ФС.2.1.0407. Фармакопейная статья. Диацереин
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Диацереин | ФС.2.1.0407 |
|---|---|
| Диацереин | |
| Diacereinum | Вводится впервые |
 | |
| C19H12O8 [13739-02-1] | М.м. 368,29 |
4,5-Бис(ацетилокси)-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота.
Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% диацереина C19H12O8 в пересчете на сухое вещество.
Описание. Желтый кристаллический порошок.
Растворимость. Растворим в диметилацетамиде, мало растворим в тетрагидрофуране, практически нерастворим в воде и этаноле.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диацереина.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина (раздел «Количественное определение»).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Испытание проводят в защищенном от света месте.
Лимонной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,4 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран — ацетонитрил — лимонной кислоты раствор 80:275:645.
Раствор А. Растворяют 14,7 г натрия хлорида и 18,8 г глицина в 500 мл воды.
Раствор Б. Смешивают 25,3 мл натрия гидроксида раствора 2% и 74,6 мл раствора А, при необходимости доводят значение pH натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5.
Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 30 мл натрия гидроксида раствора 2%, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение pH натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °C досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.
Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в тетрагидрофуране, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают полученный раствор ультразвуком в течение не более 30 с и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 25 мл натрия гидроксида раствора 2%, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение pH натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °C досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.
Примечание - Время между растворением фармакопейного стандартного образца примеси B и экстракцией не должно превышать 30 мин.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси B и доводят объем раствора ПФ до метки.
Примесь B: 1,8-дигидрокси-3-(гидроксиметил)антрацен-9,10-дион [481-72-1].
Примесь H: 3-[(ацетилокси)метил]-9,10-диоксоантрацен-1,8-диил диацетат [25395-11-3].
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси B и испытуемый раствор.
Время удерживания примеси B — около 11 мин.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 10.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков примесей B и H не должна превышать площадь пика примеси B на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B (не более 0,0015%).
Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 353 мл воды и 147 мл фосфорной кислоты концентрированной. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Растворитель. ПФА — ПФБ 500:500.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 50 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М, 40 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора растворителем до метки (раствор содержит примеси D и E).
Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца диацереина смеси примесей, содержащего примеси C и F, растворяют в смеси 0,5 мл тетрагидрофурана и 0,5 мл растворителя.
Примесь C: 4,5-дигидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [478-43-3].
Примесь D: 5-(ацетилокси)-4-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-35-6].
Примесь E: 4-(ацетилокси)-5-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-36-7].
Примесь F: (10S)-3-[(ацетилокси)метил]-10-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил- \beta -D-глюкопиранозил)-9-оксоантрацен-1,8-диил диацетат [13928-72-8].
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 3 | 80 | 20 |
| 3 — 13 | 80 \rightarrow 60 | 20 \rightarrow 40 |
| 13 — 20 | 60 | 40 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Диацереин — 1 (около 13,5 мин); примесь D — около 1,1; примесь E — около 1,15; примесь C — около 1,2; примесь F — около 1,3.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей C и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу диацереина смеси примесей.
Для идентификации пиков примесей D и E используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и примеси E должно быть не менее 1,5.
На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 100.
Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь C — 1,4; примесь D — 1,3; примесь E — 1,3; примесь F — 9,5.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика каждой из примесей D и E не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
- площадь пика примеси C не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
- площадь пика примеси F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).
Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объем раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца диацереина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диацереина, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объем раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Хроматографируют раствор стандартного образца диацереина и испытуемый раствор.
Содержание диацереина C19H12O8 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 25 \cdot 2 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 2 \cdot 50 \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика диацереина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца диацереина, мг;
W — потеря в массе при высушивании, %;
P — содержание диацереина в фармакопейном стандартном образце диацереина, %.
В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.