Департамент Госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 29.06.03.

5. Введены впервые.

Введение

Методические указания «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (выпуск 42) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник 29 методик контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений», МИ 2335-95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа», МИ 2336-95 «Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах — ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны», ГН 2.2.5.1314-03 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и дополнениях № 1 к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

1. Область применения

Настоящие Методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание суммы желчных кислот в диапазоне концентраций 0,05 — 0,50 мг/куб. м.

2. Характеристика вещества

2.1 Физико-химические свойства.

    В состав  лекарственного  препарата аллохол входят желчь сухая
бычья (38%),  чеснок сушеный (19%),  листья крапивы (2,4%),  уголь

активированный (11,9%) и вспомогательные вещества (28,7%). В желчи

содержатся    различные    желчные    кислоты   -   монокарбоновые
гидроксикислоты,  относящиеся  к  классу  стероидов,  кристаллы  с
температурами   плавления   от   140  до  250 °С.   В  желчи  быка
присутствуют  в  основном  холевая  (Т    199 °С) и дезоксихолевая

                                  пл.

(Т 177 °С) кислоты в виде щелочных солей конъюгатов указанных пл. кислот с таурином или глицином, при этом массовая доля холевых

Желчные кислоты плохо растворимы в воде, растворимы в этиловом спирте.

Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

2.2 Токсикологическая характеристика.

Предельно допустимая концентрация препарата аллохола в воздухе рабочей зоны (по сумме массовых концентраций желчных кислот) — 0,1 мг/куб. м.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций суммы желчных кислот в воздухе с погрешностью, не превышающей +/- 15% при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовых концентраций желчных кислот (по холевой кислоте) выполняется методом спектрофотометрии. Метод основан на взаимодействии кислот с сахарозой с образованием окрашенного в желтый цвет продукта реакции. Измерение проводят при длине волны 575 нм.

Нижний предел измерения содержания желчных кислот в анализируемой пробе 20 мкг.

Нижний предел измерения концентрации желчных кислот в воздухе (при отборе 1000 куб. дм воздуха) 0,05 мг/куб. м.

Определению не мешают крахмал, тальк, магния карбонат, титана диоксид, тропеолин.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

5.1 Средства измерений, вспомогательные устройства,

материалы

Спектрофотометр СФ-46

Пробоотборное устройство ПУ-3Э                 ТУ 4215-11696625-95
Весы аналитические ВЛА-200                     ГОСТ 24104-88Е
Меры массы Г-2-2106 2 кл.                      ГОСТ 7328-82Е
Фильтр АФА-ВП-10                               ТУ 95-743-80

Колбы мерные вместимостью

50, 100 и 500 куб. см                          ГОСТ 1770-74Е
Цилиндр мерный вместимостью 500 куб. см        ГОСТ 1770-74Е
Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см      ГОСТ 29227-91

Бюксы 50/30 ГОСТ 25336-82Е Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 куб. см ГОСТ 25336-82Е Кюветы с толщиной оптического слоя 50 мм Стаканчики для взвешивания ГОСТ 25336-82Е

Баня водяная                                   ТУ 64-1-2850-76
Термометр                                      ГОСТ 215-73

Холодильник бытовой ГОСТ 16317-87

5.2 Реактивы

Холевая кислота, содержание основного

Серная кислота концентрированная, плотность 1,84 г/куб. см ГОСТ 4204-77 Спирт этиловый, х.ч. ГОСТ 5963-67 Сахароза ГОСТ 5833-75 Кислота уксусная ледяная ГОСТ 61-75 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных Методических указаний.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Работа на спектрофотометре должна проводиться в чистом помещении, свободном от пыли, паров кислот и щелочей. Вблизи спектрофотометра не должны располагаться громоздкие изделия, создающие неудобства в работе оператора.

