ГОСТ 35375-2026. Межгосударственный стандарт. Продукты убоя птицы и продукция из мяса (субпродуктов) птицы. Методы ускоренного обнаружения сальмонелл
(введен в действие Приказом Росстандарта от 15.07.2026 № 806-ст)
Примечание
Документ вводится в действие с 01.01.2027 с правом досрочного применения.
Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 июля 2026 г. № 806-ст
ПРОДУКТЫ УБОЯ ПТИЦЫ И ПРОДУКЦИЯ ИЗ МЯСА (СУБПРОДУКТОВ) ПТИЦЫ
МЕТОДЫ УСКОРЕННОГО ОБНАРУЖЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛ
Poultry slaughter products and meat (offal) products birds. Accelerated salmonella detection methods
Дата введения 1 января 2027 года с правом досрочного применения
Предисловие
Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом птицеперерабатывающей промышленности — филиалом Федерального государственного бюджетного научного учреждения Федерального научного центра «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства» (ВНИИПП — филиал ФНЦ «ВНИТИП»)
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 июня 2026 г. № 198-П)
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 июля 2026 г. № 806-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 35375-2026 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2027 г. с правом досрочного применения
Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге «Межгосударственные стандарты»
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется:
- на продукты убоя птицы (тушки, части тушек, бескостное мясо, жир-сырец, кожу, субпродукты, мясо птицы механической обвалки, пищевую кость птицы, коллагенсодержащее сырье);
- продукцию из мяса птицы (полуфабрикаты, колбасные, кулинарные изделия, консервы и другие группы);
- объекты окружающей производственной среды (технологическое оборудование, упаковку, инвентарь, стены и пол производственных цехов, одежду и поверхность рук работников).
Настоящий стандарт устанавливает ускоренные методы обнаружения сальмонелл (далее — бактерии рода Salmonella) с использованием:
- подложек, содержащих дегидратированный питательный гелеобразующий хромогенный субстрат на подложке,
- автоматического бактериологического анализатора (далее — прибор).
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 12.1.004 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.019 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 4159 Реактивы. Йод. Технические условия
ГОСТ 4232 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия
ГОСТ 5556 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия
ГОСТ 5962 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия
ГОСТ 6672 Стекла покровные для микропрепаратов. Технические условия
ГОСТ 6709 <*> Вода дистиллированная. Технические условия
<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 58144-2018.
ГОСТ 7702.2.0 Продукты убоя птицы, полуфабрикаты из мяса птицы и объекты окружающей производственной среды. Методы отбора проб и подготовка к микробиологическим исследованиям
ГОСТ 8756.0 Продукты пищевые консервированные. Отбор проб и подготовка их к испытанию
ГОСТ 9147 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия
ГОСТ 9284 Стекла предметные для микропрепаратов. Технические условия
ГОСТ 9412 Марля медицинская. Общие технические условия
ГОСТ 9792 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 10444.1 Консервы. Приготовление растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе
ГОСТ 12026 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 13739 Масло иммерсионное для микроскопии. Технические требования. Методы испытаний
ГОСТ 13805 Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия
ГОСТ 14919 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 21239 Инструменты хирургические. Ножницы. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 21240 Скальпели и ножи медицинские. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 21241 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 28489 Микроскопы световые. Термины и определения
ГОСТ 29227 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
ГОСТ 31467 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы отбора проб и подготовка их к испытаниям
ГОСТ 31468 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Метод выявления сальмонелл
ГОСТ 31659 (ISO 6579-1:2017) Микробиология пищевой цепи. Горизонтальный метод обнаружения, подсчета и серотипирования бактерий рода Salmonella. Часть 1. Обнаружение Salmonella spp.
ГОСТ ISO 7218 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям
ГОСТ ISO 11133 Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных и воды. Приготовление, производство, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 7702.2.0, ГОСТ 31468, а также следующий термин с соответствующим определением:
3.1 подложка для определения бактерии рода Salmonella: Дегидратированная дифференциально-диагностическая среда на подложке, содержащая хромогенные субстраты и растворимое в холодной воде гелеобразующее вещество.
