ФС.2.1.0116.18. Фармакопейная статья. Кофеин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том III»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n1["ФС.2.1.0116.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0116-18" "ФС.2.1.0116.18. Фармакопейная статья. Кофеин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.1.0116"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0116" "ФС.2.1.0116. Фармакопейная статья. Кофеин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

1,3,7-Триметил-1H-пурин-2,6(3H,7H)-дион
C8H10N4O2	М.м. 194,19

Содержит не менее 98,5% и не более 101,5% кофеина C8H10N4O2 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белые шелковистые игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха. На воздухе выветривается, при нагревании возгоняется.

Растворимость. Легко растворим в горячей воде и хлороформе, умеренно (медленно) растворим в воде, мало растворим в этаноле 96%.

Подлинность

1. ИК-спектрометрия. Перед снятием спектра субстанцию сушат до постоянной массы при 105 °C. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца кофеина безводного.

2. Спектрофотометрия. Спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области длин волн от 250 до 300 нм должен иметь максимум поглощения при 273 нм.

3. Качественная реакция. 10 мг субстанции помещают в фарфоровую чашку, прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 0,1 мл раствора аммиака; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание, переходящее через 10 мин в пурпурно-красное.

4. Качественная реакция. 50 мг субстанции растворяют в 5 мл горячей воды, охлаждают, прибавляют 0,2 мл 0,1 М раствора йода; не должно появиться ни осадка, ни помутнения. При прибавлении нескольких капель хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% должен образоваться бурый осадок, растворимый в 2 М растворе натрия гидроксида.

Температура плавления. От 235 до 238 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1, в запаянном капилляре). Субстанцию предварительно высушивают при 105 °C до постоянной массы.

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл горячей воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкости»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости»).

Кислотность или щелочность. 0,2 г субстанции растворяют в 10 мл горячей воды. К охлажденному раствору прибавляют 0,1 мл 0,05% раствора бромтимолового синего; появившееся желтое или зеленое окрашивание должно переходить в синее от прибавления не более 0,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида. При появлении синего окрашивания оно должно переходить в желтое от прибавления не более 0,1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор pH 4,5. Около 0,82 г (точная навеска) натрия ацетата безводного растворяют в 900 мл воды, доводят pH полученного раствора до 4,5 +/- 0,1 уксусной кислотой ледяной и доводят объем раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза. Смесь тетрагидрофуран — ацетонитрил — буферный раствор pH 4,5 20:25:955.

Испытуемый раствор. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до 50,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 10,0 мл.

Раствор сравнения А. 2,0 мл испытуемого раствора доводят ПФ до 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 20,0 мл.

Раствор сравнения Б. 5 мг стандартного образца кофеина для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, C, D и F) растворяют в 3,0 мл ПФ и доводят объем тем же растворителем до 5 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 10,0 мл.

Примечание.

Примесь A: 1,3-диметил-1H-пурин-2,6(3H,7H)-дион; CAS 58-55-9;

примесь C: 1,3,9-триметил-1H-пурин-2,6(3H,9H)-дион, CAS 519-32-4;

примесь D: 3,7-диметил-1H-пурин-2,6(3H,7H)-дион, CAS 83-67-0;

примесь F: 1,7-диметил-1H-пурин-2,6(3H,7H)-дион, CAS 611-59-6.

Хроматографические условия

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение (R) между пиками примесей C и D, а также между пиками примесей A и F должно быть не менее 2,5.

Идентификация примесей: Хроматограмма раствора сравнения Б.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой единичной примеси должна быть не более 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1%);
• суммарная площадь пиков всех примесей не должна более в 0,5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05%).

Посторонние алкалоиды. К 10 мл 2% раствора субстанции прибавляют 0,2 мл реактива Майера; не должно наблюдаться помутнения раствора.

Органические примеси. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным.

Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл азотной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС «Хлориды»). 1,0 г субстанции встряхивают в течение 1 мин с 5 мл горячей воды, доводят объем водой до 50 мл и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,05% (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы», метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии.

Около 0,15 г (точная навеска) субстанции, предварительно высушенной до постоянной массы, растворяют в 2 мл хлороформа, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты в метаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,42 мг кофеина безводного C8H10N4O2.

Хранение. В плотно закрытой упаковке, в защищенном от света месте, при температуре не выше 25 °C.