ФС.2.1.0651. Фармакопейная статья. Гидроксикарбамид

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Гидроксикарбамид Гидроксикарбамид Hydroxycarbamidum	ФС.2.1.0651
	Вводится впервые

CH4N2O2 [127-07-1]	М.м. 76,05

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гидроксимочевина.

Содержит не менее 97,5% и не более 102,0% гидроксикарбамида CH4N2O2 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в воде, в диметилформамиде, умеренно или мало растворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальном объеме спирта 96%, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксикарбамида (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси

1. Мочевина. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Пиридин — вода — этилацетат 2:2:10.

Испытуемый раствор. Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции в 1,0 мл воды.

Стандартный раствор мочевины. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) мочевины, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг субстанции и 5 мг мочевины, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), стандартного раствора мочевины (2,5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (2,5 мкг). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 — 105 °C в течение 2 — 3 мин. Теплую пластинку опрыскивают диметиламинобензальдегида раствором 1% в 1 М растворе хлористоводородной кислоты и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделенные зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции мочевины по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции мочевины на хроматограмме раствора стандартного образца мочевины (не более 0,5%).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Метанол — вода 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г гидроксиламина гидрохлорид и 5 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	0,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 214 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика гидроксикарбамида.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гидроксиламина и гидроксикарбамида должно быть не менее 1,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,02%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,005% (4% раствор субстанции, ОФС «Хлориды»).

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания субстанции с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси») и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца гидроксикарбамида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гидроксикарбамида и испытуемый раствор.

Содержание гидроксикарбамида CH4N2O2 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 10 \cdot 50 \cdot 5 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 5 \cdot 10 \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксикарбамида;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание гидроксикарбамида в фармакопейном стандартном образце гидроксикарбамида, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.

---