ФС.2.1.0654. Фармакопейная статья. Глибенкламид

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Глибенкламид Глибенкламид Glibenclamidum	ФС.2.1.0654
	Взамен ВФС 42-2510-95

C23H28ClN3O5S [10238-21-8]	М.м. 494,00

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Метокси-5-хлор-N-[2-(4-{[(циклогексилкарбамоил)амино]сульфонил}фенил)этил]бензамид.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% глибенкламида C23H28ClN3O5S в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте, метаноле, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глибенкламида.

Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец смачивают метанолом, растирают, высушивают при 100 — 105 °C и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл метанола, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объем раствора метанолом до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 300 нм и 275 нм с удельным показателем поглощения от 61 до 65 при длине волны 300 нм и от 27 до 32 при длине волны 275 нм.

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Спирт 96% — уксусная кислота ледяная — метиленхлорид — циклогексан 5:5:45:45.

Растворитель. Метанол — метиленхлорид 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор фармакопейного стандартного образца глибенкламида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глибенкламида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора фармакопейного стандартного образца глибенкламида (10 мкг). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции глибенкламида на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца глибенкламида.

4. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной. Раствор должен быть бесцветным и должен иметь голубую флуоресценцию в УФ-свете при длине волны 365 нм. После прибавления 0,1 г хлоралгидрата в течение 5 мин должна появиться темно-желтая окраска, через 20 мин переходящая в коричневатый оттенок.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 169 до 174 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед применением или хранят при температуре 5 °C не более 40 часов.

Буферный раствор. Растворяют 10 г триэтиламина в 80 мл воды и доводят значение pH до 3,0 фосфорной кислотой, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор — ацетонитрил — вода 20:50:930.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА — вода — ацетонитрил 20:65:915.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции (точная навеска), растворяют в 5 мл метанола, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A и 6 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца глибенкламида для идентификации пиков (содержит примесь C), растворяют в метаноле, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь A: 2-метокси-N-[2-(4-(сульфамоилфенил)этил]-5-хлорбензамид [16673-34-0].

Примесь B: метил[N-({4-[2-(2-метокси-5-хлорбензамидо)этил]фенил}сульфонил)карбамат] [21165-77-5].

Примесь C: 1-циклогексил-3-[({2-[(циклогексилкарбамоил)амино]этил}фенил)сульфонил]мочевина [10079-35-3].

Хроматографические условия

Колонка	100 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	35 °C;
Скорость потока	0,8 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 230 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 15	45	55
15 — 30	45 \rightarrow 5	55 \rightarrow 95
30 — 40	5	95

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения, раствор для идентификации пиков и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Глибенкламид — 1 (около 5 мин); примесь A — около 0,5; примесь B — около 0,6; примесь C — около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и B относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора; хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу глибенкламида для идентификации пиков (содержит примесь C) и хроматограмму раствора для идентификации пиков используют для идентификации пика примеси C.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 2,0;

Содержание примеси A в субстанции в процентах (XA) вычисляют по формуле:

X_{A} = \frac{S_{A} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 5 \cdot 10 \cdot 100}{S_{0} \cdot a \cdot 200 \cdot 20 \cdot 100} ,

где SA(B) — площадь пика примеси A на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика примеси A на хроматограмме стандартного раствора;

a — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца примеси A, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;

P — содержание примеси A в фармакопейном стандартном образце примеси A, %.

Содержание любой другой единичной примеси в субстанции в процентах (Xi) вычисляют по формуле:

X_{i} = \frac{S_{i} \cdot k_{i} \cdot 0,1}{S_{0}} ,

где Si — площадь примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика глибенкламида на хроматограмме раствора сравнения;

ki — поправочный коэффициент (1,8 при расчете примеси C, в остальных случаях принимают равным 1).

Суммарное содержание примесей в субстанции в процентах (X_{\Sigma}) вычисляют по формуле:

X_{\Sigma} = X_{A} + \Sigma X_{i,} ,

Допустимое содержание примесей:

• примесь A — не более 0,3%;
• примесь C — не более 0,15%;
• любая другая примесь — не более 0,1%;
• сумма всех примесей — не более 0,8%.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 400 мг (точная навеска) субстанции при нагревании в 100 мл спирта 96% и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (1 мл фенолфталеина раствора 1%) до перехода окраски в розовую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 49,40 мг глибенкламида C23H28ClN3O5S.

ХРАНЕНИЕ

Не требует особых условий.

---