РД 52.18.264-2001. Руководящий документ. Методические указания. Определение массовой доли гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты в пробах почвы. Методика выполнения измерений методом газожидкостной хроматографии

(утв. Росгидрометом 24.05.2001)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["РД 52.18.264-2001"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/metodika-rd-52-18-264-2001" "РД 52.18.264-2001. Руководящий документ. Методические указания. Определение массовой доли гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты в пробах почвы. Методика выполнения измерений "
  n1["РД 52.18.264-2011"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/rd-52-18-264-2011" "РД 52.18.264-2011. Руководящий документ. Массовая доля гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты в пробах почвы. Методика измерений методом газожидкостной хроматографии (утв. Рос"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАССОВОЙ ДОЛИ ГЕРБИЦИДА 2,4-ДИХЛОРФЕНОКСИУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ В ПРОБАХ ПОЧВЫ. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1. Разработан Научно-производственным объединением «Тайфун».

2. Разработчики: Э.И. Бабкина, канд. хим. наук; Л.Б. Алексеева; Г.А. Мошкарова; Г.Н. Мальцев; Г.А. Шрайнер; Ж.Н. Трублаевич, канд. биол. наук; А.Ф. Ковалев; В.А. Красковская.

3. Утвержден Федеральной службой России по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды 24.05.2001.

4. Свидетельство об аттестации выдано НПО «Тайфун» № 12-99 от 12.10.1999.

5. Зарегистрировано ЦКБ ГМП за № РД 52.18.264-2001 от 05.06.2001.

6. Взамен РД 52.18.264-90.

1. Область применения

1.1. Настоящие Методические указания устанавливают методику выполнения измерений (МВИ) массовой доли гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (далее — 2,4-Д) в объединенных пробах (далее — проба) почвы методом газожидкостной хроматографии в диапазоне от 0,01 до 10,00 мг/кг.

1.2. Настоящие Методические указания предназначены для использования в лабораториях, осуществляющих наблюдения за загрязнением почв остаточными количествами пестицидов.

2. Нормативные ссылки

2.1 В настоящих Методических указаниях использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.007-76 ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 17.0.0.02-79 Охрана природы. Метрологическое обеспечение контроля загрязнения атмосферы, поверхностных вод и почвы. Основные положения

ГОСТ 17.4.3.01-83 Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб

ГОСТ 17.4.3.03-85 Охрана природы. Почвы. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ.

Примечание — Ссылки на остальные стандарты приведены в разделе 4.

3. Характеристики погрешности измерений

3.1. При значении предельно допустимой концентрации (ПДК) [1], Приложение Б, и диапазоне значений массовой доли, указанных в таблице 1, погрешность измерения соответствует характеристикам, приведенным в таблице 1.

Таблица 1

материалы и реактивы

4.1 При выполнении измерений применяют следующие средства измерений:

• весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 500 г и пределом допустимой погрешности не более +/- 38 мг — ГОСТ 24104-88;
• весы аналитические с наибольшим пределом взвешивания 200 г и пределом допустимой погрешности не более +/- 0,75 мг — ГОСТ 24104-88;
• хроматограф газовый с детектором типа электронного захвата (далее — хроматограф), с колонками газохроматографическими стеклянными длиной от 1 до 1,5 м с внутренним диаметром не более 3 мм (далее — колонки) — ТУ 1.550.150-85;
• микрошприцы типа «Газохром-101» или МШ-10М вместимостью 1; 10 мкл — ТУ 2.833.106-90;
• цилиндры мерные исполнения 3 вместимостью 25; 50; 100 мл - ГОСТ 1770-74;
• колбы мерные исполнения 1 вместимостью 50; 100; 500; 1000 мл 2-го класса точности - ГОСТ 1770-74;
• пипетки исполнения 8 вместимостью 0,2 мл; исполнения 4 вместимостью 1; 2 мл; исполнения 6 вместимостью 5; 10 мл 2-го класса точности - ГОСТ 29227-91;
• пробирки исполнения 2 вместимостью 10; 20 мл с ценой деления 0,1 мл - ГОСТ 1770-74;
• термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном измерения от 0 до 150 °C и ценой деления 1 °C;
• колбы конические вместимостью 100; 250 мл — ГОСТ 25336-82.

Примечание - Допускается применение средств измерений другого типа, обеспечивающих необходимую точность измерений.

