ФС.2.1.0508. Фармакопейная статья. Митотан

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Митотан	ФС.2.1.0508
Митотан
Mitotanum	Взамен ФС 42-2441-86

C14H10Cl4 [53-19-0]	М.м. 320,04

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1-[(1RS)-2,2-Дихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-2-хлорбензол.

Содержит не менее 97,0% и не более 103,0% митотана C14H10Cl4 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в хлороформе, растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца митотана.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора А и раствора стандартного образца митотана в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 230 нм.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 200 мг субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора Б и раствора стандартного образца митотана в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 261 нм, 268 нм и 275 нм.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 74 до 77 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельный показатель поглощения. От 490 до 520 (в максимуме поглощения) при длине волны 230 нм в пересчете на сухое вещество (0,001% раствор субстанции в спирте 96%, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода — ацетонитрил 280:720.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 40 мл спирта 96%, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца митотана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца митотана, растворяют в 40 мл спирта 96%, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца митотана и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6 мг 1,1-дихлор-1,2-бис-(п-хлорфенил)этана (n,n-ДДД), прибавляют 8,0 мл раствора стандартного образца митотана, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель додецилсилильный для хроматографии, 4 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Скорость потока	2,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 230 нм;
Объем пробы	5 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 8	90	10
8 — 11	90 \rightarrow 10	10 \rightarrow 90
11 — 14	10	90
14 — 15	10 \rightarrow 90	90 \rightarrow 10
15 — 20	90	10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Митотан — 1 (около 8 мин); n,n-ДДД — около 0,93.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками n,n-ДДД и митотана должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика митотана должно быть не более 2,0%.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика митотана должно быть не менее 10.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 1}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 200} ,

где S1 — площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца митотана, мг;

P — содержание митотана в фармакопейном стандартном образце митотана, %.

Допустимое содержание примесей:

• любая примесь — не более 0,05%;
• сумма примесей — не более 0,5%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,01%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,005% (ОФС «Железо», метод 1), определение солей железа в зольном остатке органических соединений»). Для определения используют 60 мг субстанции и стандартный раствор железо(III)-иона 3 мкг/мл.

Сульфаты. Не более 0,05% (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,5 г субстанции в течение 10 мин с 25,0 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца митотана:

• фактор асимметрии пика (AS) митотана должен быть не менее 0,9 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика митотана должно быть не более 1,3%.

Содержание митотана C14H10Cl4 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) в процентах вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 10 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 1 \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика митотана на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца митотана, мг;

P — содержание митотана в фармакопейном стандартном образце митотана, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---