ГОСТ 8558.1-2015. Межгосударственный стандарт. Продукты мясные. Методы определения нитрита

(введен в действие Приказом Росстандарта от 25.03.2016 № 205-ст)

(ред. от 03.09.2019)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ГОСТ 8558-68"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-19301-3-94" "ГОСТ 8558-68. Государственный стандарт Союза ССР. Мясные продукты. Методы определения содержания нитрита и нитрата (утв. Госстандартом СССР 12.05.1968)"
  n1["ГОСТ 8558.1-78"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gost-8558-1-78" "ГОСТ 8558.1-78. Государственный стандарт Союза ССР. Продукты мясные. Методы определения нитрита (введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 16.11.1978 N 3003)"
  n2["ГОСТ 8558.1-2015"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/gost-8558-1-2015" "ГОСТ 8558.1-2015. Межгосударственный стандарт. Продукты мясные. Методы определения нитрита (введен в действие Приказом Росстандарта от 25.03.2016 N 205-ст)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 марта 2016 г. № 205-ст

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ МЯСНЫЕ

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИТРИТА

Meat products. Methods for determination of nitrite

ГОСТ 8558.1-2015

МКС 67.120.10

Дата введения 1 января 2017 года

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт мясной промышленности имени В.М. Горбатова» (ФГБНУ «ВНИИМП им. В.М. Горбатова»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 10 декабря 2015 г. № 48)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 марта 2016 г. № 205-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 8558.1-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВЗАМЕН ГОСТ 8558.1-78

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

1. Область применения

Настоящий стандарт распространяется на мясо, мясную продукцию, мясо птицы, а также используемые при их производстве нитритсодержащие компоненты (рассолы, посолочные смеси и др.) и устанавливает методы определения массовой доли нитрита натрия.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

2. Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-2017 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

<*> Сноска исключена с 1 января 2020 года. - Изменение № 1, введенное в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст.

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 3760-79 Реактивы. Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ 4025-95 Мясорубки бытовые. Технические условия

ГОСТ 4174-77 Реактивы. Цинк сернокислый 7-водный. Технические условия

ГОСТ 4197-74 Реактивы. Натрий азотисто-кислый. Технические условия

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

ГОСТ 4199-76 Реактивы. Натрий тетраборнокислый 10-водный. Технические условия

ГОСТ 4207-75 Реактивы. Калий железистосинеродистый 3-водный. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 5556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-2-2003 <*> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ГОСТ ИСО 5725-6-2003 <**> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».

<**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».

ГОСТ 5821-78 Реактивы. Кислота сульфаниловая. Технические условия

ГОСТ 5823-78 Реактивы. Цинк уксуснокислый 2-водный. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 7269-2015 Мясо. Методы отбора образцов и органолептические методы определения свежести

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

ГОСТ 31467-2012 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы отбора проб и подготовка их к испытаниям

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

ГОСТ 8756.0-70 Продукты пищевые консервированные. Отбор проб и подготовка их к испытанию

ГОСТ 9792-73 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 20469-95 Электромясорубки бытовые. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26272-98 Часы электронно-механические кварцевые наручные и карманные. Общие технические условия

ГОСТ 26678-85 Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия

ГОСТ 29224-91 (ИСО 386-77) Посуда лабораторная стеклянная. Термометры жидкостные стеклянные лабораторные. Принципы устройства, конструирования и применения

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3. Термины и определения

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1 массовая доля нитрита натрия: Массовая доля нитрита натрия, определенная в соответствии с методами, изложенными в настоящем стандарте, и выраженная в процентах.

4. Требования безопасности и условия выполнения измерений

4.1 При подготовке и проведении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

4.2 Помещение, в котором проводятся измерения, должно быть оснащено приточно-вытяжной вентиляцией. Работу необходимо проводить, соблюдая правила личной гигиены и противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

4.3 При работе с электроприборами необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ 12.1.019.

4.4 При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

- <a id="p100084"></a>температура окружающего воздуха, °C ...........(20 +/- 5);
- <a id="p100085"></a>относительная влажность воздуха, % ............ не более 80;
- <a id="p100086"></a>атмосферное давление, кПа ..................... 84 - 106,7.

5. Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы

Гомогенизатор или мясорубка механическая по ГОСТ 4025 или электрическая по ГОСТ 20469, с решеткой, диаметр отверстий которой не более 4,5 мм.

Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры на уровне 100 °C.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны (540 +/- 2) нм, или фотоэлектроколориметр со светофильтром, имеющим максимум поглощения при длине волны (540 +/- 2) нм, укомплектованный стеклянными кюветами с длиной рабочей грани 10 мм и 20 мм.

Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1 специального (1) класса точности с пределом допускаемой абсолютной погрешности не более +/- 0,001 г.

Емкость воздухонепроницаемая с крышкой.

Холодильник по ГОСТ 26678.

Колбы мерные с одной отметкой 1-100-1; 1-200-1; 1-250-1; 1-500-1; 1-1000-1 по ГОСТ 1770.

Пипетки с делениями прямые 1-1-1-2; 1-1-1-5; 1-1-1-10; 1-1-1-25 по ГОСТ 29227.

Воронки В-56-80 ХС или В-75-110 ХС по ГОСТ 25336.

Цилиндры 1-50-1, 1-100-1 по ГОСТ 1770.

Термометр жидкостный по ГОСТ 29224, диапазон измерения температуры от 0 °C до 100 °C, цена деления шкалы 1 °C.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

Часы электронно-механические по ГОСТ 26272.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч.

Колбы конические Кн-1-100-36 или Кн-2-100-36 по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-100 или Н-1-100, В-1-250 или Н-1-250 по ГОСТ 25336.

Натрий тетраборнокислый 10-водный по ГОСТ 4199, х.ч.

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, х.ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.

Аммиак водный по ГОСТ 3760, х.ч.

Кислота сульфаниловая по ГОСТ 5821, ч.д.а.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч.

Цинк уксуснокислый по ГОСТ 5823, х.ч.

Цинк сернокислый по ГОСТ 4174, х.ч.

Вата медицинская по ГОСТ 5556.

Калий железистосинеродистый по ГОСТ 4207, х.ч.

Стрептоцид (сульфаниламид), с массовой долей основного вещества не менее 99,0%.

N-(1-нафтил)-этилендиамин-дигидрохлорид, с массовой долей основного вещества не менее 99,0%.

Пыль цинковая.

\alpha - \text{нафтиламин} , с массовой долей основного вещества не менее 99,0%.

Примечание - Всю стеклянную посуду необходимо тщательно вымыть моющим средством, затем ополоснуть дистиллированной водой.

6. Отбор и подготовка проб

6.1 Отбор проб

6.1.1 Отбор проб — по ГОСТ 7269, ГОСТ 9792, ГОСТ 31467, ГОСТ 8756.0.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

Проба должна быть представительной, а также без повреждений и изменений при транспортировании и хранении.

6.1.2 Пробы рассола для испытаний отбирают в количестве 500 см3.

6.1.3 Пробы посолочной смеси отбирают от 1% упаковочных единиц (но не менее чем от 3 единиц) общей массы не менее 500 г.

6.1.4 Пробу хранят таким образом, чтобы предотвратить порчу и изменение химического состава.

6.2 Подготовка проб

Пробу мяса, мясных и мясосодержащих продуктов (колбасных изделий, продуктов из мяса, полуфабрикатов, кулинарных изделий, консервов), мяса птицы измельчают на гомогенизаторе или дважды пропускают через мясорубку, и тщательно перемешивают. При этом температура пробы должна быть не более 25 °C. Подготовленную пробу, а также пробы рассола помещают в воздухонепроницаемую емкость, закрывают крышкой и хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C не более 5 сут, пробы посолочной смеси помещают в воздухонепроницаемую емкость, закрывают крышкой и хранят при температуре (20 +/- 2) °C в соответствии с инструкцией фирмы изготовителя.

Испытания проводят в течение 24 ч после измельчения.