6.5. В процессе работы необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с химической посудой.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84 — 106 кПа и влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9.1 Приготовление растворов

9.1.1. Приготовление стандартного раствора кислоты холевой концентрацией 100 мкг/куб. см. Навеску 10 мг кислоты холевой растворяют в нескольких куб. см спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 куб. см и доводят объем раствора спиртом до метки. Срок годности раствора — 10 суток при хранении в холодильнике.

9.1.2. Приготовление раствора сахарозы концентрацией 10 мг/куб. см. Растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 куб. см 1 г сахарозы и доводят объем раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.3. Приготовление 8 М раствора кислоты серной. В колбе вместимостью 500 куб. см к 200 куб. см дистиллированной воды осторожно, при постоянном перемешивании, прибавляют 213 куб. см кислоты серной концентрированной и доводят водой до метки. Срок годности раствора — 1 месяц при хранении в комнатных условиях.

9.2 Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3 Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины оптической плотности раствора от массы вещества в анализируемой пробе, устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии градуировочных растворов согласно табл. 1, которые готовят путем соответствующего разбавления стандартного раствора кислоты холевой этиловым спиртом с помощью пипеток в пробирках с притертыми пробками. Растворы можно хранить при комнатной температуре в течение 7 ч, в холодильнике — в течение недели.

№ стандарта	Стандартный раствор холевой кислоты, куб. см	Спирт этиловый, куб. см	Концентрация вещества, мкг/куб. см	Содержание вещества в анализируемом объеме раствора, мкг
1	0	10	0	0
2	1,0	9,0	10	20
3	2,0	8,0	20	40
4	3,0	7,0	30	60
5	5,0	5,0	50	100
6	7,5	2,5	75	150
7	10	0	100	200

Для получения градуировочной зависимости по 2 куб. см каждого градуировочного раствора переносят в колбу на 50 куб. см с притертой пробкой, прибавляют 0,8 куб. см раствора сахарозы, пробирку с раствором ставят в стакан со смесью воды со льдом, прибавляют 10 куб. см 8 М раствора кислоты серной и тщательно перемешивают. Пробирку с раствором помещают в водяную баню при 60 °С на 20 мин., после чего сразу же охлаждают в стакане со смесью воды со льдом, прибавляют 10 куб. см кислоты уксусной ледяной и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 575 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют градуировочный раствор № 1.

Проводят по 5 параллельных определений для каждого из 6 растворов и строят градуировочную зависимость величины оптической плотности от количества вещества в анализируемой пробе.

Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца или в случае смены партии реактивов, оборудования или приборов.

9.4 Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 40 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ПДК аллохола следует отобрать 1000 куб. дм воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс с пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 куб. см этилового спирта. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин. и сливают в пробирку. Степень экстракции с фильтра — 95%. Отбирают пипеткой 2 куб. см экстракта и проводят фотометрические реакции аналогично тому, как и при построении градуировочного графика. Количественное определение содержания суммы свободных желчных кислот в растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику, полученному с помощью растворов холевой кислоты по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр.

Концентрацию суммы желчных кислот в воздухе (С, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание желчных кислот в объеме пробы, взятой для анализа, мкг;

в — общий объем экстракта с фильтра, куб. см;

б — объем пробы, взятой для анализа, куб. см;

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, куб. дм (см. Прилож. 1).

Результат количественного анализа представляют в виде (С +/- ДЕЛЬТА) мг/куб. м, Р = 0,95, где ДЕЛЬТА — характеристика погрешности, ДЕЛЬТА = 0,005 + 0,15С.

