ФС.2.1.0372. Фармакопейная статья. Ампициллин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ампициллин	ФС.2.1.0372
Ампициллин
Ampicillinum	Взамен ФС 42-2040-98

C16H19N3O4S [69-53-4]	М.м. 349,40

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% ампициллина C16H19N3O4S в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно или мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

<*> Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочных гидроксидов.

---

<*> Приводится для информации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +280 до +305 в пересчете на безводное вещество (0,25% раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция испытуемого раствора А и испытуемого раствора Б не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемые растворы готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор А. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл аммиака раствора 2 М.

Оптическая плотность. Оптическая плотность 0,29% раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 322 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 3,5 до 5,5 (0,25% раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Уксусная кислота разведенная 12% — калия дигидрофосфата раствор 0,2 М — ацетонитрил — вода 1:100:100:1799.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Уксусная кислота разведенная 12% — калия дигидрофосфата раствор 0,2 М — ацетонитрил — вода 1:100:800:299.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 27 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ампициллина и доводят ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — tR	85	15
tR — (tR +30)	85 \rightarrow 0	15 \rightarrow 100
(tR + 30) — (tR + 45)	0	100
(tR + 45) — (tR + 60)	85	15
tR — время удерживания ампициллина, определенное по хроматограмме раствора сравнения.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения (ПФБ — ПФА 15:85) и испытуемый раствор (градиентный режим).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 3,0. При необходимости корректируют соотношение подвижных фаз.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

<**> N,N-Диметиланилин. Не более 0,002% (ОФС «N,N-Диметиланилина»).

---

<**> Необходимость включения показателя обусловлена спецификой получения субстанции.

Вода. Не более 2,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза. ПФБ — ПФА 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 1,0% (6 определений).

Содержание ампициллина C16H19N3O4S в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, мг;

P — содержание ампициллина в фармакопейном стандартном образце ампициллина безводного, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.

---