7. Метод, основанный на реакции с реактивом N-(1-нафтил)-этилендиамин-дигидрохлоридом (основной метод)

7.1 Сущность метода

Метод основан на получении из анализируемой пробы безбелкового фильтрата, реакции нитрита с N-(1-нафтил)-этилендиамин-дигидрохлоридом и с сульфаниламидом и образованием соединения красного цвета и фотометрическом измерении оптической плотности при длине волны (540 +/- 2) нм.

7.2 Приготовление реактивов

7.2.1 Приготовление соляной кислоты, разбавленной 1:1 (по объему)

Смешивают один объем соляной кислоты (\rho_{20} = 1,19\text{г}/\text{см}^{3}) с одним объемом дистиллированной воды. Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.2 Приготовление насыщенного раствора буры

210 г тетраборнокислого натрия растворяют в 1000 см3 дистиллированной воды температурой 60 °C и охлаждают. Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.3 Приготовление реактивов для осаждения белков

7.2.3.1 Приготовление реактива Каррез 1

106 г железистосинеродистого калия растворяют в 500 — 600 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.3.2 Приготовление реактива Каррез 2

220 г уксуснокислого цинка и 30 см3 уксусной кислоты растворяют в 700 — 800 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.4 Приготовление реактивов для проведения цветной реакции

7.2.4.1 Приготовление реактива 1

2 г стрептоцида (сульфаниламида) растворяют в 400 см3 соляной кислоты (разбавленная 1:1), количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки соляной кислотой и перемешивают.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.4.2 Приготовление реактива 2

0,25 г N-(1-нафтил)-этилендиамин-дигидрохлорида растворяют в 100 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

7.2.5 Приготовление основного раствора азотистокислого натрия массовой концентрации c (NaNO2) = 2 мг/см3

1 г азотистокислого натрия растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Примечание - Так как содержание основного вещества в реактиве азотистокислого натрия в зависимости от классификации различно, вычисляют массу реактива для получения основного раствора с содержанием в 1 см3 2 мг азотистокислого натрия.

Пример расчета — При использовании азотистокислого натрия марки х.ч. массовая доля основного вещества составляет не менее 99,0%.

Массу реактива X, г, вычисляют по формуле

X = \frac{100 \cdot 1}{99} = 1,0101. (1)

7.2.6 Приготовление рабочего раствора азотистокислого натрия, массовой концентрации c (NaNO2) = 0,05 мг/см3

25 см3 основного раствора азотистокислого натрия вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.2.7 Приготовление стандартных растворов азотистокислого натрия массовых концентраций c (NaNO2) = 1,0; 2,5 и 5,0 мкг/см3

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

В мерные колбы вместимостью 100 см3 вносят пипеткой 2, 5 и 10 см3 рабочего раствора азотистокислого натрия, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Полученные стандартные растворы содержат соответственно 1,0; 2,5 и 5,0 мкг/см3 нитрита натрия.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

7.2.8 Приготовление контрольного раствора

В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят цилиндром 50 — 60 см3 дистиллированной воды, 10 см3 реактива 1, помещают в темное место на 5 мин затем добавляют 2 см3 реактива 2, помещают в темное место на 3 мин, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

7.3 Построение градуировочного графика

7.3.1 В мерные колбы вместимостью 100 см3 вносят по 10 см3 каждого стандартного раствора нитрита натрия.

К этим растворам добавляют по 10 см3 реактива 1, перемешивают и выдерживают в темном месте 5 мин. Затем добавляют по 2 см3 реактива 2, выдерживают в темном месте 3 мин и доводят объем до метки дистиллированной водой для получения концентраций 0,1; 0,25; 0,5 мкг/см3 нитрита натрия соответственно.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

7.3.2 Через 15 мин измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (540 +/- 2) нм в стеклянной кювете относительно контрольного раствора, используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, в кювете 10 мм.

7.3.3 По полученным средним данным измерений из трех стандартных растворов строят градуировочный график, откладывая измеренные значения оптической плотности по оси абсцисс против соответствующих концентраций разбавленных стандартных растворов нитрита натрия по оси ординат и проводя прямую линию через отложенные точки и начало координат.

