ФС.2.1.0348. Фармакопейная статья. Фторурацил
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 23.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023. Взамен ФС 42-1085-91.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Фторурацил Фторурацил Fluorouracilum | ФС |
| Взамен ФС 42-1085-91 |
 | |
| C4H3FN2O2 [51-21-8] | М.м. 130,08 |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
5-Фторпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.
Содержит не менее 98,5% и не более 101,0% фторурацила C4H3FN2O2 в пересчете на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фторурацила.
2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М в области длин волн от 220 до 350 нм должен соответствовать спектру аналогичного раствора фармакопейного стандартного образца фторурацила.
ИСПЫТАНИЯ
Удельный показатель поглощения. От 530 до 550 (в максимуме поглощения) при длине волны 266 нм (0,001% раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 или Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH раствора. От 4,5 до 5,0 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
1. Примеси F и G. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.
Подвижная фаза (ПФ). Метанол — вода — этилацетат 15:15:70.
Растворитель. Метанол — вода 50:50.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,10 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца мочевины, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.
Примесь F: 2-этокси-5-фторпиримидин-4(1H)-он(2-этокси-5-фторурацил) [56177-80-1].
Примесь G: мочевина, (карбамид) [57-13-6].
На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора стандартного образца примеси F (0,25 мкг), раствора стандартного образца примеси G (0,2 мкг) и по 5 мкл растворов стандартных образцов примесей F и G в одну точку для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в токе воздуха в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм для обнаружения примеси F.
Для обнаружения примеси G пластинку опрыскивают смесью 200 мл диметиламинобензальдегида раствора 1% в этаноле и 20 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, сушат при температуре 80 °C в течение 3 — 4 мин и просматривают в видимом свете (примесь G проявляется в виде желтого пятна).
Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме нанесенных в одну точку растворов стандартных образцов примесей F и G, после обоих просмотров обнаруживаются две четко разделенные зоны адсорбции.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- примесь F: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F, не превосходит последнюю по величине (не более 0,25%);
- примесь G: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора примеси G, не превосходит последнюю по совокупности величины и интенсивности окраски (не более 0,2%).
2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.
Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М, доведенный до pH 5,7 калия гидроксида раствором 30%.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца фторурацила. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фторурацила и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца примеси C (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца примеси C (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C (А) и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор смеси примесей D и E. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и E) растворяют в 1 мл ПФ.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C (А) и доводят объем раствора ПФ до метки.
Примесь A: пиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион [67-52-7].
Примесь B: дигидропиримидин-2,4,5(3H)-трион [496-76-4].
Примесь C: пиримидин-2,4(1H,3H)-дион, CAS [66-22-8].
Примесь D: 5-метоксипиримидин-2,4(1H,3H)-дион [6623-81-0].
Примесь E: 5-хлорпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [1820-81-1].
Хроматографируют испытуемый раствор, раствор стандартного образца фторурацила, растворы стандартных образцов примесей A, B и C, раствор смеси примесей D и E и раствор для проверки пригодности хроматографической системы.
Относительное время удерживания соединений. Фторурацил — 1 (около 6 мин); примесь A — около 0,5; примесь B — около 0,7; примесь C — около 0,9; примесь D — около 1,6; примесь E — около 1,9.
Идентификация примесей. Для идентификации примесей используют хроматограммы растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б), раствора смеси примесей D и E и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и E).
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
На хроматограммах растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б):
- фактор асимметрии пиков (AS) каждой из примесей A, B и C должен быть не более 2,0;
- относительные стандартные отклонения площадей пиков примесей A, B и C должны быть не более 5,0%, соответственно (6 введений).
На хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила:
- отношение сигнал/шум (S/N) для пика фторурацила должно быть не менее 30;
- фактор асимметрии пика (AS) фторурацила должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение площади пика фторурацила должно быть не более 5,0% (6 введений).
Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D — 1,5; примесь E — 1,3.
Содержание каждой из примесей A, B и C в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 50 \cdot 1 \cdot 1}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 5 \cdot 50 \cdot 100 \cdot 10} ,
где S1 — площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме раствора стандартного образца примеси A, B или C (Б), соответственно;
a0 — навеска стандартного образца примеси A, B или C, соответственно, мг;
P — содержание примеси A, B или C в стандартном образце примеси A, B или C, соответственно, %.
Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 50 \cdot 1 \cdot 1}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 5 \cdot 100 \cdot 100 \cdot 10} ,
где S1 — площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика фторурацила на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила;
a0 — навеска стандартного образца фторурацила, мг;
P — содержание фторурацила в стандартном образце фторурацила, %.
Допустимое содержание примесей:
- содержание любой из примесей A, B, C, D и E — не более 0,1%;
- любая другая примесь — не более 0,10%;
- сумма примесей — более 0,5%.
Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила (менее 0,05%).
Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме над фосфора(V) оксидом при температуре 80 °C в течение 4 ч.
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола», платиновый тигель). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг фторурацила (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг фторурацила в 1 мл воды.
<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции при слабом нагревании в 80 мл диметилформамида. Раствор охлаждают до температуры 15 — 25 °C и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида до появления синего окрашивания (индикатор — 0,25 мл тимолового синего раствора 1%).
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 13,01 мг фторурацила C4H3FN2O2.
ХРАНЕНИЕ
В плотно закрытой упаковке, в защищенном от света месте при температуре не выше 25 °C.