ФС.2.1.0656. Фармакопейная статья. Гозерелина ацетат. Гозерелин
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Гозерелина ацетат | ФС.2.1.0656 |
|---|---|
| Гозерелин | |
| Goserelini acetas | Вводится впервые |
 | |
| C59H84N18O14·xC2H4O2 [145781-92-6] | М.м. 1269,4 (основание) |
2-(5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамида ацетат.
Содержит не менее 94,5% и не более 103,0% гозерелина C59H84N18O14 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.
Описание. Белый или почти белый порошок.
Растворимость. Легко растворим в уксусной кислоте ледяной, легко растворим или растворим в воде, растворим в натрия гидроксида растворе 0,1 М.
1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца гозерелина (раздел «Количественное определение»).
2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1 в жидкой фазе, анализ по методу 1). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина, пролина и серина по формуле:
X = \frac{n_{i} \cdot 7}{\sum n(Glu,His,Tyr,Leu,Arg,Pro,Ser)} ,
где ni — количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
\sum n(Glu,His,Tyr,Leu,Arg,Pro,Ser) — сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина, пролина, серина, мкмоль.
Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: глутаминовая кислота от 0,9 до 1,1; гистидин от 0,9 до 1,1; тирозин от 0,9 до 1,1; лейцин от 0,9 до 1,1; аргинин от 0,9 до 1,1; пролин от 0,9 до 1,1; серин от 1,6 до 2,2. Остальные аминокислоты могут присутствовать не более чем в следовых количествах, за исключением триптофана.
Удельное вращение. От -52 до -56 в пересчете на безводное, свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (0,2% раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 0,05 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH. От 4,0 до 6,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).
<*> Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
<*> При необходимости следует отрегулировать скорость потока ПФ; если регулировка скорости потока не приводит к указанному времени удерживания основного пика, рекомендуется изменить долю ацетонитрила в ПФ, чтобы получить указанное время удерживания для гозерелина.
Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота — ацетонитрил — вода 0,5:200:800.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца примеси A в воде с концентрацией 0,1 мг/мл. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора сравнения Б.
Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца гозерелина смеси для валидации растворяют в 1,0 мл воды.
Примесь A ([4-D-серин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид [1926163-39-4].
Примесь B ([6-O-трет-бутил-L-серин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь C ([9-D-пролин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-D-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь D (де-9-L-пролин-гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил)гидразинкарбоксамид.
Примесь E (гозерелин-(1-8)-пептидил-L-пролингидразид): 5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролингидразид.
Примесь F ([5-D-тирозин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь G ([2-D-гистидин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь H ([1-(5-оксо-D-пролин)]гозерелин): 2-(5-оксо-D-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь I (эндо-8a,8b-ди-L-пролин-гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь J (эндо-8a-L-пролин-гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь K ([4-O-ацетил-L-серин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-O-ацетил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Примесь L ([7-D-лейцин]гозерелин): 2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-D-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.
Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения А и испытуемый раствор.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гозерелина смеси для валидации.
Относительное время удерживания соединений. Гозерелин — 1 (от 40 до 50 мин); примесь A — около 0,67; примесь C — около 0,78; примесь B — около 0,79; примесь D — около 0,85; примесь E — около 0,89; примесь F — около 0,92; примесь G — около 0,94; примесь H — около 0,98; примесь I — около 1,43; примесь J — около 1,53; примесь K — около 1,67; примесь L — около 1,77.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
- разрешение (RS) между пиками примеси A и гозерелина должно быть не менее 7,0;
- фактор асимметрии пика (AS) гозерелина должен быть от 0,8 до 2,5;
- фактор асимметрии пика (AS) примеси A должен быть от 0,8 до 2,5.
На хроматограмме раствора для идентификации пиков расположение пиков должно быть аналогично хроматограмме, прилагаемой к фармакопейному стандартному образцу гозерелина смеси для валидации; 2 пика, расположенные до пика основного вещества (соответствуют примесям E и G), должны быть хорошо различимы.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика примеси E не должна превышать площадь пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0%);
- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,5 площади пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,5%).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05%).
Вода. Не более 10,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции.
Уксусная кислота. От 4,5 до 15,0% (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ — ПФА 5:95 и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные эндотоксины. Не более 16,0 ЕЭ на 1 мг гозерелина ацетата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.
Раствор стандартного образца гозерелина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца гозерелина в воде с концентрацией гозерелина около 1,0 мг/мл.
| Время хроматографирования | 60 мин. |
|---|
Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца гозерелина и испытуемый раствор.
Содержание гозерелина C59H84N18O14 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W - A)} ,
где S1 — площадь пика гозерелина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца гозерелина;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца гозерелина, мг;
P — содержание гозерелина в фармакопейном стандартном образце гозерелина, %;
W — содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
A — содержание уксусной кислоты в субстанции, %.
В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °C.