7.4 Проведение анализа

7.4.1 В мерную колбу вместимостью 200 см3 помещают 10 г подготовленной пробы с записью результата взвешивания до третьего десятичного знака, добавляют 5 см3 насыщенного раствора буры и цилиндром 100 см3 дистиллированной воды. Колбу с содержимым выдерживают на кипящей водяной бане 15 мин, периодически перемешивая. Содержимое колбы охлаждают до (20 +/- 2) °C, последовательно добавляют 2 см3 реактива Карреза 1 и 2 см3 реактива Карреза 2, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр, установленный в воронку.

7.4.2 В мерную колбу вместимостью 500 см3 вносят 25 см3 рассола, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.4.3 В мерную колбу вместимостью 500 см3 взвешивают 2,5 г посолочной смеси с записью результата взвешивания до третьего десятичного знака, добавляют цилиндром 250 — 300 см3 дистиллированной воды, растворяют анализируемую пробу, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.

7.4.4 В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят не более 20 см3 фильтрата (раствора рассола и раствора посолочной смеси), добавляют 30 — 50 см3 дистиллированной воды и 10 см3 реактива 1, перемешивают и выдерживают в темном месте 5 мин. Затем добавляют 2 см3 реактива 2, перемешивают и выдерживают в темном месте 3 мин. Содержимое колб доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.4.5 Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (540 +/- 2) нм в стеклянной кювете относительно контрольного раствора, используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, в кювете с длиной рабочей грани 10 мм.

7.4.6 По градуировочному графику, находят концентрацию азотистокислого натрия в растворе пробы.

Примечание - Если полученная оптическая плотность превышает максимальную оптическую плотность на градуировочном графике, то цветную реакцию проводят с меньшим количеством фильтрата.

7.5 Обработка результатов

7.5.1 Массовую долю нитрита натрия X1, %, в продуктах и посолочных смесях вычисляют по формуле

X_{1} = \frac{C \cdot V_{1} \cdot 100 \cdot 100}{m \cdot V \cdot 10^{6}} , (2)

где C — концентрация нитрита натрия, найденная по градуировочному графику, мкг/см3;

100 — объем разбавленного фильтрата используемый для цветной реакции, см3;

100 — коэффициент пересчета в проценты;

m — масса анализируемой пробы, г;

V — объем фильтрата, взятый для проведения цветной реакции, см3;

106 — коэффициент перевода мкг в г;

V1 — объем, до которого доведена навеска анализируемой пробы [200 см3 для продукта и 500 см3 для посолочной смеси (см. 7.4.2)].

7.5.2 Массовую долю нитрита натрия в рассоле X2, %, вычисляют по формуле

X_{2} = \frac{C \cdot 500 \cdot 100 \cdot 100}{25 \cdot V \cdot \rho \cdot 10^{6}} , (3)

где C — концентрация нитрита натрия, найденная по градуировочному графику, мкг/см3;

500 — общий объем разбавленного рассола, см3;

100 — объем разбавленного фильтрата используемый для цветной реакции, см3;

100 — коэффициент пересчета в проценты;

25 — количество рассола, отобранное для исследования, см3;

V — объем фильтрата отобранный для проведения цветной реакции, см3;

\rho — плотность рассола, г/см3;

106 — коэффициент перевода мкг в г.

Вычисление проводят до пятого десятичного знака.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, округленное до четвертого десятичного знака, если удовлетворяются условия приемлемости.

8. Метод, основанный на реакции Грисса

8.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии солей азотистой кислоты с \alpha - \text{нафтиламином} и сульфаниловой кислотой в присутствии уксусной кислоты с образованием соединения красного цвета и фотометрическом измерении оптической плотности при длине волны (540 +/- 2) нм.

Метод Грисса применим только для мяса, мясных и мясосодержащих продуктов (колбасных изделий, продуктов из мяса, полуфабрикатов, кулинарных изделий, консервов), мяса птицы.

