ФС.2.4.0019. Фармакопейная статья. Ланатозид Ц
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание)»
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023. Взамен ФС 42-2261-99.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Ланатозид Ц | ФС.2.4.0019 |
|---|---|
| Ланатозид Ц | |
| Lanatosidum C | Взамен ФС 42-2261-99 |
 | |
| C49H76O20 [17575-22-3] | М.м. 985,12 |
12\beta ,14-Дигидрокси- 3\beta -{[ \beta -D-глюкопиранозил-( 1 \rightarrow 4 )-3-O-ацетил-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-( 1 \rightarrow 4 )-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил-( 1 \rightarrow 4 )-2,6-дидезокси- \beta -D-рибо-гексопиранозил]окси}- 5\beta -кард-20(22)-енолид.
Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% ланатозида Ц C49H76O20 в пересчете на сухое вещество.
Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.
<*> Гигроскопичен.
<*> Приводится для информации.
Растворимость. Растворим в метаноле, мало и медленно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц.
2. ТСХ. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (раздел «Родственные примеси»).
3. Качественная реакция. Растворяют 1 мг субстанции в 1 мл спирта 96%, прибавляют 1 мл натрия нитропруссида раствора 1% и 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10%; должно появиться красное окрашивание, которое постепенно исчезает.
Железа (III) хлорида раствор 0,05% в уксусной кислоте ледяной. Растворяют 5 мг железа (III) хлорида в 10 мл уксусной кислоты ледяной.
Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл железа (III) хлорида растворе 0,05% в уксусной кислоте ледяной. Полученный раствор осторожно по стенке вливают в пробирку, содержащую 2 мл серной кислоты концентрированной; на границе двух слоев должно появиться серовато-коричневое или темно-коричневое окрашивание; верхний слой постепенно должен окраситься в сине-зеленый или синий цвет.
Удельное вращение. От +32 до +35 в пересчете на сухое вещество (2% раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Срок годности растворов, содержащих ланатозид Ц, не более 3 сут при хранении в плотно закрытой емкости в прохладном, защищенном от света месте.
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.
Раствор трихлоруксусной кислоты. Растворяют 25 г трихлоруксусной кислоты в 100 мл спирта 96%. Раствор готовят непосредственно перед использованием.
Раствор хлорамина. Растворяют 0,3 г хлорамина в 10 мл воды. Раствор готовят непосредственно перед использованием.
Подвижная фаза (ПФ). Вода — метанол — хлороформ 1:15:84.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца ланатозида Ц (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор стандартного образца ланатозида Ц (В). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Г). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
Реактив для детектирования. Раствор хлорамина — раствор трихлоруксусной кислоты 1:20. Раствор готовят непосредственно перед использованием.
На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (0,06 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (В) (0,04 мкг) и раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) (0,02 мкг). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и дважды хроматографируют восходящим способом. После первого хроматографирования пластинку подсушивают в течение 5 мин на воздухе и вновь хроматографируют в тех же условиях. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 115 °C в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) должна обнаруживаться четкая зона адсорбции ланатозида Ц с Rf не менее 0,3 (Rst = 1).
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только трех дополнительных зон адсорбции с Rst менее 1, каждая из которых по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (не более 1,5%).
Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора стандартного образца ланатозида Ц, содержащих 0,06 мкг, 0,04 мкг и 0,02 мкг ланатозида Ц, должно быть не более 3,5%.
Потеря в массе при высушивании. Не более 7,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100 °C и остаточном давлении не более 8 кПа.
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Пикриновой кислоты щелочной раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл пикриновой кислоты раствора 1%, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 5% и доводят объем раствора водой до метки. Раствор хранят в защищенном от света месте не более 2 сут.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищенном от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.
Раствор стандартного образца ланатозида Ц. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96%, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищенном от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.
Раствор сравнения. Спирт 96% — щелочной раствор пикриновой кислоты 10:15.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца ланатозида Ц на спектрофотометре при длине волны 484 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.
Содержание ланатозида Ц C49H76O20 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot 100 \cdot 5 \cdot 50 \cdot 10 \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 5 \cdot 50 \cdot 10 \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,
где A1 — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца ланатозида Ц;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, мг;
P — содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце ланатозида Ц, %;
W — потеря в массе при высушивании, %.
В сухом, защищенном от света месте.