4 Условия выполнения испытаний и требования безопасности
4.1 Условия проведения испытаний
4.1.1 Общие требования проведения микробиологических исследований и работы с микроорганизмами I и II групп опасности — по ГОСТ ISO 7218.
Примечание - Группа патогенности микроорганизма, распространенного в пределах конкретной страны, устанавливается соответствующими национальными нормативными документами.
4.1.2 Испытание проводят в асептических условиях, чтобы избежать микробной контаминации во время посева, используя бокс микробиологической безопасности или боксированное помещение.
4.1.3 Требования к персоналу согласно требованиям к лабораториям, аккредитованным в национальной системе аккредитации, — по ГОСТ ISO 7218.
К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие допуск к работе с микроорганизмами в соответствии с документами, определяющими требования к безопасности при работе с микроорганизмами, действующими на территории государства, принявшего стандарт.
4.2 Требования безопасности
Требования безопасности при работе с химическими реактивами — по ГОСТ 12.1.007, с электрооборудованием — по ГОСТ 12.1.019. Требования пожарной безопасности — по ГОСТ 12.1.004.
5 Метод ускоренного обнаружения бактерии рода Salmonella с использованием подложек
5.1 Сущность метода
Метод обнаружения бактерии рода Salmonella ускоренным способом с использованием подложек основан на высеве смыва или определенного количества пробы в жидкие неселективные и селективные среды с последующим высевом на подложки, выделении культур, имеющих типичные для бактерий рода Salmonella морфологические, культуральные признаки, с последующей их идентификацией по биохимическим свойствам и серологическим реакциям.
5.2 Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды
5.2.1 Для проведения испытаний применяют аппаратуру, материалы, реактивы и питательные среды — по ГОСТ 7702.2.0, ГОСТ 31659 со следующими дополнениями:
- микроскоп световой биологический с увеличением до 900X по ГОСТ 28489;
- бактериологическую петлю диаметром приблизительно 3 мм;
- подложку для определения бактерии рода Salmonella по документации изготовителя;
- среду для неселективного предварительного обогащения — забуференную пептонную воду по ГОСТ 7702.2.0;
- среду Рапаппорта-Вассилиадиса с соей (RVS-бульон) по ГОСТ 31659;
- селенитовую среду по ГОСТ 7702.2.0;
- тетратионатный бульон Мюллера-Кауфмана по ГОСТ 31659;
- магниевую среду или хлористомагниевую по ГОСТ 7702.2.0;
- наборы или тест-системы для биохимической идентификации энтеробактерий по документам производителя;
- губку (спонж), тампоны (свабы), аппликаторы в пробирке по ГОСТ 7702.2.0;
- пептонно-солевой раствор для приготовления разведений по ГОСТ 7702.2.0;
- мясо-пептонный агар по ГОСТ 7702.2.0;
- сухие агглютинирующие адсорбированные поливалентные O-сыворотки; Vi-, H-агглютинирующие сыворотки для серологической идентификации бактерии рода Salmonella по ГОСТ 7702.2.0;
- физиологический раствор по ГОСТ 7702.2.0;
- дистиллированную воду по ГОСТ 6709;
- спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962 или по документу, в соответствии с которым, он изготовлен.
5.2.2 Допускается применение других средств измерений аналогичного назначения с метрологическими характеристиками и аппаратуры с техническими характеристиками, а также реактивов, материалов и сред, не уступающих указанным по качеству.
5.2.3 Допускается использование:
- готовых и сухих питательных сред, приготовленных по инструкции производителя;
- одноразового оборудования и материалов вместо оборудования и материалов многократного использования (чашки Петри, пробирки, пипетки и др.), если они аналогичны по техническим характеристикам и пригодны для использования в микробиологии и не содержат вещества, подавляющих рост микроорганизмов.
5.3 Подготовка к проведению анализа
5.3.1 Отбор проб и подготовка посуды
Отбор и подготовку проб продуктов убоя птицы и проб продукции из мяса (субпродуктов) птицы проводят методом ополаскивания или методом протирания поверхности, или методом вырезания кусочков мякотных тканей (продукта) по ГОСТ 7702.2.0, ГОСТ 9792, ГОСТ 8756.0, ГОСТ 31467.
Отбор проб с объектов окружающей производственной среды проводят методом смыва по ГОСТ 7702.2.0.
