ФС.2.1.0330. Фармакопейная статья. Этравирин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Этравирин Этравирин Etravirinum	ФС
	Вводится впервые

C20H15BrN6O [269055-15-4]	М.м. 435,28

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-{[6-Амино-5-бром-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% этравирина C20H15BrN6O в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и N,N-диметилформамиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этравирина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика этравирина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца этравирина (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,08 г (точная навеска) ацетата аммония, растворяют в 900 мл воды, доводят значение pH раствора до 6,0 уксусной кислотой, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол — ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции этравирина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца этравирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси 5 этравирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 5 этравирина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, прибавляют 1,5 мл раствора стандартного образца примеси 5 этравирина и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца этравирина и доводят объем раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь 1: 4-{[6-амино-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил [939431-68-2].

Примесь 2: 4-{[6-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил [1070377-34-2].

Примесь 3: 4-{[5-бром-6-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил [269055-76-7].

Примесь 4: 4-{[6-амино-5-бром-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензамид [1706943-59-0].

Примесь 5: 4-{[6-амино-5-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил [269055-19-8].

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Детектор	спектрофотометрический, 303 нм;
Скорость потока	0,8 мл/мин;
Температура колонки	40 °C;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 30	40 \rightarrow 10	60 \rightarrow 90
30 — 40	10	90
40 — 45	10 \rightarrow 40	90 \rightarrow 60
45 — 50	40	60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца этравирина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этравирин — 1 (около 12,8 мин); примесь 4 — около 0,39; примесь 1 — около 0,6; примесь 5 — около 0,93; примесь 2 — около 1,4; примесь 3 — около 1,73.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей используют относительное время удерживания примесей, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму раствора стандартного образца этравирина.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком примеси 5 и пиком этравирина должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (p/v) для пика этравирина должно быть не менее 15.

На хроматограмме раствора стандартного образца этравирина:

• фактор асимметрии пика (As) этравирина должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика этравирина должно быть не более 10% (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площадь пика примеси 3 умножают на 1,25.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 100 \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 100} ,

где S1 — площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика этравирина на хроматограмме раствора стандартного образца этравирина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца этравирина, мг;

P — содержание этравирина в фармакопейном стандартном образце этравирина, %.

Допустимое содержание примесей:

• примеси 1, 2, 3, 4 и 5 — не более 0,15% каждая;
• любая другая примесь — не более 0,10%;
• сумма всех примесей — не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца этравирина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 25	40 \rightarrow 10	60 \rightarrow 90
25 — 30	10 \rightarrow 40	90 \rightarrow 60
30 — 35	40	60

Хроматографируют раствор стандартного образца этравирина и испытуемый раствор.

Содержание этравирина C20H15BrN6O в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot 50 \cdot 50 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 50 \cdot 5 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика этравирина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика этравирина на хроматограмме раствора стандартного образца этравирина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца этравирина, мг;

P — содержание этравирина в фармакопейном стандартном образце этравирина, %;

W — потеря в массе при высушивании субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

---