8.2 Приготовление реактивов

8.2.1 Приготовление раствора уксусной кислоты молярной концентрации c (CH3COOH) = 2,0 моль/дм3

В мерную колбу, вместимостью 1000 см3 вносят цилиндром 600 — 700 см3 дистиллированной воды, 115 см3 уксусной кислоты, охлаждают и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.2 Приготовление раствора аммиака молярной концентрации c (NH3) = 3,0 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят цилиндром 223 см3 аммиака (\rho_{20} = 0,906\text{г}/\text{см}^{3}) , доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают. Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

8.2.3 Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации c (NaOH) = 0,1 моль/дм3

4 г гидроокиси натрия растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, охлаждают и доводят дистиллированной водой до метки.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.4 Приготовление раствора сернокислого цинка массовой концентрации c (ZnSO4 x 7H2O) = 4,5 г/дм3

4,5 г сернокислого цинка растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и доводят дистиллированной водой до метки.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.5 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации c (HCl) = 0,1 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят цилиндром 600 — 700 см3 дистиллированной воды и 8,5 см3 соляной кислоты (\rho_{20} = 1,1880\text{г}/\text{см}^{3}) , охлаждают и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.6 Приготовление реактивов для проведения цветной реакции

8.2.6.1 Реактив 1

0,5 г сульфаниловой кислоты растворяют в 150 см3 раствора уксусной кислоты. Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.6.2 Реактив 2

0,2 г \alpha - \text{нафтиламина} и 20 см3 дистиллированной воды кипятят в течение 10 мин, раствор фильтруют и прибавляют к фильтрату 180 см3 раствора уксусной кислоты.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.6.3 Реактив Грисса

Смешивают реактив 1 и реактив 2 в равных объемах. В случае появления при смешивании растворов розового окрашивания, добавляют цинковую пыль, перемешивают и фильтруют. Реактив Грисса готовят непосредственно перед применением.

8.2.7 Приготовление основного раствора азотистокислого натрия массовой концентрации c (NaNO2) = 1 мг/см3

1 г азотистокислого натрия растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Примечание — Массу реактива для получения основного раствора азотистокислого натрия вычисляют по формуле (1), приведенной в 7.2.5 (пример расчета).

(п. 8.2.7 в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

8.2.8 Приготовление рабочего раствора азотистокислого натрия массовой концентрации c (NaNO2) = 0,02 мг/см3

(в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2019 № 607-ст)

10 см3 основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.2.9 Приготовление образцового раствора азотистокислого натрия массовой концентрации c (NaNO2) = 0,001 мг/см3

5 см3 рабочего раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. 1 см3 стандартного раствора содержит 0,001 мг (или 1 мкг) азотистокислого натрия.

Приготовленный раствор хранят не более 1 мес.

8.3 Построение градуировочного графика

8.3.1 В мерные колбы вместимостью 100 см3 вносят 0; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 см3 стандартного раствора.

8.3.2 Добавляют последовательно 5 см3 раствора аммиака, 10 см3 раствора соляной кислоты, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Полученные растворы содержат 0; 0,2; 0,4; 0,8; 1,2; 1,6 мкг/см3 нитрита натрия.

8.3.3 В конические колбы вместимостью 100 см3 вносят по 15 см3 приготовленных рабочих растворов и 15 см3 реактива Грисса. Полученные растворы содержат 0; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 мкг/см3 нитрита натрия.

8.3.4 Через 15 мин измеряют оптическую плотность растворов при длине волны (540 +/- 2) нм в стеклянной кювете относительно контрольного раствора, используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, в кювете с длиной рабочей грани 20 мм.

8.3.5 По полученным средним данным измерений трех рабочих растворов нитрита строят градуировочный график, откладывая измеренные значения оптической плотности по оси абсцисс против соответствующих концентраций растворов нитрита натрия по оси ординат и проводя прямую линию через отложенные точки и начало координат.

8.4 Проведение испытаний

8.4.1 В стакан взвешивают 20 г пробы с записью результата взвешивания до второго десятичного знака, добавляют цилиндром 35 — 40 см3 дистиллированной воды, температурой (55 +/- 2) °C и настаивают в течение 10 мин. Раствор фильтруют через ватный фильтр, вставленный в воронку, в мерную колбу вместимостью 200 см3, фильтр промывают дистиллированной водой, охлаждают полученный раствор и доводят дистиллированной водой до метки.

