ФС.2.1.0058. Фармакопейная статья. Аскорбиновая кислота
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 16.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023. Взамен ФС.2.1.0058.18.
ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ
flowchart LR n0["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1" n1["ФС.2.1.0058.18"]:::rst click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0058-18" "ФС.2.1.0058.18. Фармакопейная статья. Аскорбиновая кислота (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)" n2["ФС.2.1.0058"]:::doc click n2 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0058" "ФС.2.1.0058. Фармакопейная статья. Аскорбиновая кислота (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)" n1 --> n2 n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Аскорбиновая кислота Аскорбиновая кислота Acidum ascorbicum | ФС.2.1.0058 |
| Взамен ФС.2.1.0058.18 |
| C6H8O6 | М.м. 176,12 |
|---|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(5R)-5-[(1S)-1,2-Дигидроксиэтил]-3,4-дигидроксифуран-2(5H)-он.
Содержит не менее 99,0% и не более 100,5% аскорбиновой кислоты C6H8O6 в пересчете на свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, обесцвечивающиеся при воздействии воздуха и влаги.
Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос по поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты.
2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мг субстанции и растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объем раствора до метки.
Ультрафиолетовый спектр испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 243 нм с удельным показателем поглощения от 545 до 585.
3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды и прибавляют 0,2 мл азотной кислоты разведенной 12,5% и 0,5 мл серебра нитрата раствора 1,7%; должен появиться темный осадок.
ИСПЫТАНИЯ
Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
Удельное вращение. От +20,5 до +21,5 (1 г субстанции в 10 мл воды; определение проводят сразу после приготовления испытуемого раствора, ОФС «Оптическое вращение).»
pH. От 2,1 до 2,6 (Испытание проводят в растворе, полученном в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными.
Буферный раствор. В химический стакан помещают 6,8 г калия дигидрофосфата, растворяют в 175 мл воды, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора до метки.
Подвижная фаза. Буферный раствор — ацетонитрил 25:75.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,50 г (точная навеска) субстанции, растворяют в подвижной фазе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси C. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты примеси C, растворяют в подвижной фазе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты примеси D, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты, растворяют в подвижной фазе, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца примеси C и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора подвижной фазой до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора стандартного образца примеси C и перемешивают.
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Аскорбиновая кислота — 1 (около 11 мин); примесь D — около 0,4; примесь C — около 1,7.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси C и пика примеси D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками аскорбиновой кислоты и примеси C должно быть не менее 3.
На хроматограмме стандартного раствора отношение сигнал/шум (S/N) для пика аскорбиновой кислоты должно быть не менее 20 (6 введений).
Допустимое содержание примесей
На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика каждой из примесей C и D не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15% каждая);
- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10%);
- сумма площадей пиков всех примесей (кроме C и D) не должна превышать двукратную площадь пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,2%).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05%).
Щавелевая кислота. Не более 0,2%.
Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды, нейтрализуют натрия гидроксида раствором 10%, прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 12%, 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35% и перемешивают.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 70 мг щавелевой кислоты, растворяют в воде, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. К 5 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора уксусной кислоты разведенной 12%, 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35% и перемешивают. Раствор готовят одновременно с испытуемым раствором.
Испытуемый раствор и раствор сравнения выдерживают в течение 1 ч.
Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.
Медь. Не более 0,0005%. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).
Используют свежеприготовленные растворы.
Растворитель. Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием элементных примесей.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Стандартный раствор меди. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,393 г меди сульфат пентагидрат, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают стандартный раствор меди в количестве: 2,0; 4,0; 6,0 мл, доводят объем каждого раствора растворителем до метки и перемешивают (содержание меди соответственно: 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).
| Источник излучения | лампа с полым медным катодом; |
|---|---|
| Длина волны | 324,8 нм; |
| Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя. |
Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов меди и испытуемого раствора. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов величины поглощения от концентрации меди (мкг/мл). Определяют параметры линейной регрессии.
С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию меди в испытуемом растворе.
Содержание меди в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{C \cdot 25 \cdot 100}{a \cdot 1000000} ,
где C — концентрация меди в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
Железо. Не более 0,0002%. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).
Используют свежеприготовленные растворы.
Растворитель. Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием элементных примесей.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в азотной кислоты растворе 0,1 М, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Стандартный раствор железа. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,863 г квасцов железоаммониевых, растворяют в 25 мл серной кислоты разведенной 9,8% и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают стандартный раствор железа в количестве: 1,0; 2,0; 3,0 мл, доводят объем каждого раствора растворителем до метки и перемешивают (содержание железа соответственно 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).
| Источник излучения | лампа с полым железным катодом; |
|---|---|
| Длина волны | 248,3 нм; |
| Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя. |
Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов железа и испытуемого раствора при длине волны 248,3 нм. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов величины поглощения от концентрации железа (мкг/мл). Определяют параметры линейной регрессии.
С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию железа в испытуемом растворе.
Содержание железа в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{C \cdot 25 \cdot 100}{a \cdot 1000000} ,
где C — концентрация железа в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 1,2 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 100 раз.
<*> Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл серной кислоты раствора 1 М и 80 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до появления устойчивого фиолетово-синего окрашивания (индикатор — 1 мл крахмала раствора 1%, содержащего 0,01% ртути(II) йодида).
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 8,806 мг аскорбиновой кислоты C6H8O6.
ХРАНЕНИЕ
В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.