ФС.2.1.0397. Фармакопейная статья. Гидроксихлорохина сульфат. Гидроксихлорохин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Гидроксихлорохина сульфат	ФС.2.1.0397
Гидроксихлорохин
Hydroxychloroquini sulfas	Вводится впервые

C18H26ClN3O·H2SO4 [747-36-4]	М.м. 433,95

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-{(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентиламино}этан-1-ола сульфат (1:1).

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% гидроксихлорохина сульфата C18H26ClN3O·H2SO4 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или слегка желтоватый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата.

2. Спектрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 нм до 400 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца гидроксихлорохина (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

pH раствора. От 3,5 до 5,5 (1% раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,72 г калия дигидрофосфата, растворяют в 850 мл воды, прибавляют 2,0 мл триэтиламина, доводят pH раствора до 8,0 потенциометрически натрия гидроксида раствором 1 М, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. Смесь ПФБ — ПФА 470:530.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют около 80 мл растворителя, выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, добавляют около 15 мл растворителя и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (А) и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (В). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (А) и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 5,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (В) и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси B и C, прибавляют около 5 мл растворителя, выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем содержимого колбы растворителем до метки.

Примечание

Примесь B: 4(2-{(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентиламино}этил)(гидро)сульфат [103152-84-7].

Примесь C: 2-{[(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентил]амино}этан-1-ол [4298-15-1].

Хроматографические условия

Колонка	100 x 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 20	53 \rightarrow 22	47 \rightarrow 78
20 — 38	22	78
38 — 40	22 \rightarrow 53	78 \rightarrow 47
40 — 45	53	47

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца гидроксихлорохина (В), раствор стандартного образца гидроксихлорохина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гидроксихлорохин — 1 (около 14 мин); примесь B — 0,54; примесь C — 0,71.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей B и C используют время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидроксихлорохина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидроксихлорохина (B):

• фактор асимметрии пика (AS) гидроксихлорохина должен находиться в диапазоне от 0,8 до 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика гидроксихлорохина должно быть не более 5,0% (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси C и гидроксихлорохина должно быть не менее 5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гидроксихлорохина должно быть не менее 10.

Содержание примесей B и C в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 1 \cdot 5}{S_{A} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot 100 \cdot 10} ,

где S1 — площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

SА — площадь пика гидроксихлорохина на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксихлорохина (Б);

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина, мг;

P — содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина, %.

Содержание любой другой примеси вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 1 \cdot 1}{S_{\text{Б}} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot 100 \cdot 10} ,

где S1 — площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

SБ — площадь пика гидроксихлорохина на хроматограмме раствора сравнения Б;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, мг;

P — содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина сульфата, %.

Допустимое содержание примесей:

• примеси B и C — не более 0,5% каждая;
• любая другая примесь — не более 0,10%;
• сумма всех примесей — не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Хлориды. Не более 0,035% (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,286 г субстанции в 50 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании» (способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях).»

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 80 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения субстанции, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и фильтруют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, прибавляют 80 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, фильтруют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора до метки хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М. Раствор используют свежеприготовленным.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца гидроксихлорохина на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 341 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Содержание гидроксихлорохина сульфата C18H26ClN3O·H2SO4 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 50 \cdot 5 \cdot 100}{A_{0} \cdot a_{1} \cdot 5 \cdot 100 \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где A1 — оптическая плотность испытуемого раствора;

A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца гидроксихлорохина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, мг;

P — содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина сульфата, %;

W — потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---