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

Диапазон определяемых	Наименование метрологической характеристики
концентраций желчных кислот, мг/куб. м	характеристика погрешности ДЕЛЬТА, мг/куб. м (Р = 0,95)	норматив оперативного контроля точности К, мг/куб. м (Р = 0,90, m = 2)	норматив оперативного контроля воспроизводимости D, мг/куб. м (Р = 0,95, m = 2)
От 0,05 до 0,5	0,005 + 0,15С	0,007 + 0,16С	0,015 + 0,02С

13.1 Оперативный контроль воспроизводимости

Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии

с анализом  рабочих  проб.  Проводят  отбор двух  воздушных проб с
использованием  двух  пробоотборников  одновременно. Анализируют в

соответствии с прописью методики, привлекая различных исполнителей

и  максимально   варьируя   условия   проведения  анализа:  партии
реактивов, наборы мерной посуды и т.д.,  и получают два результата
С  и С  анализов.  Решение об удовлетворительной воспроизводимости
 1    2

принимают при выполнении условия:

                         |С  - С | <= D,
                           1    2

где D — норматив оперативного контроля воспроизводимости. При превышении расхождения между двумя результатами анализа норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в месяц.

13.2 Оперативный контроль точности

    Оперативный  контроль  точности  выполняют  в  одной  серии  с
анализом  рабочих  проб.  Проводят  отбор  двух  воздушных  проб с
использованием  двух пробоотборников  одновременно,  затем к одной
пробе делают добавку анализируемого  компонента  дельта С,  нанося
на фильтр  дозу  раствора,  содержащего  анализируемый  компонент.
Величина  добавки  должна  соответствовать 50 - 150% от содержания
компонента  в  пробе.  Результаты  анализа  С  без  добавки и С  с
                                             1                 2
добавкой  получают  по  возможности  в  одинаковых условиях: одним
аналитиком,  с одной партией реактивов,  с одним набором  посуды и

т.д.

    Погрешность  процедуры  отбора проб контролируют путем поверки
используемых  пробоотборников.   Решение   об   удовлетворительной

погрешности принимают при выполнении условия:

                    |С  - С  - дельта С| <= К,
                      2    1

где К - норматив оперативного контроля точности.

Для проведения серии анализов из 6 проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 6 ч.

Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (лаборатория токсикологии и экологии, Е.Б. Гугля).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

                      V  х (273 + 20) х Р
                       t

                    V   = -------------------,
                     20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранного для анализа, куб. дм;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.

ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

Давление Р, кПа/мм рт. ст.
t °C	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/ 750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	0,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9830	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Название вещества	Ссылка на опубликованные методические указания
1	2
1. N-децил-N,N-диметил-	МУ по фотометрическому измерению кон-
1-деканаминий хлорид	центраций диалкилдиметиламмоний хлорида
(дидецилдиметиламмоний	(С — С ) и алкилбензилдиметиламмоний
хлорид; «Арквад»	17 20
2.10.50»)	хлорида (С — С )-ДОН-2, диалкиламино- 10 16 пропионитрила (С — С )-ИФХАН-ГАЗ, ал- 7 9 килтриметиламмоний хлорида (С — С ), 10 16 ДОН-52 в воздухе рабочей зоны. № утв. 4905-88, дата утв. 12.12.88, вып. 25, М., 1989, с. 49
2. Поликарбонофторид	МУ на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок. МУ № 1719-77, дата утв. 18.04.77, вып. 1 — 5, М., 1981, с. 235
3. Препарат МЭК-Сх-3	МУ по фотометрическому измерению массовых концентраций эндо-1,3в-ксиланазы (ксиланаза) в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1642-03, дата утв. 29.06.03, вып. 42
4. Препарат ПФП-1	МУ по спектрофотометрическому измерению концентрации амилазы в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1575-03, дата утв. 29.06.03, вып. 38
5. Препарат Феркон	МУ по фотометрическому измерению массовых концентраций целловиридина в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1753-03, дата утв. 29.06.03, вып. 46
6. Селенит натрия	МУ по атомно-абсорбционному измерению массовых концентраций селена и диоксида селена в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1368-03, дата утв. 16.05.03, вып. 41
7. Триамин G-12Д	МУ по спектрофотометрическому измерению концентраций N',N'-бис-(3-аминопропил)- додециламина(лонзабака) в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1522-03, дата утв. 29.06.03, вып. 37

---