ФС.2.5.0111. Фармакопейная статья. Амми большой плоды

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Амми большой плоды	ФС.2.5.0111
Ammi majoris fructus	Взамен ФС 42-1996-83

Собранные в период массового созревания на центральных зонтиках, высушенные плоды культивируемого, однолетнего растения амми большой — Ammi majus L., сем. сельдерейных (зонтичных) — Apiaceae (Umbelliferae).

Содержит не менее 0,6% суммы фурокумаринов в пересчете на ксантотоксин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырье. Плоды представляют собой вислоплодики, состоящие из двух полуплодиков (мерикарпиев), распадающихся при созревании, продолговато-яйцевидной формы, к основанию более широкие, к верхушке суженные. На верхушке имеются остатки пятизубчатой чашечки и вздутый надпестичный диск. Поверхность плода голая. Наружная сторона мерикарпия выпуклая, внутренняя — плоская с ясно выраженной ложбинкой. Каждый мерикарпий имеет 5 светлых слабо выступающих продольных ребрышек. Межреберные пространства выпуклые, похожи на ребрышки. В мерикарпии одно семя, сросшееся с околоплодником. Длина мерикарпиев 1,5 — 3,0 мм, ширина 1 — 2 мм.

Цвет зрелых мерикарпиев красновато-коричневый, ребер — более светлый; цвет недозрелых плодов зеленовато-коричневый. Запах характерный. Вкус водного извлечения горьковатый, слегка жгучий.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье. На поперечном срезе мерикарпия видны перикарпий (околоплодник) и семя. Мерикарпий почковидной формы имеет 5 слабовыраженных ребер; проводящий пучок фуниколюса четко выражен. Эпидермис околоплодника (экзокарпий) состоит из одного слоя овальных клеток. В паренхиме мезокарпия в ребрах видны пять проводящих пучков; в межреберных пространствах мезокарпий выпуклый полукруглый в очертании, в нем располагаются 6 межреберных эфирно-масличных канальцев: четыре на выпуклой стороне и два на вогнутой. Канальцы овальные, с 1 — 2 слоями выстилающих клеток темно-коричневого цвета. В полости канальцев иногда заметно зернистое содержимое желтовато-коричневого цвета. Встречаются отдельные мелкие эфирно-масличные канальцы около или внутри проводящих пучков. Эндокарпий и семенная кожура плотно срослись в виде слоя деформированных клеток желтовато-коричневого цвета. Эндосперм состоит из многоугольных клеток, заполненных алейроновыми зернами, каплями жирного масла и мелкими друзами оксалата кальция. Мелкие друзы оксалата кальция встречаются также в паренхиме мезокарпия и экзокарпия.

Рисунок 1 — Амми большой плоды

1 — поперечный срез мерикарпия (40x): а — эфирно-масличные канальцы, б — проводящие пучки в ребрышках; 2 — поперечный срез эндосперма (400x): а — многоугольные клетки эндосперма с алейроновыми зернами, б — мелкие друзы оксалата кальция, в — капли жирного масла; 3, 4 — поперечный срез мерикарпия (200x): а — эфирно-масличный каналец, б — проводящий пучок в ребрышке, в — сросшиеся эндокарпий и семенная кожура, г — эндосперм

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ксантотоксина на хроматограмме раствора стандартного образца ксантотоксина (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. К 2,0 мл испытуемого раствора (раздел «Количественное определение. Сумма фурокумаринов») прибавляют 1,0 мл калия гидроксида раствора 10% в спирте 96%, должно наблюдаться желтое окрашивание; затем прибавляют 3 капли диазореактива, должно наблюдаться темно-красное окрашивание (фурокумарины).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 10,0% (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 8,0% (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,5% (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Органическая примесь. Не более 5%.

Минеральная примесь. Не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма фурокумаринов. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — уксусной кислоты раствор 1% 360:640.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до отсутствия целых плодов. В плоскодонную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельченных плодов, прибавляют 100 мл спирта 80% и взвешивают с погрешностью +/- 0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 120 мин. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 80% до первоначальной массы и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 5 мл фильтрата.

В мерную колбу вместимостью 50 мл количественно переносят 10,0 мл фильтрата, объем раствора доводят спиртом 80% до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца ксантотоксина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ксантотоксина, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 80% до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Примечание

Ксантотоксин: 8-метоксипсорален, 9-метоксифуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он [298-81-7].

Бергаптен: 5-метоксипсорален, 4-метоксифуро[3,2-g]бензопиран-7-он [484-20-8].

Изопимпинеллин: 4,9-диметокси-7H-фуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он, 4,9-диметоксифуро[3,2-g]хромен-7-он, 5,8-диметокси-6,7-фуранокумарин, 5,8-диметоксипсорален [482-27-9].

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 301 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика ксантотоксина.

Хроматографируют раствор стандартного образца ксантотоксина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ксантотоксин — 1 (около 14,50 мин); бергаптен — около 1,01; изопимпинеллин — около 1,08.

Пригодность хроматографической системы:

• фактор асимметрии ксантотоксина не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика ксантотоксина, рассчитанное по 5 повторным хроматограммам, должно составлять не более 2%.

Содержание суммы фурокумаринов в пересчете на ксантотоксин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot 100 \cdot 50 \cdot 100 \cdot 100 \cdot P}{100 \cdot 50 \cdot S_{0} \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} ,

где S — сумма площадей пиков ксантотоксина, бергаптена и изопимпинеллина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика на хроматограмме раствора стандартного образца ксантотоксина;

a — навеска сырья, г;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца ксантотоксина, г;

P — содержание ксантотоксина в фармакопейном стандартном образце ксантотоксина, %;

W — влажность сырья, %.

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---