4.2 При выполнении измерений применяют следующие вспомогательные устройства:

• аппарат для перегонки органических растворителей (рисунок 1 — здесь и далее рисунки не приводятся) или колба Фаворского — ГОСТ 25336-82;
• колбы Г-образные вместимостью от 40 до 60 мл для концентрирования экстрактов (рисунок 2);
• воронки делительные вместимостью 25; 100; 250 мл — ГОСТ 25336-82;
• воронки лабораторные типа В диаметром 25; 56; 75 мл — ГОСТ 25336-82;
• ротационный испаритель типа ИР-1, ИР-1М — ТУ 25-1173.102-84;
• центрифуга типа ЦЛС-3 — ТУ 5-375-4170-73;
• аппарат для встряхивания проб почвы типа АВУ-1 — ТУ 64-1-2451-72;
• шкаф сушильный с диаметром рабочей камеры 350 +/- 5 мм и длиной 300 +/- 5 мм, максимальной температурой разогрева 200 °C;
• плитка электрическая с закрытой спиралью мощностью 800 Вт;
• стаканы исполнения 1 вместимостью 50; 100; 250; 600; 1000 мл — ГОСТ 25336-82;
• стаканчики для взвешивания (бюксы) — ГОСТ 25336-82;
• баня водяная — ТУ 64-1-2850-76.

Примечание - Допускается применение вспомогательных устройств другого типа, обеспечивающих необходимую точность измерений.

4.3 При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы:

• азот газообразный особой чистоты 1-го сорта — ГОСТ 9293-82;
• ацетон, ч.д.а. — ГОСТ 2603-79;
• эфир этиловый технический — ФС 42-3643-98, перегнанный;
• хлороформ, х.ч. - ГОСТ 20015-88, перегнанный;
• кислота серная (удельный вес 1,84), х.ч. — ГОСТ 4204-77;
• кислота ортофосфорная, х.ч. — ГОСТ 6552-80;
• натрия гидроксид, ч. — ГОСТ 4328-77;
• спирт этиловый ректификованный высшей очистки - ГОСТ 5962-67 или спирт этиловый ректификованный технический высшего сорта — ГОСТ 18300-87, перегнанный;
• н-гексан, ч. — ТУ 6-09-3375-72, перегнанный;
• натрий сернокислый безводный (далее — натрий сернокислый), ч.д.а. - ГОСТ 4166-76;
• кальций хлористый, ч. — ТУ 6-09-3834-80;
• спирт бутиловый, ч.д.а. - ГОСТ 6006-78, перегнанный;
• спирт изобутиловый, ч.д.а. - ГОСТ 6016-77, перегнанный;
• вата - ГОСТ 5556-81, обезжиренная (промытая ацетоном и гексаном);
• бумага фильтровальная лабораторная — ГОСТ 12026-76;
• хроматон N-AW-DMCS или N-AW-HMDS зернения от 0,125 до 0,160 мм или от 0,160 до 0,200 мм с нанесенной жидкой фазой SE-30 в количестве 5%;
• хроматон N-AW-DMCS или N-AW-HMDS зернения от 0,125 до 0,160 мм или от 0,160 до 0,200 мм с нанесенной жидкой фазой ХЕ-60 в количестве 5%;
• стандартный раствор 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты с массовой концентрацией 100 мкг/мл — ГСО 7304-96.

Примечание - Допускается применение реактивов и материалов другого типа, обеспечивающих необходимую точность измерений.

5. Метод измерений

5.1. Метод измерений основан на извлечении (с одновременным гидролизом) 2,4-Д из почвы, ее идентификации в виде этилового или бутилового эфира и количественном определении массовой доли эфира 2,4-Д.

5.1.1. Извлечение 2,4-Д из почвы производится путем ее экстракции диэтиловым эфиром с одновременно протекающим гидролизом ее солей (в присутствии раствора серной кислоты с массовой концентрацией 1 N) до свободной феноксикислоты с последующим перераспределением 2,4-Д в раствор гидроксида натрия с массовой концентрацией 1 N, то есть переводом ее в солевую форму, очисткой этого раствора хлороформом, переводом 2,4-Д в кислую форму и экстрагированием ее диэтиловым эфиром, концентрированием экстракта и этерификацией сухого остатка с помощью этилового или бутилового спирта в присутствии серной кислоты.

5.1.2 Альтернативной изложенному в 5.1.1 является экстракция смесью

0,5%-го   водного   раствора   ортофосфорной  кислоты  H PO   и  ацетона  с
                                                        3  4
последующим   перераспределением   2,4-Д   в  хлороформ,  концентрированием
хлороформного  экстракта и этерификацией сухого остатка с помощью этилового

или бутилового спирта в присутствии серной кислоты.

5.1.3. Идентификацию эфиров 2,4-Д проводят по времени удерживания, устанавливаемому с помощью градуировочного раствора.

5.1.4. Количественное определение массовой доли 2,4-Д в виде ее эфиров проводят методом газожидкостной хроматографии путем сравнения высот пиков аналитических сигналов анализируемого и градуировочного растворов.

5.2. Минимально детектируемое количество эфиров 2,4-Д в аликвоте составляет от 0,1 до 0,2 нг.

6. Требования безопасности и охраны окружающей среды

6.1. При выполнении измерений соблюдают требования безопасности труда в соответствии с ГОСТ 12.1.007 и [2].

