ФС.2.1.0467. Фармакопейная статья. Метилпреднизолон

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Метилпреднизолон Метилпреднизолон Methylprednisolonum	ФС.2.1.0467
	Вводится впервые

C22H30O5 [83-43-2]	М.м. 374,47

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

11\beta ,17,21-Тригидрокси- 6\alpha -метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% метилпреднизолона C22H30O5 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в ацетоне и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объемах ацетона, выпаривают на водяной бане досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца метилпреднизолона (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты, встряхивают; через 5 мин должно появиться интенсивно красное окрашивание. Просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм; должна наблюдаться коричневато-красная флуоресценция. К полученному раствору добавляют 10 мл воды и встряхивают. Должно наблюдаться исчезновение коричневато-красной флуоресценции и появление желтовато-зеленой флуоресценции.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +97 до +103 в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции в спирте 96%, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Фосфорная кислота — ацетонитрил — вода 0,1:50:50.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота — тетрагидрофуран — ацетонитрил — вода 1:15:100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота — тетрагидрофуран — ацетонитрил 1:15:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, B, C, D, E, F, G, H, I), растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 17,21-дигидрокси- 6\alpha -метилпрегна-1,4-диен-3,11,20-трион [91523-05-6].

Примесь B: 11\beta ,17,21,21-тетрагидрокси- 6\alpha -метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Примесь C: 11\beta -гидрокси- 6\alpha -метиландроста-1,4-диен-3,17-дион [61919-52-6].

Примесь D: 11\beta ,17,20-тригидрокси- 6\alpha -метил-3-оксопрегна-1,4,17(20)-триен-21-аль [1338549-02-2].

Примесь E: 11\beta -гидрокси- 6\alpha -метил-3-оксоандроста-1,4-диен- 17\beta -карбоновая кислота [229019-44-7].

Примесь F: 11\beta ,17,21-тригидрокси- 6\alpha -метилпрегн-4-ен-3,20-дион [1625-39-4].

Примесь G: 17,21-дигидрокси- 6\alpha -метилпрегна-1,4,9(11)-триен-3,20-дион [93269-35-3].

Примесь H: 11\beta ,17,21-тригидрокси- 6\beta -метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион [18462-27-6].

Примесь I: структура не определена.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	45 °C;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 247 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 14	83	17
14 — 30	83 \rightarrow 52	17 \rightarrow 48
30 — 46	52 \rightarrow 83	48 \rightarrow 17
46 — 60	83	17

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метилпреднизолон — 1 (около 12 мин); примесь B — около 0,85; примесь H — около 0,88; примесь A — около 0,92; примесь F — около 1,1; примеси G и I — около 1,54; примесь C — около 1,7; примесь E — около 1,9; примесь D (изомер 1) — около 2,10; примесь D (изомер 2) — около 2,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу метилпреднизолона для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

• разрешение (RS) между пиками примеси A и метилпреднизолона должно быть не менее 1,7;
• отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси F и метилпреднизолона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• сумма площадей пиков двух изомеров примеси D не должна превышать 0,5 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
• площадь пика примеси A не должна превышать 0,3 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);
• сумма площадей пиков примесей G и I не должна превышать 0,3 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);
• площади пиков каждой из примесей B и H не должна превышать 0,2 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
• площади пиков каждой из примесей C, E, F не должна превышать 0,15 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,1 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца метилпреднизолона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца метилпреднизолона и испытуемый раствор.

Содержание метилпреднизолона C22H30O5 в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца метилпреднизолона;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона, мг;

W — потеря в массе при высушивании, %;

P — содержание метилпреднизолона в фармакопейном стандартном образце метилпреднизолона, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте, при температуре от 2 до 8 °C.

---