ФС.2.1.0438. Фармакопейная статья. Клоназепам
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Клоназепам Клоназепам Clonazepamum | ФС.2.1.0438 |
| Вводится впервые |
| C15H10ClN3O3 [1622-61-3] |
М.м. 315,71 |
|---|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
7-Нитро-5-(2-хлорфенил)-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.
Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% клоназепама C15H10ClN3O3 в пересчете на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.
Растворимость. Мало растворим в спирте 96% и метаноле, практически нерастворим в воде.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клоназепама.
ИСПЫТАНИЯ
Температура плавления. От 237 до 241 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).
Прозрачность раствора. Раствор 0,3 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным. При возникновении голубого окрашивания раствор оставляют на 2 ч; раствор должен обесцветиться. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH. От 4,5 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3). К 0,5 г субстанции прибавляют 50 мл воды, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют через бумажный фильтр с размером пор 12 — 15 мкм.
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.
Буферный раствор. Растворяют 6,6 г аммония фосфата в 900 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведенной 10% или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран — метанол — буферный раствор 100:420:480.
Растворитель. Тетрагидрофуран — метанол — вода 100:420:480.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B клоназепама, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клоназепама, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора растворителем до метки.
Примесь A: (2-амино-5-нитрофенил)(2-хлорфенил)метанон [2011-66-7].
Примесь B: 3-амино-6-нитро-4-(2-хлорфенил)хинолин-2(1H)-он [55198-89-5].
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси B, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Клоназепам — 1 (около 7 мин); примесь B — около 2,1; примесь A — около 2,4.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и B используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 1,5.
На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика клоназепама должно быть не менее 10.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
- примесь B — не более 0,1%.
Содержание примеси B в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 1 \cdot 10 \cdot 20}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 1 \cdot 100 \cdot 100} ,
где S1 — площадь пика примеси B на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика примеси B на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B;
a0 — навеска стандартного образца примеси B клоназепама, мг;
P — содержание примеси B в стандартном образце примеси B клоназепама, %.
Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).
Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,275 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,57 мг клоназепама C15H10ClN3O3.
ХРАНЕНИЕ
В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.