6.2. При выполнении анализов необходимо соблюдать осторожность при работе с 2,4-Д и ее эфирами, органическими растворителями и другими химическими веществами.

6.3. Оператор должен пройти инструктаж о мерах предосторожности при работе с электрическими приборами.

6.4. Помещение, в котором проводят анализы, должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.

6.5. Сливы (отработанные растворы) органических растворителей, кислот и оснований категорически запрещается выливать в канализацию.

6.6. Сливы помещают в отдельные стеклянные бутыли или пластмассовые канистры, которые хранятся в соответствии с требованиями к хранению легковоспламеняющихся жидкостей и кислот, изложенными в [2].

6.7. После заполнения емкости со сливами транспортируют на городскую свалку в специально отведенное место или их содержимое сливают в специальные емкости, находящиеся на территории организации.

7. Требования к квалификации операторов

7.1. К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица (инженеры, техники или лаборанты со средним специальным образованием), прошедшие соответствующую подготовку и имеющие навыки работы в химической лаборатории и ознакомленные с инструкцией по эксплуатации хроматографа, на котором производят выполнение измерений.

8. Условия выполнения измерений

8.1 Измерения следует выполнять при нормальных условиях:

         Температура окружающего воздуха, °C                20 +/- 10
         Относительная влажность окружающего воздуха, %     от 30 до 80
         Атмосферное давление, кПа (мм рт. ст.)             от 80 до 104

                                                        (от 630 до 795)

Напряжение питающей сети переменного тока 220 +/- 4,4. (50 Гц), В

8.2. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования ГОСТ 17.4.3.03.

8.3. Необходимым условием при выполнении измерений является устранение влияния следующих мешающих факторов, приводящих к искажению аналитического сигнала:

• сопутствующих веществ, присутствующих в реактивах, фильтровальной бумаге, на стенках стеклянной посуды;
• присутствия в экстракте пробы почвы коэкстрактивных (одновременно экстрагирующихся) веществ.

8.4 Устранение мешающих факторов проводят по 10.11.

9. Подготовка к выполнению измерений

9.1 Отбор и хранение проб почвы

9.1.1. Отбор проб почвы для определения массовой доли 2,4-Д проводят по ГОСТ 17.4.3.01 и [3, 4].

9.1.2. Отбор проб для приготовления контрольных образцов (КО), на основе которых готовят градуировочные растворы, проводят на фоновых (незагрязненных) почвах (ФП) исследуемых областей.

9.1.3. Пробы хранят при нормальных условиях (по 8.1) только в воздушно-сухом состоянии в упаковке из картона, ткани, крафт-бумаги или кальки в лабораторном помещении.

Примечание - Недопустимо использование емкостей из пластмассовых материалов для хранения проб.

9.1.4 Контроль условий хранения почвы проводят по [5].

9.2 Подготовка проб к анализу

9.2.1. Из воздушно-сухой пробы, отобранной по 9.1.1, отбирают методом квартования пробу массой от 200 до 300 г. Из нее тщательно удаляют корни и другие инородные частицы, почву растирают в фарфоровой ступке и просеивают через сито с диаметром отверстий 0,5 мм.

9.2.2. Из пробы, приготовленной по 9.2.1, готовят навеску пробы: на лабораторных весах взвешивают в химическом стакане одну навеску массой 20 г.

9.3 Приготовление рабочих растворов

9.3.1 Рабочий раствор серной кислоты с массовой концентрацией 1 № готовят следующим образом:

• в коническую колбу из термостойкого стекла вместимостью 250 мл, содержащую от 100 до 200 мл дистиллированной воды, вносят 14 мл серной кислоты с относительной плотностью 1,84;
• раствор охлаждают до комнатной температуры и переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл;
• объем раствора доводят до метки на колбе дистиллированной водой.

9.3.2 Рабочий раствор ортофосфорной кислоты с массовой концентрацией 0,5% (объемных) готовят следующим образом:

• в коническую колбу вместимостью 250 мл, содержащую 200 мл дистиллированной воды, вносят 1,0 мл ортофосфорной кислоты;
• полученный раствор тщательно перемешивают и закрывают пробкой.

9.3.3 Приготовление рабочего раствора гидроксида натрия с массовой концентрацией 1 № производят следующим образом:

• на аналитических весах взвешивают в стакане 40 г гидроксида натрия и переносят его в стакан вместимостью 500 мл, содержащий 300 мл дистиллированной воды;
• после растворения гидроксида натрия и охлаждения раствора до комнатной температуры его переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора до метки на колбе дистиллированной водой.

9.3.4 Рабочий раствор 2,4-Д с массовой концентрацией 10 мкг/мл готовят следующим образом:

• в мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 10 мл стандартного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 100 мкг/мл;
• объем раствора доводят до метки на колбе ацетоном;
• полученному раствору приписывают массовую концентрацию 10 мкг/мл.