Подготовка посуды — по ГОСТ 31468.
Подготовка подложки к анализу — по документации изготовителя.
Температура проб перед анализом должна быть от 18 °C до 27 °C.
5.3.2 Приготовление питательных сред и сыворотки
5.3.2.1 Пептонно-солевой раствор для приготовления разведений — по ГОСТ 7702.2.0.
5.3.2.2 Среда для неселективного предварительного обогащения — забуференная пептонная вода — по ГОСТ 7702.2.0.
5.3.2.3 Среда Рапаппорта-Вассилиадиса с соей (RVS-бульон) — по ГОСТ 31659.
5.3.2.4 Мясо-пептонный агар — по ГОСТ 7702.2.0.
5.3.2.5 Сухой ферментативный пептон — по ГОСТ 13805;
5.3.2.6 Селенитовая среда — по ГОСТ 7702.2.0.
5.3.2.7 Тетратионатный бульон Мюллера-Кауфмана — по ГОСТ 31659.
5.3.2.8 Магниевая или хлористомагниевая среда — по ГОСТ 7702.2.0.
Допускается использование других готовых и сухих питательных сред, приготовленных по прописи производителя.
5.3.2.9 Сухие агглютинирующие адсорбированные поливалентные O-сыворотки, Vi-, H-агглютинирующие сыворотки — в соответствии с инструкцией изготовителя.
5.3.2.10 Контроль качества питательных сред проводят согласно ГОСТ ISO 11133.
5.4 Проведение анализа
5.4.1 Предварительное обогащение в неселективной среде
Для приготовления исходной суспензии используют неселективную среду по 5.3.2.2. Среду для неселективного обогащения инокулируют смывом или пробой (г или см3). Соотношение между количеством высеваемой пробы и количеством неселективной среды — 1:9. Тщательно гомогенизируют в течение 2 мин.
Посевы инкубируют при температуре (37 +/- 1,0) °C в течение (18 +/- 2) ч.
5.4.2 Обогащение в селективной среде
Культуры из среды для предварительного неселективного обогащения пересевают в среду селективного обогащения — RVS-бульон (см. 5.3.2.3).
Для этого 0,1 см3 культуры, полученной по 5.4.1, пересевают в 10 см3 RVS-бульон по 5.3.2.3.
Посевы на RVS-бульоне инкубируют при температуре (41,5 +/- 1,0) °C в течение 18 — 24 ч. Допускается применение других питательных сред согласно 5.3.2.6 - 5.3.2.9, при этом посевы инкубируют при температуре (37 +/- 1,0) °C в течение времени, указанного в инструкции по применению.
5.4.3 Пересев на дифференциально-диагностическую среду подложки
После инкубирования на селективной среде — RVS-бульоне — проводят высев посевного материала на подложку. Допускается использование других селективных питательных сред согласно инструкции производителя.
Сначала следует подготовить подложку. Для этого помещают подложку на ровную поверхность. Поднимают верхнюю пленку. С помощью пипетки, расположенной перпендикулярно к поверхности подложки, вносят 1 см3 стерильного разбавителя в центр нижней подложки. Аккуратно опускают верхнюю пленку, не допуская образования пузырьков воздуха. Оставляют подложку на 1 ч при комнатной температуре 18 °C — 27 °C в защищенном от света месте для формирования геля.
Для получения отдельных хорошо изолированных колоний бактериологической петлей диаметром приблизительно 3 мм (объем 10 мкл) берут посевной материал и проводят высев непрерывным штрихом на поверхность геля подложки. Рукой в перчатке проводят разглаживающим движением по поверхности пленки подложки, оказывая на нее равномерное давление, для удаления пузырьков воздуха из области высева. Наличие пузырьков не допускается.
Подложки укладывают в стопки в количестве не более 20. Инкубируют при температуре (37 +/- 1,0) °C в течение (24 +/- 2) ч или в соответствии с инструкцией производителя.
После инкубирования проводят просмотр подложек на присутствие типичных колоний для бактерий рода Salmonella. Интерпретацию результата проводят согласно инструкции производителя.
При отсутствии типичных колоний в посевах на подложках работу с посевами прекращают, и конечный результат определяют как отсутствие бактерий рода Salmonella в анализируемой пробе (массе, объеме) продукта.
