ФС.2.5.0129. Фармакопейная статья. Сабельника болотного корневища с корнями

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Сабельника болотного корневища с корнями	ФС.2.5.0129
Comari palustris rhizomata cum radicibus	Вводится впервые

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью (до отмирания надземной части), очищенные от земли, зеленых стеблей и листьев, разрезанные на куски и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего полукустарничка сабельника болотного — Comarum palustre L., сем. розоцветные — Rosaceae.

Содержит не менее 10,0% суммы полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырье. Куски корневищ или смесь кусков корневищ с корнями, укоренившихся стеблей с корнями и корней. Корневища и укоренившиеся стебли длиной до 30 см, диаметром от 0,3 до 0,7 см с четко выраженными узлами, горизонтальные, прямые или слегка изогнутые, иногда разветвленные, с довольно длинными междоузлиями. Поверхность корневищ продольно-морщинистая, матовая; укоренившихся стеблей — блестящая, с участками, лишенными первичной коры. На узлах видны светло-коричневые или серовато-коричневые остатки стеблеобъемлющих черешков листьев длиной до 5 см или от узлов во все стороны отходят тонкие нитевидные корни длиной до 10 см. Корни многочисленные, переплетенные, иногда единичные, упругие. В центре корневищ и стеблей имеется полость, вследствие разрушения сердцевины, реже она заполнена губчато-волокнистой светло-коричневой сердцевинной паренхимой. Цвет корневищ и укоренившихся стеблей от светло-коричневого до темно-коричневого, почти черного, излом неровный, желтовато-белый, иногда зеленоватый; корней — снаружи от светло-коричневого до темно-коричневого цвета, иногда с беловатыми участками, из-за отслоившейся коры, на изломе — желтовато-белые. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения», раздел «Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы».

Цельное сырье. При рассмотрении микропрепарата корневища и укоренившегося стебля должно быть видно вторичное непучковое строение; на поперечном срезе корневища в перидерме хорошо заметны клетки пробки, располагающиеся 7 — 8 радиальными рядами; за перидермой следуют вторичная кора, зона камбия и широкий слой древесины с заметно выраженными осенними и весенними элементами вторичной ксилемы; вторичная кора представлена вторичной и остатками первичной флоэмы. За узким кольцом камбия следует древесина, которая состоит из широких и узких сосудов, трахеид и древесной паренхимы. Сердцевинные лучи узкие, однорядные. На поперечном срезе укоренившегося стебля должны быть видны узкий слой перидермы, первичная кора, состоящая из клеток паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима), иногда заметных клеток колленхимы и эндодермы. В клетках первичной коры иногда встречаются крупные друзы кальция оксалата.

Перимедулярная зона сердцевины корневища и укоренившегося стебля состоит из толстостенных клеток, примыкающих к ксилеме. К центру паренхимные клетки сердцевины крупнее, их оболочки тоньше, они окрашены в серо-коричневый цвет, местами разорваны, в самом центре сердцевины клетки в основном разрушены: корневище полое, а стебли сохраняют больше неразрушенных клеток сердцевинной паренхимы.

На поперечном срезе корня должны быть видны широкая кора и древесина, радиус которой соизмерим с зоной коры. В коре преобладает перидерма. Пробка представлена несколькими чередующимися слоями, образующими концентрические пояса из темноокрашенных (суберинизированных) и более светлых (несуберинизированных) клеток, имеющих прямоугольную форму и толстые стенки. Сосуды древесины разного диаметра, расположены беспорядочно, сердцевинные лучи слабо выражены.

Определение основных групп биологически активных веществ

ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода — метанол — хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 50 мл, помещают 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, прибавляют 15 мл спирта 50%, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца (+)-катехина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,001 г (+)-катехина, растворяют в спирту 50% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Железа (III) хлорида спиртовой раствор 1%.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца (+)-катехина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 30 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца (+)-катехина должна обнаруживаться зона адсорбции серо-зеленого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции серо-зеленого цвета на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина, 3 зоны адсорбции серо-голубого цвета ниже уровня зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 6,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 3%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (зеленые стебли, черешки, листовые пластинки, соцветия, плоды), в т.ч. отделенных при анализе. Не более 12%.

Органическая примесь. Не более 3%.

Минеральная примесь. Не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор спирта 50% подкисленного. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл спирта 50%, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты 1%, объем раствора доводят спиртом 50% до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой, прибавляют 50 мл спирта 50% и взвешивают с точностью +/- 0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 50% до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл фильтрата, прибавляют 10 мл спирта 50% подкисленного, доводят объем раствора спиртом 50% подкисленным до метки.

Раствор сравнения. Раствор спирта 50% подкисленного.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 279 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения.

Содержание суммы полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100}{144 \cdot a \cdot 0,5 \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

a — навеска сырья, г;

144 — удельный показатель поглощения (+)-катехина в растворе спирта 50% подкисленного при длине волны 279 нм (A_{1c\text{м}}^{1\%}) ;

W — влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---