ФС.2.1.0511. Фармакопейная статья. Молнупиравир

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Молнупиравир	ФС.2.1.0511
Молнупиравир
Molnupiravirum	Вводится впервые

C13H19N3O7 [2492423-29-5]	М.м. 329,31

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

({(2R,3S,4R,5R)-3,4-Дигидрокси-5-[4-(гидроксиамино)-2-оксопиримидин-1(2H)-ил]оксолан-2-ил}метил)(2-метилпропаноат).

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% молнупиравира C13H19N3O7 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и в метаноле, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в дихлорметане.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца молнупиравира.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика молнупиравира на хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 159 до 163 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От -7,5 до -9,5 в пересчете на безводное вещество (1% раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными, хранят при температуре 4 °C не более суток и защищают от света.

Буферный раствор pH 2,5. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Буферный раствор pH 7,0. Растворяют 1,74 г дикалия гидрофосфата безводного в 900 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол — буферный раствор pH 2,5 20:980.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор pH 2,5 — ацетонитрил 200:800.

Растворитель. Метанол — буферный раствор pH 7,0 20:980.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца молнупиравира. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца молнупиравира, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца молнупиравира и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг субстанции, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, выдерживают в течение 15 мин при комнатной температуре, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1: ({(3aR,4R,6R,6aR)-6-[4-(гидроксиамино)-2-оксопиримидин-1(2H)-ил]-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-d][1,3]диоксол-4-ил}метил)(2-метилпропаноат) [2346620-55-9].

Примесь 2: 4-(гидроксиамино)-1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]пиримидин-2(1H)-он [3258-02-4].

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,0 мм, силикагель диизобутилоктадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Температура образца	10 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 235 нм;
Объем пробы	5 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 4	100	0
4 — 12	100 \rightarrow 90	0 \rightarrow 10
12 — 16	90	10
16 — 39	90 \rightarrow 40	10 \rightarrow 60
39 — 44	40	60
44 — 46	40 \rightarrow 100	60 \rightarrow 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: молнупиравир — 1 (около 21 мин); примесь 2 — около 0,15; примесь 1 — около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 1 и примеси 2 используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика молнупиравира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси с относительным временем удерживания около 0,98 и молнупиравира должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

• фактор асимметрии пика (AS) молнупиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика молнупиравира должно быть не более 5,0%.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 100 \cdot 10} ,

где S1 — площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора сравнения;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца молнупиравира, мг;

P — содержание молнупиравира в фармакопейном стандартном образце молнупиравира, %.

Допустимое содержание примесей:

• примесь 1 — не более 0,10%;
• примесь 2 — не более 0,15%;
• любая другая примесь — не более 0,10%;
• сумма примесей — не более 0,5%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика молнупиравира на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска).

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца молнупиравира и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира:

• фактор асимметрии пика (AS) молнупиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика молнупиравира должно быть не более 1,0%.

Содержание молнупиравира C13H19N3O7 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика молнупиравира на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика молнупиравира на хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца молнупиравира, мг;

P — содержание молнупиравира в фармакопейном стандартном образце молнупиравира, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

Не требует особых условий.

---