9.3.5 Рабочий раствор 2,4-Д с массовой концентрацией 1 мкг/мл готовят следующим образом:

• в мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 10 мл рабочего раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 10 мкг/мл;
• объем раствора доводят до метки на колбе ацетоном;
• полученному раствору приписывают массовую концентрацию 1 мкг/мл.

9.4 Приготовление почвенных экстрактов из навесок проб

9.4.1 Приготовление почвенного экстракта путем экстракции этиловым эфиром производят следующим образом:

• навеску пробы, приготовленную по 9.2.2, через воронку помещают в коническую колбу (далее — колба) вместимостью 250 мл. К навеске пробы добавляют 30 мл раствора серной кислоты с массовой концентрацией 1 № и 1 мл ацетона. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Колбу закрывают пробкой и оставляют на 1 ч. В течение этого времени колбу 2 или 3 раза энергично встряхивают вручную;
• через 1 ч в колбу вносят 60 мл этилового эфира и колбу с экстракционной смесью встряхивают в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания с частотой 50 Гц. Затем переносят содержимое колбы в центрифужную пробирку и производят центрифугирование в течение 3 мин. со скоростью 2000 об./мин. <*>;
• жидкую часть сливают в делительную воронку вместимостью 250 мл, остаток из центрифужной пробирки переносят в исходную колбу с помощью 10 мл раствора серной кислоты с массовой концентрацией 1 № и 1 мл ацетона, энергично встряхивают вручную в течение 1 или 2 мин., добавляют 20 мл эфира, закрывают колбу пробкой и производят встряхивание в течение 15 мин. на аппарате для встряхивания с частотой 50 Гц. Затем содержимое колбы переносят в центрифужную пробирку, производят центрифугирование в течение 3 мин. со скоростью 2000 об./мин. Жидкую часть сливают в делительную воронку к первой порции центрифугата, остаток удаляют;
• содержимое делительной воронки осторожно встряхивают от 1 до 2 мин., дают отстояться от 15 до 20 мин., затем нижний водный слой сливают и отбрасывают.

<*> При отсутствии центрифуги центрифугирование можно заменить фильтрованием через бумажный фильтр. Во время фильтрования воронку с фильтром следует прикрыть фольгой для уменьшения испарения эфира.

9.4.2 Приготовление почвенного экстракта путем экстракции ацетоном производят следующим образом:

а) навеску пробы массой 10 г, приготовленную по 9.2.2, помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл и приливают 10 мл раствора ортофосфорной кислоты 0,5%-й массовой концентрации и 50 мл ацетона. Колбу закрывают и производят встряхивание в течение 1 ч на аппарате для встряхивания с частотой 50 Гц;

б) содержимое колбы отстаивают от 1 до 5 мин. и жидкую часть сливают в другую колбу, фильтруя через бумажный фильтр, помещенный в воронку;

в) к остатку навески пробы добавляют 15 мл ацетона и 4 мл раствора ортофосфорной кислоты 0,5%-й массовой концентрации, тщательно перемешивают, отстаивают и жидкую часть сливают к первой порции, фильтруя через тот же фильтр;

г) остаток навески пробы в колбе промывают дважды смесью ацетона и раствора ортофосфорной кислоты 0,5%-й массовой концентрации по 19 мл каждая порция (15 мл ацетона и 4 мл раствора ортофосфорной кислоты), фильтруя каждый раз жидкую часть через тот же бумажный фильтр;

д) объединенные экстракты (смесь ацетона с раствором ортофосфорной кислоты), полученные по 9.4.2, перечисления «а» - «г», переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл, добавляют 200 мл дистиллированной воды и 75 мл хлороформа, встряхивают от 2 до 3 мин. и оставляют для разделения слоев на время от 10 до 15 мин. После разделения слоев нижний хлороформный слой сливают в колбу вместимостью 250 мл, куда предварительно внесено от 15 до 20 г натрия сернокислого;

е) к водно-ацетоновой смеси, оставшейся в делительной воронке, добавляют 25 мл хлороформа, встряхивают и хлороформ сливают к первой порции, полученной по 9.4.2, перечисление «д». Колбы закрывают, и экстракт оставляют над натрием сернокислым на время от 2 до 3 ч.

