ФС.2.5.0126. Фармакопейная статья. Пиона уклоняющегося корневища и корни

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Пиона уклоняющегося корневища и корни Paeoniae anomalae rhizomata et radices	ФС.2.5.0126
	Взамен ФС 42-531-98

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения, очищенные от земли, отмытые, разрезанные на куски и высушенные корневища и корни дикорастущего многолетнего травянистого растения пиона уклоняющегося (марьина корня) — Paeonia anomala L., сем. пионовых — Paeoniaceae.

Содержит не менее 3,5% суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырье. Смесь кусков корневищ и корней различной формы, длиной от 1 до 9 см, толщиной от 0,2 до 1,5 см, снаружи продольно морщинистых. На поперечном неровном изломе видны: снаружи тонкий слой перидермы, белый слой коры, резко выступающие желтоватые клиновидные участки древесины и светлые сердцевинные лучи.

Цвет снаружи от желтовато-коричневого до темно-коричневого, на изломе — белый или желтовато-белый, по краю иногда слегка красновато-фиолетовый. Запах сильный, характерный.

Измельченное сырье. Смесь кусочков корней и корневищ различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет светло-коричневый или желтовато-коричневый с более темными полосками пробки. Запах сильный, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье. При рассмотрении микропрепарата поперечного среза корня должна быть видна покровная ткань (пробка), представленная 3 — 7 рядами небольших прямоугольных клеток с утолщениями. Под пробкой находится феллодерма, состоящая из нескольких слоев крупных тангентально-вытянутых клеток со слегка утолщенными тангентальными стенками. Кора состоит из округло-овальных клеток с неравномерно утолщенными оболочками, пронизанными овальными порами. По характеру утолщения оболочек эти клетки близки к колленхиме и представляют собой колленхиматоидные (колленхиматозные) тяжи. В коре встречаются каменистые клетки, располагаются одиночно или группами по 3 — 7 шт., по форме изодиаметричные или слегка удлиненные, округло-многоугольные с сильно утолщенной слоистой клеточной стенкой, пронизанной порами и сильно одревесневшей. Линия камбия четкая. Флоэма и ксилема расположены в виде узких радиальных секторов, разделенных широкими сердцевинными лучами. Над флоэмой часто видны участки колленхиматозного утолщения клеток. Клетки флоэмной паренхимы имеют уголковые утолщения оболочек. Ксилема состоит из лестнично-сетчатых, широкополостных, членистых с заметными остатками перфорационных пластин и щелевидными порами клеточных стенок сосудов, расположенных группами и радиальными рядами, примыкающих к ним узких, веретеновидных с сетчатопористыми или пористыми одревесневшими стенками трахеид и древесной паренхимы, клетки которой лишь немного уступают по размеру самым крупным сосудам. Встречаются некоторые сосуды ксилемы с розовым или розово-красным содержимым. В сердцевинных лучах часто встречаются участки клеток с утолщенными оболочками (в основном утолщены их радиальные стенки), пронизанные овальными порами. Другие механические элементы, кроме колленхиматоидных тяжей, в корне отсутствуют. В клетках паренхимы корня содержатся мелкие крахмальные зерна различной формы (округлые, овальные, удлиненно-овальные), часто с усеченным концом и едва заметной трещинкой, простые, изредка — двух-трех сложные, и кристаллы кальция оксалата в виде друз или сростков неопределенной формы и скоплений мелких кристаллов.

Измельченное сырье. При рассмотрении «давленого» микропрепарата корня должны быть видны лестнично-сетчатые сосуды, узкие пористосетчатые или пористые трахеиды, колленхиматоидные тяжи с клетками с утолщенными оболочками, кристаллы кальция оксалата в виде друз, сростков неопределенной формы и скоплений отдельных мелких кристаллов. В соскобе корня (препарат в воде) должны быть видны крахмальные зерна различной формы.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода — метанол — хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 10 мл спирта 40% и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования. Серная кислота разведенная 16% (м/м).

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 8 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 часа ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 80 — 90% от линии старта, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 80 °C в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме испытуемого раствора в верхней трети должна обнаруживаться основная зона адсорбции от розового до фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (иридоиды).

2. Качественная реакция. К 2 мл элюата (раздел «Количественное определение»), прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты 2% и нагревают в течение 5 мин; должен ощущаться характерный запах. При добавлении к полученному раствору 2 мл железа(III) хлорида раствора 1% в хлористоводородной кислоте должно наблюдаться окрашивание фиолетового цвета (иридоиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельченность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм, — не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Корневищ с остатками стеблей длиной до 3 см. Цельное сырье: не более 10%.

Органическая примесь. Не более 0,5%.

Минеральная примесь. Не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Железа(III) хлорида раствор 1% в хлористоводородной кислоте. Помещают 1,0 г железа(III) хлорида в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 90 мл растворе хлористоводородной кислоты 0,1 М, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 2,0 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 60 мл спирта 40% и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта 40% и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. Колбу и остаток на фильтре промывают 5 мл спирта 40%, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Через стеклянную колонку диаметром 10 мм, содержащую 5 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии, пропускают 10 мл полученного фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного элюата, прибавляют 5,0 мл гидроксиламина щелочного раствора 5% и оставляют на 20 мин. Затем добавляют 10,0 мл раствора кислоты хлористоводородной 1 М, доводят объем раствора железа(III) хлорида раствором 1% в хлористоводородной кислоте до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл спирта 40%, 5,0 мл гидроксиламина щелочного раствора 5%, 10,0 мл раствора кислоты хлористоводородной 1 М, доводят объем раствора железа(III) хлорида раствором 1% в хлористоводородной кислоте до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

a — навеска сырья, г;

16 — удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции пеонифлорина с железа гидроксиламином при длине волны 512 нм (A_{1\text{см}}^{1\%}) ;

W — влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---