8.4.2 При анализе сырокопченых продуктов взвешивают 20 г пробы с записью результата взвешивания до второго десятичного знака, добавляют цилиндром 200 см3 дистиллированной воды, температурой (55 +/- 2) °C и настаивают в течение 30 мин.

Раствор фильтруют через ватный фильтр, вставленный в воронку, в мерную колбу вместимостью 200 см3, не перенося осадок на фильтр, полученный раствор и доводят дистиллированной водой до метки.

8.4.3 20 см3 фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют 10 см3 раствора гидроокиси натрия и 40 см3 раствора сернокислого цинка. Полученную смесь нагревают на кипящей водяной бане в течение 7 мин, охлаждают, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. Параллельно проводят контрольный опыт, помещая в мерную колбу вместимостью 100 см3 вместо 20 см3 фильтрата 20 см3 дистиллированной воды.

8.4.4 В коническую колбу вместимостью 100 см3 вносят 5 см3 прозрачного фильтрата, 1 см3 раствора аммиака, 2 см3 раствора соляной кислоты, 2 см3 дистиллированной воды, 5 см3 образцового раствора азотистокислого натрия (см. 8.2.9) и 15 см3 реактива Грисса.

8.4.5 Через 15 мин измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (540 +/- 2) нм в стеклянной кювете относительно контрольного раствора, используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, в кювете 20 мм.

8.4.6 По градуировочному графику находят концентрацию нитрита натрия в растворе пробы.

8.5 Обработка результатов

Массовую долю нитрита натрия X3, %, вычисляют по формуле

X_{3} = \frac{C \cdot 200 \cdot 100 \cdot 100 \cdot 30}{m \cdot 20 \cdot 5 \cdot 10^{6}} , (4)

где C — концентрация нитрита натрия, найденная по градуировочному графику, мкг/см3;

200 — объем, до которого доведена навеска, см3;

100 — объем, до которого доведено количество фильтрата, см3;

100 — коэффициент пересчета в проценты;

30 — общий объем, используемый для цветной реакции, см3;

m — масса анализируемой пробы, г;

20 — объем фильтрата, используемый для осаждения белков, см3;

5 — объем фильтрата отобранный для проведения цветной реакции, см3;

106 — коэффициент перевода мкг в г.

Вычисление проводят до пятого десятичного знака.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, округленное до четвертого десятичного знака, если удовлетворяются условия приемлемости.

9. Метрологические характеристики

Точность методов установлена межлабораторными испытаниями, выполненными в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-6.

Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности P = 0,95, приведены в таблице 1.

Расхождение между результатами двух параллельных определений, выполненных одним оператором при анализе одной и той же пробы с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) r, значения которого приведены в таблице 1.

|_x1 - x2| <= r, (5)

где x1 и x2 — результаты двух параллельных измерений, %;

r — предел повторяемости, %.

Расхождение между результатами двух определений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости R, значения которого приведены в таблице 1.

|X₁ - X₂| <= R, (6)

где X₁ и X₂ - результаты двух определений, выполненных в разных лабораториях, %;

R — предел воспроизводимости, %.

Границы относительной погрешности, результата измерений ( \pm \delta) при P = 0,95, при соблюдении условий настоящего стандарта, не должны превышать значений, приведенных в таблице 1.

10. Контроль точности результатов измерений

10.1 Процедуру контроля стабильности показателей качества результатов анализа (повторяемости, промежуточной прецизионности и погрешности) проводят в соответствии с порядком, установленным в лаборатории, в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-6 (пункт 6.2).

10.2 Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости), осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-2. Расхождение между результатами измерений не должно превышать предела повторяемости (r). Значения r приведены в таблице 1.

10.3 Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-2. Расхождение между результатами измерений, полученными двумя лабораториями, не должно превышать предела воспроизводимости (R). Значения R приведены в таблице 1.