ФС.2.1.0566. Фармакопейная статья. Саквинавира мезилат. Саквинавир

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Саквинавира мезилат Саквинавир Saquinaviri mesilas	ФС.2.1.0566
	Вводится впервые

C38H50N6O5·CH4O3S [149845-06-7]	М.м. 766,95

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-N1-[(2S,3R)-4-[(3S,4aS,8aS)-3-(трет-Бутилкарбамоил)окстагидроизохинолин-2(1H)-ил]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил]-2-(хинолин-2-карбоксамидо)бутандиамида метансульфонат.

Содержит не менее 97,5% и не более 102,0% саквинавира мезилата C38H50N6O5·CH4O3S в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Гигроскопичен.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96% и практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика саквинавира на хроматограмме раствора стандартного образца саквинавира мезилата (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -35,0 до -42,0 в пересчете на безводное вещество (0,5% раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода для хроматографии — ацетонитрил 47:53.

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,5 мл натрия гидроксида раствора концентрированного, прибавляют 900 мл воды для хроматографии и доводят pH хлорной кислотой до 1,8. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой для хроматографии до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА — ацетонитрил 38:62.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, обрабатывая ультразвуком, и после охлаждения до комнатной температуры доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца саквинавира для проверки пригодности системы (содержит примеси A, B, C и D) растворяют в 1,0 мл растворителя и обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин.

Примечание

Примесь A: (2S)-1-амино-1-оксо-2-(хинолин-2-илкарбоксамидо)бутановая кислота [136465-98-0].

Примесь B: этил[(2S)-1-Амино-1-оксо-2-(хинолин-2-илкарбоксамидо)бутаноат].

Примесь C: (3S,4aS,8aS)-2-[(2R,3S)-3-амино-2-гидрокси-4-фенилбутил]-N-трет-бутил декагидроизохинолин-3-карбоксамид [136522-17].

Примесь D: (2R)-N1-[(2S,3R)-4-[(3S,4aS,8aS)-3-(трет-бутилкарбамоил)окстагидроизохинолин-2(1H)-ил]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил]-2-(хинолин-2-карбоксамидо)бутандиамид.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм, сферический;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 210 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 1	50	50
1 — 31	50 \rightarrow 0	50 \rightarrow 100

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Саквинавир — 1 (около 17 мин); примесь A — около 0,2; примесь B — около 0,3; примесь C — около 0,5, примесь D — около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу саквинавира для проверки пригодности системы (содержит примеси A, B, C и D).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси D и саквинавира должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A — 0,5; примесь B — 0,5; примесь C — 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площади пиков каждой из примесей A, B и C не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03%).

Вода. Не более 1,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца саквинавира мезилата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата, растворяют в растворителе, обрабатывая ультразвуком, и после охлаждения до комнатной температуры доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца саквинавира мезилата и испытуемый раствор.

Содержание саквинавира мезилата C38H50N6O5·CH4O3S в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 100 \cdot 100 \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика саквинавира на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика саквинавира на хроматограмме раствора стандартного образца саквинавира мезилата;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание саквинавира мезилата в фармакопейном стандартном образце саквинавира мезилата, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренном упаковке, в защищенном от света месте.

---