МУК 4.1.1347-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций (2-карбокси-3,4-диметоксифенил)метиленгидразид-4-пиридинкарбоновой кислоты соли диэтиламмония моногидрата (салюзида) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания

(утв. Минздравом России 16.05.2003)

16 мая 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ (2-КАРБОКСИ-3,4- ДИМЕТОКСИФЕНИЛ)МЕТИЛЕНГИДРАЗИД-4-ПИРИДИНКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ СОЛИ ДИЭТИЛАММОНИЯ МОНОГИДРАТА (САЛЮЗИДА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.1347-03

с момента утверждения

1. Подготовлены творческим коллективом специалистов в составе: Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова (НИИ медицины труда РАМН), при участии А.И. Кучеренко (Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по проблеме «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы медицины труда».

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по Государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 16 мая 2003 года.

5. Введены впервые.

Область применения

Методические указания «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (вып. 40) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений», МИ 2335-95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа», МИ 2336-95 «Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны», дополнениях 3 и 5 к ГН 2.2.5.686-98, дополнениях 2 и 3 к ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на содержание (2-карбокси-3,4-диметоксифенил)метиленгидразид-4-пиридинкарбоновой кислоты соли диэтиламмония моногидрата (салюзида) в диапазоне концентраций от 1 до 20 мг/куб. м.

2. Характеристика вещества

2.1 Структурная формула (не приводится).

2.2 Эмпирическая формула C H № О .

                           20 28 4 6

2.3 Молекулярная масса 420,5.

2.4 Регистрационный номер CAS — отсутствует.

2.5 Физико-химические свойства.

Салюзид — кристаллический порошок желто-зеленого цвета. Малорастворим в воде, нерастворим в эфире, растворим в щелочах и неорганических кислотах, температура воспламенения 89,6 °С. Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

2.6 Токсикологическая характеристика.

Салюзид обладает общетоксическим действием.

Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны — 2 мг/куб. м. Класс опасности — третий.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью не более +/- 21% при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовой концентрации салюзида основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания салюзида в хроматографируемом объеме раствора — 0,020 мкг.

Нижний предел измерения концентрации салюзида в воздухе — 1 мг/куб. м (при отборе 100 куб. дм воздуха).

Определению не мешают вещества, сопутствующие производству салюзида (крахмал, целлюлоза микрокристаллическая, титана оксид, поливинилпирролидон низкомолекулярный).

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

5.1 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостный микроколоночный «Милихром» со спектрофотометрическим детектором Хроматографическая колонка стальная КАХ-44-3, 50 х 2 мм, заполненная сорбентом Сепарон С18, фракция 5 мм

Аспирационное устройство                        ТУ 64-1-862-82
Фильтродержатель                                ТУ 95.72.05-77
Весы аналитические                              ГОСТ 24104-88Е

Устройство для фильтрации жидкостей, НПФ «Биохром» Посуда мерная лабораторная Пипетки вместимостью от 0,2 до 10 куб. см ГОСТ 29227-91 Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 куб. см ГОСТ 25336-82Е Фильтры АФА-ВП-10 ТУ 95-743-80 Фильтры HVLP 047, фирмы «Миллипор» Бюксы 50/30 ГОСТ 25336-82Е

5.2 Реактивы

Салюзид, ФС 42-1437-89, содержание основного вещества не менее 99,0% Ацетонитрил для «жидкостной хроматографии» ТУ-6-09-14-2167-84 Калий дигидрофосфат, х.ч. ГОСТ 4198-75 Кислота ортофосфорная, х.ч. ГОСТ 6552-58 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данной МВИ.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.

8. Условия измерений

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84 — 106 кПа и влажности воздуха не более 80%.

8.2. Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерения

9.1 Приготовление растворов.

9.1.1. Стандартный раствор салюзида в растворе элюента концентрацией 200 мкг/куб. см готовится растворением 10 мг вещества в мерной колбе вместимостью 50 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Раствор элюента готовят смешиванием в мерном цилиндре 80 куб. см 0,02 М раствора дигидрофосфата калия, который готовят растворением 1,36 г указанной соли в 500 куб. см дистиллированной воды, и 20 куб. см ацетонитрила. Раствор доводят до рН 5 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор фильтруют с помощью устройства для фильтрации и фильтров «Миллипор» и дегазируют под вакуумом.

9.2 Подготовка прибора.

Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.

9.3 Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в хроматографируемом объеме пробы, устанавливают по методу абсолютной калибровки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят разбавлением стандартного раствора согласно табл. 1.

Таблица 1

№ стандарта	Стандартный раствор салюзида, куб. см	Раствор элюента, куб. см	Концентрация вещества, мкг/куб. см	Содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, мкг
1	0	20	0	0
2	1	19	10	0,02
3	2	18	20	0,04
4	3,5	16,5	35	0,07
5	5	15	50	0,1
6	10	10	100	0,2
7	20	0	200	0,4

Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

    состав элюента: 0,02 М КН РО  - ацетонитрил, 8:2, рН 5;
                             2  4

скорость потока элюента 100 куб. мм/мин.;

объем вводимой пробы 2 куб. мм;

длина волны спектрофотометрического детектора 280 нм;

время удерживания салюзида 2 мин. 30 с.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе шести растворов разных концентраций и холостой пробы, проводя не менее пяти параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную кривую зависимости площади пика от количества компонента в пробе (мкг). Проверку градуировочного графика проводят при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

9.4 Отбор пробы воздуха.