5.4.4 Идентификация
5.4.4.1 Биохимическая идентификация
Если типичные колонии бактерий рода Salmonella присутствуют на подложке, отбирают не менее пяти изолированных типичных колоний и переходят к проведению идентификации бактерий рода Salmonella по биохимическим свойствам.
Для определения биохимических свойств используют подложку с типичными колониями. Для биохимической идентификации бактерий рода Salmonella допускается использование наборов тест-систем. Идентификация с использованием наборов тест-систем для идентификации микроорганизмов основана на использовании стандартных биохимических микротестов. Системы используют по инструкции производителя со специальной адаптированной под микротесты базой данных.
Для проведения идентификации бактерий рода Salmonella по биохимическим свойствам и серологическим реакциям используют только чистые культуры. После инкубирования проводят просмотр подложек на присутствие типичных колоний для бактерий рода Salmonella. Интерпретацию результата проводят согласно инструкции производителя. Выделение чистой культуры проводят по ГОСТ 31659.
5.4.4.2 Серологическая идентификация
Серологическую идентификацию для подтверждения принадлежности к бактериям рода Salmonella проводят с культурами, предварительно пересеянными на поверхность мясо-пептонного агара.
Для этого поднимают верхнюю пленку тест-пластины и петлей снимают колонию с геля, затем штриховым движением колонию переносят на мясо-пептонный агар.
Посевы инкубируют при температуре (37 +/- 1) °C в течение (24 +/- 3) ч, затем проводят серологическую идентификацию по ГОСТ 31659.
5.5 Обработка результатов
Результаты оценивают по каждой пробе в отдельности.
Обработку результатов проводят по ГОСТ ISO 7218 и отмечают наличие или отсутствие бактерии рода Salmonella в исследованной пробе с указанием массы в граммах, объема в см3 или площади в см2.
Представление результатов испытаний:
- определяемый показатель: «Бактерии рода Salmonella»;
- результат: «Обнаружены или не обнаружены в X, г (см3, см2)».
5.6 Оформление протокола испытания
В протоколе испытания необходимо указать метод испытания и полученные результаты. В нем должны быть также упомянуты все процедуры, не указанные в настоящем стандарте или рассматриваемые как дополнительные, а также сведения о любых случаях, вероятно повлиявших на результаты.
В протокол испытаний должна быть включена вся информация, необходимая для точной идентификации образца.
6 Метод обнаружения бактерий рода Salmonella с использованием для биохимического подтверждения выделенных микроорганизмов автоматического бактериологического анализатора
6.1 Сущность метода
Метод обнаружения бактерий рода Salmonella основан на высеве смыва или определенного количества пробы в жидкие неселективные и селективные среды с последующим высевом на плотные дифференциально-диагностические среды, выделении культур, имеющих типичные для бактерий рода Salmonella морфологические, культуральные признаки, с последующей их идентификацией по биохимическим свойствам с помощью бактериологического анализатора
6.2 Требования безопасности, охраны окружающей среды
Требования безопасности, охраны окружающей среды — согласно разделу 4.
6.3 Требования к работе с прибором
6.3.1 К работе с прибором допускаются лица, допущенные к работе с патогенными биологическими агентами (ПБА), прошедшие обучение на курсах профессиональной подготовки с освоением методов безопасной работы с ПБА, а также прошедшие обучение по работе на автоматическом бактериологическом анализаторе и получившие допуск к работе в порядке, установленном в лаборатории.
6.3.2 Прибор включают за 20 мин до начала загрузки исследуемых образцов.
6.3.3 Диспенсер-дозатор автоклавируют один раз в неделю.
6.3.4 Прибор должен находиться в помещении согласно ГОСТ ISO 7218.
6.3.5 Не допускается:
- смешивать суспензии разных образцов;
- замораживать реактивы;
- использовать тест-наборы с истекшим сроком годности;
- использовать поврежденные карты и кассеты.
6.3.6 Карты (тесты) на грамотрицательную микрофлору следует использовать по назначению.
6.3.7 Следует обращаться с образцами как с потенциально инфекционным материалом.
6.3.8 Прибор необходимо обслуживать согласно руководству по эксплуатации.
