ФС.2.1.0317. Фармакопейная статья. Циклосерин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Циклосерин Циклосерин Cycloserinum	ФС
	Вводится впервые

C3H6N2O2 [68-41-7]	М.м. 102,09

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(4R)-4-Амино-1,2-оксазолидин-3-он.

Содержит не менее 90% и не более 101,5% циклосерина C3H6N2O2 в пересчете на сухое вещество.

<*> Циклосерин является аналогом аминокислоты D-аланина с антибиотической и глицинергической активностью широкого спектра действия, продуцируемой Streptomyces garyphalus и Streptomyces orchidaceus, или получаемой путем синтеза.

---

<*> Приводится для информации.

СВОЙСТВА

Описание. Порошок от белого до светло-желтого цвета.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика циклосерина на хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 3 мл уксусной кислоты раствора 1 М и 1 мл свежеприготовленной (за час до испытания) смеси натрия нитропруссида раствор 4% — натрия гидроксида раствор 4 М 1:1; постепенно должно появиться синее окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

pH раствора. От 5,5 до 6,5 (10% раствор, ОФС «Ионометрия, метод 3).»

Удельное вращение. От +108 до +114 в пересчете на сухое вещество (5% раствор субстанции в натрия гидроксида растворе 2 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Через 15 мин после приготовления измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 285 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 0,1 М.

Показатель поглощения субстанции (a_{\lambda}) вычисляют по формуле:

a_{\lambda} = \frac{A}{c \cdot l} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

c — концентрация испытуемого раствора, г/л;

l — толщина поглощающего слоя, см.

Допустимое значение: показатель поглощения субстанции не должен превышать 0,80.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °C и остаточном давлении не более 0,7 кПа в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,5% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Около 0,5 г натрия декансульфоната растворяют в 800 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и 5 мл уксусной кислоты ледяной. При необходимости доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до 4,4.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в фосфатном буферном растворе pH 6,8 (4) и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца циклосерина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца циклосерина, растворяют в фосфатном буферном растворе pH 6,8 (4) и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 219 нм;
Объем пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор стандартного образца циклосерина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина:

• фактор асимметрии пика (AS) циклосерина должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика циклосерина должно быть не более 2,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику циклосерина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание циклосерина C3H6N2O2 в субстанции в мкг/мг (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика циклосерина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика циклосерина на хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца циклосерина, мг;

P — содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце циклосерина, мкг/мг;

W — потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---