9.4.3 Очистку почвенного экстракта, полученного путем экстракции этиловым эфиром, производят следующим образом:

• отбирают 25 мл раствора гидроксида натрия с массовой концентрацией 1 № и добавляют к эфирному почвенному экстракту в делительной воронке. Содержимое делительной воронки энергично встряхивают от 1 до 2 мин. Эфирный слой отделяют и отбрасывают;
• отбирают 20 мл хлороформа и добавляют его к водно-щелочному слою в делительной воронке. Содержимое делительной воронки энергично встряхивают от 1 до 2 мин., после разделения слоев нижний хлороформный слой удаляют;
• к очищенному почвенному экстракту добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, встряхивают и выдерживают от 10 до 15 мин., затем добавляют 30 мл эфира, энергично встряхивают от 1 до 2 мин. и оставляют для разделения слоев;
• водный слой сливают в стакан или колбу, нижний неразделившийся слой эмульсии оставляют в делительной воронке;
• в лабораторную (коническую) воронку помещают подложку из обезжиренной ваты, на нее насыпают от 10 до 15 г натрия сернокислого безводного. Воронку вставляют в колбу вместимостью 250 мл. Эфирный слой из делительной воронки фильтруют через натрий сернокислый, сливая его через верх воронки;
• водный слой из стакана или колбы возвращают в делительную воронку, добавляют 20 мл эфира, встряхивают от 1 до 2 мин. и оставляют для разделения слоев. Затем водный слой сливают и отбрасывают, эфирный слой фильтруют через ту же порцию натрия сернокислого, эфирные почвенные экстракты объединяют.

9.4.4 Концентрирование почвенного экстракта производят следующим образом:

• очищенный почвенный экстракт переносят в отгонную колбу ротационного испарителя вместимостью 250 мл. Отгонную колбу присоединяют к ротационному испарителю и ставят на водяную баню. Температура воды в водяной бане при концентрировании эфирных почвенных экстрактов составляет от 20 до 25 °C, при концентрировании хлороформных почвенных экстрактов — от 40 до 45 °C;
• при отсутствии ротационного испарителя концентрирование почвенного экстракта проводят с помощью Г-образных колб. Экстракт переносят в Г-образные колбы так, чтобы было заполнено не более 2/3 объема колбы. Затем Г-образные колбы помещают на водяную баню и экстракт концентрируют до объема от 5 до 7 мл.

Примечание - Температура воды в водяной бане при концентрировании из Г-образных колб эфирных экстрактов составляет от 35 до 40 °C, при концентрировании хлороформных экстрактов — от 70 до 75 °C.

9.4.5 Этерификацию 2,4-Д, содержащейся в почвенном экстракте, производят следующим образом:

• концентрированный почвенный экстракт, полученный по 9.4.4, с помощью пипетки переносят в пробирку, отгонную колбу смывают 1 или 2 мл эфира или хлороформа, смыв присоединяют к почвенному экстракту в пробирке;
• проводят испарение почвенного экстракта при комнатной температуре до объема от 0,5 до 1,0 мл, затем с помощью пипетки с надетой на нее грушей эфир или хлороформ в пробирке отдувают досуха;
• к сухому остатку добавляют 1 мл этилового или 4 мл бутилового спирта, затем 0,5 мл концентрированной серной кислоты. Пробирку с реакционной смесью закрывают пробкой и помещают на водяную баню так, чтобы в воде находилась 1/2 часть пробирки;
• пробирку выдерживают при температуре воды в водяной бане от 95 до 100 °C в течение 30 мин., затем вынимают и охлаждают при комнатной температуре;
• реакционную смесь из пробирки переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл, в пробирку приливают 5 мл гексана, встряхивают и переносят этот гексан в делительную воронку с реакционной смесью, добавляют к реакционной смеси еще 5 мл гексана и 20 мл дистиллированной воды, встряхивают делительную воронку от 2 до 3 мин. и оставляют для разделения слоев на время от 3 до 5 мин.;
• после разделения слоев водный слой сливают в стакан, а гексановый слой сливают в пробирку вместимостью от 15 до 20 мл, фильтруя его через натрий сернокислый массой от 3 до 5 г, который предварительно помещен в коническую воронку на подложку из обезжиренной ваты;
• водный слой из стакана переносят в делительную воронку, добавляют 5 мл гексана, встряхивают от 2 до 3 мин. и после разделения слоев водный слой отбрасывают; гексановый слой присоединяют к первой порции, фильтруя его через тот же натрий сернокислый;
• гексановый экстракт, содержащий эфиры 2,4-Д, испаряют при комнатной температуре до объема от 5 до 7 мл и проводят измерение методом газожидкостной хроматографии.

9.4.6. Если при хроматографировании обнаружены пики аналитического сигнала, вызванные коэкстрактивными веществами, проводят очистку гексанового экстракта серной кислотой. Для этого гексановый экстракт эфиров 2,4-Д помещают в делительную воронку вместимостью 25 мл, добавляют от 1 до 2 мл концентрированной серной кислоты, содержимое делительной воронки энергично встряхивают и оставляют для разделения слоев на время от 10 до 15 мин. После разделения слоев, нижний кислотный слой сливают и отбрасывают, а очищенный гексановый экстракт сливают в пробирку. В этом случае соответствующий градуировочный раствор, с помощью которого проводят расчеты, также должен быть подвергнут очистке серной кислотой.

