ФС.2.1.0408. Фармакопейная статья. Дидрогестерон

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Дидрогестерон Дидрогестерон Dydrogesteronum	ФС.2.1.0408
	Вводится впервые

C21H28O2 [152-62-5]	М.м. 312,45

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

9\beta , 10\alpha -Прегна-4,6-диен-3,20-дион.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% дидрогестерона C21H28O2 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дидрогестерона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дидрогестерона на хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 167 до 171 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От -469 до -485 в пересчете на сухое вещество, измеряется при 25 °C (0,5% раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия гидроксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,84 г натрия гидроксида, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствору дают отстояться и используют прозрачную надосадочную жидкость.

Раствор хлористоводородной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 70 мл воды, прибавляют 2,06 г хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — спирт 96% — вода 210:250:540.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дидрогестерона примеси A. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дидрогестерона примеси A, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворе стандартного образца дидрогестерона примеси A и доводят объем тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 30 мл спирта 96%, прибавляют 1,0 мл раствора натрия гидроксида, нагревают при 85 °C в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл раствора хлористоводородной кислоты, 20 мл ацетонитрила и 2,0 мг фармакопейного стандартного образца дидрогестерона примеси B и доводят объем раствора водой до метки (содержит примеси B и C).

Примечание

Примесь A: 9\beta , 10\alpha -прегна-4,6,8(14)-триен-3,20-дион [23035-53-2].

Примесь B: прегна-4,6-диен-3,20-дион [2640-38-2].

Примесь C: 9\beta , 10\alpha , 17\alpha -прегна-4,6-диен-3,20-дион [246038-13-1].

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	40 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический;
Длина волны	основная — 280 нм; примесь A — 385 нм;
Объем пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания пика дидрогестерона.

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца дидрогестерона примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дидрогестерон — 1 (около 13 мин); примесь A — около 0,9; примесь B — около 1,1; примесь C — около 1,2.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси A и дидрогестерона при 385 нм должно быть не менее 1,1.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков:

• разрешение (Rs) между пиками дидрогестерона и примеси B должно быть не менее 4,5;
• разрешение (Rs) между пиками примеси B и примеси C должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона примеси A (не более 0,3%);
• площадь пика примеси B не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
• площадь пика примеси C не должна превышать трехкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);
• площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1).

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дидрогестерона. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дидрогестерона и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца дидрогестерона и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона относительное стандартное отклонение площади пика дидрогестерона должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание дидрогестерона C21H28O2 в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика дидрогестерона на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика дидрогестерона на хроматограмме стандартного раствора;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца дидрогестерона, мг;

P — содержание дидрогестерона в фармакопейном стандартном образце дидрогестерона, %;

W — потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

Не требует особых условий.

---