ФС.2.5.0127. Фармакопейная статья. Пиона уклоняющегося трава

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Пиона уклоняющегося трава Paeoniae anomalae herba	ФС.2.5.0127
	Взамен ФС 42-99-98

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава дикорастущего многолетнего травянистого растения пиона уклоняющегося (марьина корня) — Paeonia anomala L., сем. пионовых — Paeoniaceae.

Содержит не менее 2,5% суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырье. Смесь стеблей, листьев, цветков, бутонов и незрелых плодов различной степени развития. Цельные или частично измельченные бороздчатые или крупно-ребристые стебли, голые, до 35 см длины, 2 см толщины, внизу с рыхлой сердцевиной, или полые, вверху плотные. Листья рассеченные очередные, голые, сильно сморщенные; пластинка листа длиной 3 — 12 см, в 2 — 3 раза длиннее черешка. Сегменты листьев глубоко тройчато- или перисто-рассеченные, средние сегменты (конечные дольки) трехлопастные, боковые — ланцетные, цельнокрайние. По краю сегмента листовая пластинка завернута на нижнюю сторону. Цветки крупные, 8 — 13 см в диаметре, чашечка состоит из 5 зеленых листочков — двух более узких, 7 — 14 мм шириной, и трех более широких, 12 — 21 мм; лепестки обычно в числе 5 и более. Тычинки многочисленные, при основании спаянные в кольцо. Пестиков 3 — 5 сидящих на диске. Плод состоит из 3 — 5 листовок.

Цвет стеблей коричневато-зеленый; листьев с верхней стороны темно-зеленый, с нижней — светло-зеленый; лепестков — красный или красновато-зеленовато-коричневый. Запах слабый.

Измельченное сырье. Смесь кусочков стеблей, листьев, цветков и бутонов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет стеблей коричневато-зеленый; листьев темно-зеленый и светло-зеленый; лепестков — красный или красновато-зеленовато-коричневый. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата с поверхности листа (на обеих сторонах) должны быть видны клетки эпидермиса с сильно извилистыми боковыми (антиклинальными) стенками. Устьица только на нижней стороне, многочисленные (почти каждая эпидермальная клетка одновременно примыкает к 2 — 3 устьицам) овальные или реже — округлые, аномоцитного типа с 4 — 6 околоустьичными клетками. Клетки верхнего эпидермиса местами имеют четковидноутолщенные оболочки, особенно часто над жилками и по краю сегментов листа. Край сегмента завернут на нижнюю сторону, и 3 — 5 самых крайних рядов клеток эпидермиса вытянуты в сосочки покрытые складчатой кутикулой. Над главной жилкой сегмента листа с верхней стороны имеются многочисленные короткие волоски, расположенные под острым углом к поверхности листа. Основание волоска слегка расширенное, верхушка суженная, но не заостренная и всегда направлена к верхушке доли листа. Волоски в основном одноклеточные и от материнской клетки перегородкой не отделены. Изредка встречаются двухклеточные волоски. Они имеют довольно толстую оболочку, зернистое содержимое и покрыты продольно-складчатой кутикулой. С нижней стороны листа видно, что губчатая ткань довольно рыхлая, состоит из разветвленных клеток, образующих крупные межклетники (аэренхиму). В микропрепаратах с верхней стороны листа, в клетках мезофилла, должны быть видны скопления мелких кристаллов кальция оксалата, местами образующих сростки в виде нечетко сформированных друз. В серной кислоты растворе 50% на месте кристаллов кальция оксалата постепенно образуются тонкие игольчатые кристаллы кальция сульфата (гипс).

Определение основных групп биологически активных веществ

ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода — метанол — хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 10 мл спирта 40% и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования. Серная кислота разведенная 16% (м/м).

На линию старта пластинки наносят 8 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ (предварительно насыщенную, в течение 1 ч), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 80 — 90% длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 80 °C в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме испытуемого раствора в верхней трети должна обнаруживаться основная зона адсорбции от розового до фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (иридоиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельченность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стеблей с остатками корневищ. Цельное сырье: не более 20%.

Органическая примесь. Не более 2%.

Минеральная примесь. Не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 3,0 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 60 мл спирта 40% и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта 40% и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. Колбу и остаток на фильтре промывают 5 мл спирта 40%, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Через стеклянную колонку диаметром 10 мм, содержащую 5 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии, пропускают 10 мл полученного фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного элюата, прибавляют 5 мл гидроксиламина щелочного раствора 5% и оставляют на 20 мин. Затем добавляют 10,0 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора железа(III) хлорида раствором 1% в хлористоводородной кислоте до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл спирта 40%, 5 мл гидроксиламина щелочного раствора 5%, 10,0 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора железа(III) хлорида раствором 1% в хлористоводородной кислоте до метки.

Железа(III) хлорида раствор 1% в хлористоводородной кислоте. Помещают 1,0 г железа(III) хлорида в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 90 мл 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

a — навеска сырья, г;

16 — удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции пеонифлорина с железа гидроксиламином при длине волны 512 нм (A_{1\text{см}}^{1\%}) ;

W — влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---