9.4.7 Градуировочные растворы эфиров 2,4-Д готовят следующим образом:

а) градуировочные растворы эфиров 2,4-Д готовят путем этерификации 2,4-Д, содержащейся в почвенных экстрактах, извлеченных из КО, в которые предварительно внесены рабочие водные растворы, содержащие массовые концентрации 2,4-Д, с учетом различной массовой доли 2,4-Д в анализируемых пробах;

б) отбор ФП для приготовления КО проводят по 9.1.2. Почва, используемая для приготовления КО, должна быть аналогична по составу анализируемой почве. Внесение в КО рабочих водных растворов 2,4-Д проводят по [5];

в) массовая доля 2,4-Д в различных КО после внесения рабочих водных растворов 2,4-Д должна составлять, мг/кг:

• 0,1 (1 ПДК);
• 1,0 (10 ПДК);
• 10,0 (100 ПДК).

Для каждой массовой доли 2,4-Д готовят по 3 КО;

г) в три навески КО вносят по 1 мл рабочего водного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 100 мкг/мл, добавляют по 1 мл дистиллированной воды, высушивают согласно [5] и проводят экстракцию и этерификацию согласно 9.4.1 - 9.4.5. Гексановые экстракты эфиров 2,4-Д объединяют. Объединенный гексановый экстракт эфиров 2,4-Д из трех КО почв с общим содержанием 2,4-Д 300 мкг переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл. Объем раствора доводят до метки на колбе гексаном. Полученному градуировочному раствору приписывают массовую концентрацию 2,4-Д 3 мкг/мл. Отбирают 1 мл этого раствора, переносят в пробирку вместимостью 10 мл и добавляют 2 мл гексана. Полученному раствору приписывают массовую концентрацию 2,4-Д 1 мкг/мл. Этот раствор и раствор с массовой концентрацией 3 мкг/мл используют при анализе проб с массовой долей 2,4-Д от 2,5 до 10,0 мг/кг, т.е. от 25 до 100 ПДК;

д) в три навески КО вносят по 1 мл рабочего водного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 10 мкг/мл. Остальные операции выполняют в соответствии с 9.4.7, перечисление «г». Объединенный гексановый экстракт эфиров 2,4-Д из трех КО почв с общим содержанием 2,4-Д 30 мкг переносят в градуированную пробирку вместимостью 20 мл. Объем раствора доводят до метки 20 мл гексаном. Полученному градуировочному раствору приписывает массовую концентрацию 2,4-Д 1,5 мкг/мл и используют его при анализе проб с массовой долей 2,4-Д от 0,5 до 2,45 мг/кг, т.е. от 5,0 до 24,5 ПДК;

е) в три навески КО вносят по 1 мл рабочего водного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 1 мкг/мл. Остальные операции выполняют в соответствии с 9.4.7, перечисление «г». Объединенный гексановый экстракт эфиров 2,4-Д из трех КО почв с общим содержанием 2,4-Д 3 мкг переносят в градуированную пробирку вместимостью 20 мл и испаряют при комнатной температуре до объема 6 мл. Полученному градуировочному раствору приписывают массовую концентрацию 2,4-Д 0,5 мкг/мл и используют его при анализе проб с массовой долей 2,4-Д от 0,05 до 0,50 мг/кг, т.е. от 0,5 до 5 ПДК.

9.5 Условия хранения реактивов, рабочих растворов 2,4-Д, градуировочных растворов и почвенных экстрактов

9.5.1. Реактивы хранят в склянках с наклеенными этикетками в лабораторном помещении при нормальных условиях (по 8.1).

9.5.2. Рабочие растворы 2,4-Д хранят в холодильнике при температуре от 10 до 12 °C.

9.5.3. Рабочие растворы 2,4-Д с массовой концентрацией от 100 до 10 мкг/мл хранят не более полугода.

9.5.4. Рабочие растворы 2,4-Д с массовой концентрацией от 0,2 до 1,0 мкг/мл хранят не более 1 мес.

9.5.5. Градуировочные растворы любой массовой концентрации хранят не более 7 сут.

9.5.6. Почвенные экстракты хранят в холодильнике при температуре от 10 до 12 °C.

10. Выполнение измерений

10.1. Подготовку к работе хроматографа и кондиционирование колонок проводят в соответствии с техническим описанием и инструкцией по эксплуатации, прилагаемыми к газовому хроматографу.

10.2 Устанавливают параметры выполнения измерений:

Скорость протяжки ленты, мм/ч 600

Температура, °C:

              испарителя                                      от 200 до 225
              колонки                                         от 180 до 190
              детектора                                       от 230 до 250
          Расход газа-носителя (азота), куб. см/мин.          60.