6.4 Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды
6.4.1 Для проведения испытаний применяют:
- автоматический бактериологический анализатор, выявляющий бактерии рода Salmonella биохимическим свойствам (все этапы автоматизированы, время исследования до 6 ч), карты для идентификации граммотрицательных бактерий, в комплект которого входит:
- диспенсер-дозатор;
- набор пробирок;
- карты для идентификации микроорганизмов;
- кассеты;
- раствор для приготовления суспензии.
Среднее время получения результатов на бактериологическом анализаторе должно быть не более 5 — 6 ч.;
- микроскопы световые по ГОСТ 28489;
- весы лабораторные класса точности II по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт, с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более +/- 0,01 г;
- термостат электрический с автоматическим терморегулятором, обеспечивающим поддержание температуры нагрева от 20 °C до 55 °C по ГОСТ ISO 7218 с диапазоном рабочих температур от 37 °C до 43 °C с допускаемой погрешностью +/- 1 °C по документу, в соответствии с которым он изготовлен;
- холодильник электрический по ГОСТ ISO 7218;
- pH-метр с точностью калибровки +/- 0,1 ед. при температуре от 20 °C до 25 °C по ГОСТ ISO 7218;
- аппарат для сухой стерилизации (стерилизационный сушильный шкаф) или влажной стерилизации (автоклав) по ГОСТ ISO 7218;
- баню водяную с терморегулятором с диапазоном измерения температур от 20 °C до 100 °C с погрешностью измерения +/- 1 °C по нормативной документации, по которой они изготовлены;
- шкаф сушильный лабораторный с диапазоном автоматически поддерживаемой температуры нагрева от 50 °C до 200 °C; погрешность стабилизации температуры в рабочей камере при установившемся режиме +/- 3 °C;
- бактериологический гомогенизатор или аппарат для измельчения тканей с частотой 8000 — 45000 об/мин;
- газовую горелку или спиртовку;
- дистиллятор-деминерализатор для воды с продолжительностью цикла регенерации не более 2,5 ч, номинальной производительностью 5 — 28 дм3/ч;
- плитку электрическую по ГОСТ 14919;
- колбы стеклянные лабораторные по ГОСТ 1770;
- стаканы по ГОСТ 25336;
- воронки стеклянные по ГОСТ 25336;
- палочки стеклянные по ГОСТ 25336;
- стекла предметные по ГОСТ 9284;
- стекла покровные по ГОСТ 6672;
- пробирки стеклянные бактериологические по ГОСТ 1770;
- пинцет медицинский по ГОСТ 21241;
- скальпель медицинский по ГОСТ 21240;
- ножницы медицинские по ГОСТ 21239;
- бактериологическую петлю диаметром приблизительно 3 мм;
- марлю медицинскую по ГОСТ 9412;
- пипетки мерные вместимостью 1 и 2 см3 по ГОСТ 29227;
- ступки фарфоровые с пестиком по ГОСТ 9147;
- песочные часы на 1, 2, 5 мин по нормативной документации изготовителя;
- флаконы вместимостью 100 — 200 см3 по ГОСТ 25336;
- чашки Петри бактериологические по ГОСТ 25336;
- бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026;
- вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
- спирт этиловый ректифицированный по документу, в соответствии с которым он изготовлен;
- масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739;
- йод по ГОСТ 4159, х. ч.;
- калий йодистый по ГОСТ 4232;
- основной фуксин для микробиологических целей по ГОСТ 7702.2.0;
- генцианвиолет по ГОСТ 7702.2.0;
- раствор Люголя по ГОСТ 10444.1;
- набор стандартов мутности МакФарланда по документу изготовителя;
- стандартный образец мутности бактериальных взвесей в комплекте ОСО 42-28-85-02П по документу изготовителя и другие аналогичные;
- питательные среды:
- среду для неселективного предварительного обогащения — забуференную пептонную воду — по ГОСТ 7702.2.0.;
- селенитовую среду по ГОСТ 7702.2.0;
- магниевую или хлористомагниевую среду по ГОСТ 7702.2.0;
- агар висмут-сульфит сухой по ГОСТ 10444.1;
- агар Эндо бактериологический сухой по ГОСТ 7702.2.0;
- агар Плоскирева бактериологический сухой по ГОСТ 7702.2.0;
- агар мясо-пептонный сухой по ГОСТ 7702.2.0.
