Библиотека
Скачать PDF

ФС.2.1.0442. Фармакопейная статья. Левосимендан

Министерство здравоохранения Российской Федерации · № ФС.2.1.0442Действующий акт

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

Примечание

Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Левосимендан
Левосимендан
Levosimendanum		ФС.2.1.0442
Вводится впервые

рис. 1

C14H12N6O
[141505-33-1]		 М.м. 280,28

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

N-{4-[(4R)-4-Метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}карбоногидразоноилдицианид.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% левосимендана C14H12N6O в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. От желтого или желтого с зеленоватым, или желтого с оранжевым оттенком цвета до темно-желтого с коричневатым оттенком цвета аморфный порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левосимендана.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в этаноле и доводят объем раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл и доводят объем раствора этанолом до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 450 нм должен иметь максимумы при 383 нм и 289 нм, и минимум при 318 нм.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -596 до -632 в пересчете на сухое вещество (0,1% раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,05 г субстанции в 20 мл этанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 600 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,3 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,0 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,10, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол — ПФА 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл диметилсульфоксида, прибавляют 10 мл этанола и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1: (2Z)-({4-[(4R)-4-метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}гидразинилиден)-2-цианоацетамид [274263-65-9].

Примесь 2: этил[(2Z)-({4-[(4R)-4-Метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}гидразинилиден)-2-цианоацетат] [58782509].

Хроматографические условия

Колонка 150 x 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки 25 °C;
Скорость потока 1,0 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 380 нм;
Объем пробы 30 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин ПФА, % ПФБ, %
0 — 5 80 \rightarrow 70 20 \rightarrow 30
5 — 15 70 30
15 — 30 70 \rightarrow 10 30 \rightarrow 90

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левосимендан — 1 (около 14 мин); примесь 1 — около 0,4; примесь 2 — около 1,1.

<*> Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левосимендана должно быть не менее 10.

<*> Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

На хроматограмме раствора сравнения:

  • фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,0;
  • относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 5,0% (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

  • площадь пика каждой из примесей 1 и 2 не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
  • площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
  • сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 2,3 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,50, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол — буферный раствор 75:925.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл диметилсульфоксида и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг симендана, прибавляют 10 мл диметилсульфоксида и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 20 мг фармакопейного стандартного образца левосимендана, прибавляют 10 мл диметилсульфоксида и доводят объем раствора метанолом до метки.

Примечание

Декстросимендан: N-{4-[(4S)-4-метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}карбоногидразоноилдицианид [144238-75-5].

Хроматографические условия

Колонка 150 x 4,6 мм, силикагель модифицированный овомукоидом для хиральной хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки 25 °C;
Скорость потока 0,8 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 380 нм;
Объем пробы 5 мкл;
Время хроматографирования 20 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левосимендан — 1 (около 10 мин); декстросимендан — около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками левосимендана и декстросимендана должно быть не менее 1,25.

На хроматограмме раствора сравнения:

  • отношение сигнал/шум (S/N) для пика левосимендана должно быть не менее 20;
  • фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,5;
  • относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 5,0% (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика декстросимендана не должна превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС «Тяжелые металлы», метод 3Б).

Бактериальные эндотоксины. Не более 16 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции концентрацией 1 мг левосимендана в 1 мл этилового спирта 96%, нагревают не выше 70 °C и перемешивают до полного растворения субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ — ПФА 400:600.

Растворитель. Диметилсульфоксид — этанол 10:10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца левосимендана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левосимендана, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Объем пробы 20 мкл;
Время хроматографирования 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца левосимендана и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левосимендана:

  • фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,0;
  • относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание левосимендана C14H12N6O в субстанции в процентах в пересчете на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 2 \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 2 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика левосимендана на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора стандартного образца левосимендана;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца левосимендана, мг;

W — потеря в массе при высушивании, %;

P — содержание левосимендана в фармакопейном стандартном образце левосимендана, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.