При указанных параметрах время удерживания на колонке с фазой SE-30 составит для этилового эфира 2,4-Д от 1,6 до 2,2 мин., для бутилового эфира 2,4-Д от 3,8 до 4,2 мин.

10.3 Перед новой партией проб или при замене растворителя проводят по [6]:

• бланковое (холостое) определение (проверку чистоты реактивов), включающее все операции анализа и реактивы, используемые в ходе анализа;
• установление линейного диапазона детектирования (ЛДД) как для бутилового, так и для этилового эфиров 2,4-Д. При отсутствии линейности строят график зависимости аналитического сигнала от количества эфира 2,4-Д, введенного в хроматограф, в соответствии с [6].

10.4. В хроматограф вводят 2 мкл растворителя для проверки чистоты колонки.

10.5 В хроматограф вводят аликвоту градуировочного раствора.

10.6. В хроматограф вводят аликвоту почвенного экстракта, объем которой должен быть равен объему аликвоты градуировочного раствора и составлять не менее 4 мкл при использовании микрошприца вместимостью 10 мкл и не менее 1 мкл при использовании микрошприца вместимостью 1 мкл.

10.7. Возникающий после введения испытуемого раствора аналитический сигнал регистрируется потенциометром, автоматически обрабатывается и записывается в виде графического изображения — пика (далее — хроматограмма) на ленте регистратором, входящим в комплект хроматографа.

10.8. В качестве расчетного параметра при обработке хроматограммы используется высота пика, которая должна быть не менее 10 мм. При меньшей высоте пика (от 7 до 9 мм) массовая доля 2,4-Д оценивается как следовая. Для получения достоверного результата измерения каждый испытуемый раствор подвергается хроматографическому анализу не менее трех раз. При расчетах используют значение аналитического сигнала, являющееся средним арифметическим из трех измерений.

10.9. Для подтверждения правильности идентификации эфиров 2,4-Д хроматографические измерения должны проводиться с использованием альтернативной колонки с фазой ХЕ-60, либо этерификация извлеченной 2,4-Д должна проводиться двумя спиртами — этиловым и бутиловым. Для этого гексановый экстракт из анализируемой пробы почвы делят на две части. Одну часть этерифицируют этиловым спиртом, другую — бутиловым. Можно проводить экстракцию двух навесок из одной пробы почвы. Тогда этерификацию экстрактов проводят в одном случае этиловым спиртом, в другом — бутиловым.

10.10. Пример хроматограммы смеси этилового и бутилового эфиров, полученной с применением колонки с фазой SE-30, приведен на рисунке 3.

10.11. Выявление и устранение мешающего влияния химических веществ, присутствующих в реактивах, на фильтровальной бумаге, на стенках стеклянной посуды проводят по [6].

11. Обработка и оформление результатов измерений

11.1. Формой получения результатов измерений является хроматограмма, которая записывается и хранится на бумажном носителе.

11.1.1. Результаты измерений после обработки хроматограммы и проведения расчетов по 11.2 — 11.4 записывают в рабочий журнал по форме, представленной в Приложении А.

11.2 Расчет массовой доли 2,4-Д в пробе X (мг/кг) при наличии ЛДД проводят по формуле:

                                   _

                                   C   h  V
                                    гр  x
                               X = --------,                            (1)

                                 _
                                 h   P
                                  гр

где:
C   - массовая концентрация 2,4-Д в градуировочном растворе, мкг/мл;
 гр

    _        _
    h    и   h    -  высоты  пиков  аналитических  сигналов  соответственно
     x        гр
почвенного   экстракта   и   градуировочного   раствора,  средние  из  трех

параллельных измерений, мм; V — объем почвенного экстракта, мл; P — масса навески воздушно-сухой пробы, г.

11.3 Конечный результат А (мг/кг) представляют в соответствии с [7] в

виде:

A = X +/- ДЕЛЬТА, (2)

где:

X — массовая доля 2,4-Д, рассчитанная по формуле (1), мг/кг;

ДЕЛЬТА — характеристика погрешности измерений, мг/кг.

Значения характеристик погрешности измерений приведены в таблице 1.

12.1. Внутренний статистический контроль точности результатов измерений массовой доли 2,4-Д проводят 2 раза в год по ГОСТ 17.4.3.03 и [4, 5].

12.2. Внутренний оперативный контроль (далее — оперативный контроль) показателей качества результатов измерений (воспроизводимости, точности) проводят в соответствии с [8] по установленным нормативам оперативного контроля, рассчитанным на основе характеристик погрешности МВИ и ее составляющих. Значения нормативов оперативного контроля приведены в таблице 2.

Таблица 2

12.3. Периодичность оперативного контроля воспроизводимости — не менее одной контрольной пробы на каждые 8 — 10 проб за период, в течение которого условия проведения анализа соответствуют условиям проведения контрольных определений. Периодичность оперативного контроля точности (погрешности МВИ) — два раза в год.