6.4.2 Допускается применение других средств измерений аналогичного назначения с метрологическими характеристиками и аппаратуры с техническими характеристиками, а также реактивов, материалов и сред, не уступающих указанным по качеству.
6.4.3 Допускается использование одноразового оборудования и материалов вместо оборудования и материалов многократного использования (чашки Петри, пробирки, пипетки флаконы и др.), если они аналогичны по техническим характеристикам, подходят для использования в микробиологии и не содержат вещества, подавляющих рост микроорганизмов.
6.5 Подготовка к проведению анализа
Отбор проб, приготовление растворов, реактивов, красок, индикаторов, питательных сред, применяемых в микробиологических исследованиях, — по ГОСТ 7702.2.0.
6.6 Проведение анализа
6.6.1 Смывы с окружающей среды или навеску продукта не менее 25 г или смывы со всей поверхности продукта не менее 25 см3 высевают в неселективную среду — забуференную пептонную воду — в соотношении 1:9. Затем помещают в термостат и инкубируют (18 +/- 2) ч при температуре (37 +/- 1) °C — первичное обогащение посевного материала.
6.6.2 Затем берут 10 см3 посевного материала из неселективной среды, пересевают в 90 см3 в селенитовой и магниевой средах и инкубируют 18 ч при температуре (37 +/- 1) °C — вторичное обогащение посевного материала.
6.6.3 Через 18 ч из селенитовой и магниевой сред проводят пересев на чашки Петри, содержащие одну из плотных дифференциально-диагностических сред: агар висмут-сульфит, агар Плоскирева, агар Эндо. Для изолированных колоний пересев проводят бактериологической петлей с истончающим штрихом. Посевы в чашках Петри с агарами Плоскирева, Эндо термостатируют 18 ч, а с агаром висмут-сульфит — 36 ч при температуре (37 +/- 1) °C.
На висмут-сульфит агаре бактерии рода Salmonella образуют черные колонии с характерным металлическим блеском, а также зеленоватые с темно-зеленым ободком и с пигментированием среды под колониями.
На среде Эндо бактерии рода Salmonella образуют круглые бесцветные или слегка розоватые, прозрачные колонии.
На среде Плоскирева бактерии рода Salmonella образуют бесцветные прозрачные, но более плотные, чем на среде Эндо, колонии.
6.6.4 Все пересевы на плотных средах после термостатирования изучают, проводят микроскопию и отбирают отдельные колонии, которые помещают в суспензиальный раствор к анализатору по 6.4.1, хорошо перемешивают, получают бактериальную суспензию.
6.6.5 Бактериальную суспензию доводят до оптимальной плотности по шкале МакФарленда, ОСО 42-28-85-02П. Оптическая плотность для грамотрицательных микроорганизмов по шкале МакФарленда составляет 0,5 — 0,63 McF. Оптическая плотность по ОСО 42-28-85-02П составляет 0,19 — 0,38.
6.6.6 Карты идентификации для грамотрицательных бактерий распаковывают, не касаясь руками поверхности с ячейками и заправочной трубочки.
Приготовленную бактериальную суспензию в объеме 3 см3 переносят на карты идентификации. Карты переносят в пронумерованные загрузочные кассеты прибора.
6.6.7 Кассеты помещают в загрузочный барабан, и прибор проводит дальнейшие исследования образца автоматически.
6.6.8 Согласно руководству по эксплуатации прибора тестирование образца бактериальных культур на бактерии рода Salmonella проходит в автоматическом режиме.
6.6.9 Результат исследований выдается на бумажном носителе, в котором указывается вид возбудителя и его полное название, дается раскладка биохимических свойств по 64 тестам в виде таблицы, указываются дата исследования, номер экспертизы, адрес заказчика.
6.7 Оформление протокола испытания
В протоколе испытания необходимо указать метод испытания и полученные результаты. В нем должны быть также упомянуты все процедуры, не указанные в настоящем стандарте или рассматриваемые как дополнительные, а также сведения о любых случаях, вероятно повлиявших на результаты.
В протокол испытаний должна быть включена вся информация, необходимая для точной идентификации образца.