Воздух с объемным расходом 20 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК салюзида достаточно отобрать 100 куб. дм воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс и приливают пипеткой 5 куб. см раствора элюента. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин. и сливают его в пробирку. Аналогичным образом проводят повторную экстракцию с фильтра и объединяют растворы. Степень десорбции с фильтра — 96%. Хроматографирование раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого вещества в растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию анализируемого вещества (С, мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание вещества в анализируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б — объем пробы, взятый для хроматографирования, куб. см;

в — общий объем раствора пробы, куб. см;

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, куб. дм (см. Прилож. 1).

Результат количественного анализа представляют в виде (С +/- ДЕЛЬТА) мг/куб. м, Р = 0,95, где ДЕЛЬТА — характеристика погрешности, ДЕЛЬТА = 0,15С + 0,06.

Значения полученных метрологических характеристик погрешности, норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

Диапазон определяемых	Наименование метрологической характеристики
концентраций салюзида, мг/куб. м	характеристика погрешности, ДЕЛЬТА, мг/куб. м (Р = 0,95)	норматив оперативного контроля точности, К, мг/куб. м (Р = 0,90, m = 2)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, мг/куб. м (Р = 0,95, m = 2)
От 1 до 20	0,15С + 0,06	0,13С + 0,10	0,09С + 0,16

13.1 Оперативный контроль воспроизводимости.

Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии

с анализом рабочих проб.  Отбирают  реальные пробы воздуха рабочей
зоны из одного  традиционного  места отбора двумя пробоотборниками
одновременно.  Анализируют  в  соответствии  с  прописью  методики
разными  аналитиками,   максимально  варьируя  условия  проведения

анализа: партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и получают

два результата С   и  С   анализов.  Результаты  анализа не должны
                1      2
отличаться  друг  от  друга  на  величину  большую,  чем  норматив

оперативного контроля воспроизводимости D:

                          |C  - C | < D.
                            1    2

При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в неделю.

13.2 Оперативный контроль точности.

    Оперативный  контроль  точности  выполняют  в  одной  серии  с
анализом  рабочих  проб.  Отбирают  реальные пробы воздуха рабочей
зоны из одного  традиционного места отбора двумя  пробоотборниками
одновременно.  Затем к одной пробе,  отобранной на фильтр,  делают
добавку анализируемого компонента дельта С из раствора,  нанося ее
на фильтр.  Величина  добавки  должна соответствовать 50 - 150% от
содержания компонента в пробе.  Величина С   не должна выходить за

                                      2

верхнюю границу диапазона измерения. Результаты анализа С без 1 добавки и С с добавкой получают по возможности в одинаковых 2 условиях: одним аналитиком, с одной партией реактивов, с одним набором посуды и т.д.

Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем поверки используемых пробоотборников. Расчет норматива оперативного контроля погрешности К проводят по характеристике погрешности методики за вычетом характеристики погрешности пробоотборника. Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

                    |С  - C  - дельта С| <= К.
                      2    1

Для проведения серии анализов из шести проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 2 ч.

Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (лаборатория токсикологии и экологии, Гугля Е.Б.).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

                      V  х (273 + 20) х Р
                       t

                    V   = -------------------,
                     20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.

ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Наименование вещества	Методические указания
1. Алкил-С N,N-диметил-	МУ по спектрофотометрическому
10-18	измерению концентраций диалкил-
N-бензил-аминийхлорид (Катамин	диметиламмоний хлорида (С -
АБ)	17 С ) и алкилбензилдиметиламмо- 20 ний хлорида (С — С ) — 10 16 ДОН-2, диалкиламинопро-пионит-
	рила (С — С ) — ИФХАН-ГАЗ, 7 9 алкилтриметиламмоний хлорида (С — С ) — ДОН-52 в воздухе 10 16 рабочей зоны. Вып. 25, М., 1988, стр. 49, МУ 4905-88
2. Алкил-С — N,N-диметил- 12-14 N-(этилбензил)аминийхлорид	-«-»
3. 1,1-Дифтор-1,2,2-трихлорэтан (хладон-122)	МУ по газохроматографическому измерению 1,1-дифтор-1,1,2-трихлорэтана в воздухе рабочей зоны. Вып. 36, МУК 4.1.905-99, утв. 30.12.1999
4. Поли(иминоимидокарбонилиминогексаметилен) гидрохлорид (Биопаг)	МУ по фотометрическому измерению концентраций пероксогидрата мочевины в воздухе рабочей зоны. Вып. 35, МУК 4.1.849-99, утв. 30.12.1999
5. Поли(иминоимидокарбонилиминогексаметилен) фосфат (Фосфопаг)	-«-»
6. [IR-[1 альфа(S,3 альфа)]] -	МУ по газохроматографическому
Циано-(3-феноксифенил)-метил-	измерению концентраций гоки-
2,2-диметил-3-(2-метипроп-1- енил)циклопропанкарбонат	лата в воздухе рабочей зоны. Вып. 35, МУК 4.1.871-99, утв.
(Гокилат-S)	30.12.1999

---