ФС.2.1.0116. Фармакопейная статья. Кофеин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n1["ФС.2.1.0116.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0116-18" "ФС.2.1.0116.18. Фармакопейная статья. Кофеин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.1.0116"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0116" "ФС.2.1.0116. Фармакопейная статья. Кофеин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1,3,7-Триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион.

Содержит не менее 98,5% и не более 101,5% кофеина C8H10N4O2 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белые шелковистые игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок. На воздухе выветривается, при нагревании возгоняется.

Растворимость. Легко растворим в горячей воде и хлороформе, умеренно (медленно) растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кофеина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 0,10 г субстанции, растворяют в 70 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 300 нм должен иметь максимум при 273 нм.

3. Качественная реакция. В фарфоровую чашку помещают 10 мг субстанции, прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 0,1 мл раствора аммиака; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл горячей воды, охлаждают, прибавляют 0,2 мл раствора йода 0,1 М; не должно появиться ни помутнения, ни осадка. При прибавлении нескольких капель хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% должен образоваться коричневый осадок, растворимый в натрия гидроксида растворе 2 М.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 234 до 239 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции в 50 мл горячей воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости», метод 2).

Кислотность или щелочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл горячей воды. После охлаждения к раствору прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05%. Должно появиться желтое или зеленое окрашивание. Для изменения окраски раствора на синий должно потребоваться не более 0,1 мл натрия гидроксида раствора 0,02 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор pH 4,5. Растворяют 0,82 г (точная навеска) натрия ацетата безводного в 900 мл воды и доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 4,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Смесь тетрагидрофуран — ацетонитрил — буферный раствор pH 4,5 20:25:955.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кофеина для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, C, D и F) в 3,0 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до 5 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь A: 1,3-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-55-9].

Примесь C: 1,3,9-триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [519-32-4].

Примесь D: 3,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [83-67-0].

Примесь F: 1,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [611-59-6].

Хроматографические условия

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кофеин — 1 (около 8 мин); примесь C — около 0,42; примесь D — около 0,46; примесь F — около 0,63; примесь A — около 0,69.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу кофеина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

• разрешение (RS) между пиками примесей C и D должно быть не менее 2,0;
• разрешение (RS) между пиками примесей A и F должно быть не менее 2,5;
• фактор асимметрии пика (AS) кофеина должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика кофеина должно быть не более 2,0% (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой примеси должна быть не более 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Посторонние алкалоиды. К 10 мл 2% раствора субстанции прибавляют 0,2 мл реактива Майера; не должно наблюдаться помутнения раствора.

Органические примеси. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл азотной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным.

Сульфаты. Не более 0,05% (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС «Хлориды»). Помещают 1 г субстанции в мерную колбу вместимостью 50 мл, встряхивают в течение 1 мин с 5 мл горячей воды, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции, предварительно высушенной до постоянной массы, в 2 мл хлороформа, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты в метаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,42 мг кофеина безводного C8H10N4O2.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.