12.4. Для проведения оперативного контроля воспроизводимости анализируемые пробы делят на партии от 8 до 15 проб. Для одной из проб отбирают две параллельные навески: основную и контрольную пробы. Контрольная проба маркируется индексом «К».

12.4.1. Выполняют анализ основной и контрольной пробы с интервалом от 3 до 5 сут.

12.4.2 Воспроизводимость D результатов измерений проб признают

                              к

удовлетворительной, если выполняется условие:

                           D  = |X  - X | <= D,                         (3)
                            к     1    2

где:

    X   и  X   -  результаты  измерения  массовой  доли  2,4-Д в основной и
     1      2

контрольной пробах соответственно, мг/кг; D — норматив оперативного контроля воспроизводимости, значение которого

                                  X  + X
                                   1    2

определяется по таблице 2 для X = -------, мг/кг. 2

12.5 Оперативный контроль точности проводят с использованием метода

добавок.

12.5.1 Для проведения оперативного контроля точности для одной из проб

делают две навески: основную и контрольную пробы.

12.5.2 В контрольную пробу вносят добавку массой А . Добавкой является

                                                   д

рабочий раствор 2,4-Д, приготовленный по 9.3.4.

12.5.3 Массу 2,4-Д в добавке А (в мкг) рассчитывают по формуле:

                               д

                                А  = С  V ,                             (4)
                                 д    р  р

где:
С  - массовая концентрация 2,4-Д в рабочем растворе, мкг/мл;
 р
V  - объем внесенного рабочего раствора, мл.
 р

12.5.4. Массовая доля 2,4-Д в контрольной пробе после внесения добавки должна составлять не более 100% от возможной массовой доли 2,4-Д в пробе без добавки, т.е. в основной пробе.

12.5.5. При отсутствии 2,4-Д в основной пробе ее массовая доля в контрольной пробе после внесения добавки должна составлять удвоенную минимально определяемую массовую долю 2,4-Д.

12.5.6 Внесение добавки проводят по [5].

12.5.7 Определение массовой доли 2,4-Д в основной пробе X и в пробе с

добавкой (контрольной пробе) X проводят одновременно и в одинаковых д условиях.

12.5.8. Результат оперативного контроля погрешности К признают к удовлетворительным, если выполняется условие:

                       К  = |X  - X - А  / P| <= К ,                    (5)
                        к     д        д          д

где:
А  - масса добавки, внесенной в контрольную пробу, мкг;
 д
P - масса навески пробы; г;
К   - норматив оперативного контроля погрешности, приведенный в таблице
 д

2.

12.6. Если какое-либо из условий, указанных в 12.4.2, 12.5.8, не выполняется, эксперимент повторяют с использованием другой пробы. При повторном невыполнении условия выясняют причины неудовлетворительного результата и устраняют их.

13.1. Нормы затрат рабочего времени при проведении экстракции эфиром одновременно четырех проб представлены в таблице 3.

Таблица 3

13.2. Нормы затрат рабочего времени при проведении экстракции ацетоном одновременно шести проб представлены в таблице 4.

Таблица 4

13.3. Затраты рабочего времени на приготовление градуировочных растворов рассчитываются на основании данных, представленных в таблицах 3 и 4.

Результаты определения массовой доли 2,4-Д в пробах

Дата __________________________________________________________________

Оператор ______________________________________________________________

Место отбора проб _____________________________________________________

Температура колонки, °C _______________________________________________

Температура испарителя, °C ____________________________________________

Температура детектора, °C _____________________________________________

Фаза __________________________________________________________________

1. ГН 1.1.546-96. Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень). М.: Госкомсанэпиднадзор России, 1997.

2. Правила по технике безопасности при производстве наблюдений и работ на сети Госкомгидромета. Л.: Гидрометеоиздат, 1983.

3. РД 52.18.156-99. Методические указания. Охрана природы. Почвы. Методы отбора объединенных проб почвы и оценки загрязнения сельскохозяйственного угодья остаточными количествами пестицидов.

4. РД 52.18.70-86. Методические указания. Единые отраслевые нормы времени на работы по отбору проб почвы, их анализу и обработке материалов наблюдений.

5. РД 52.18.103-86. Методические указания. Охрана природы. Почвы. Оценка качества аналитических измерений содержания пестицидов и токсичных металлов в почве.

6. МИ 2334-95. ГСИ. Смеси аттестованные. Порядок разработки, аттестации и применения.

7. Временные методические рекомендации по контролю загрязнения почв. Под ред. С.Г. Малахова. М.: Гидрометеоиздат, 1983.

8. МИ 1317-86. Методические указания. Государственная система обеспечения единства измерений. Результаты и характеристики погрешности измерений. Формы представления. Способы использования при испытании образцов продукции и контроля их параметров.

9. МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.