ФС.2.1.0315. Фармакопейная статья. Цефазолин натрия. Цефазолин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Цефазолин натрия Цефазолин Cefazolinum natricum	ФС
	Вводится впервые

C14H13N8NaO4S3 [27164-46-1]	М.м. 476,49

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(6R,7R)-3-{[(5-Метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)сульфанил]метил}-8-оксо-7-[2-(1H-тетразол-1-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Содержит не менее 95,0% и не более 102,0% цефазолина натрия C14H13N8NaO4S3 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Полусинтетический антибиотик, производное продукта ферментации.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

<*> Очень гигроскопичен. Обладает полиморфизмом.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефазолина.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,15 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 12% и выдерживают на ледяной бане в течение 10 мин. Полученный раствор фильтруют и промывают осадок 2 мл воды. Осадок растворяют в смеси вода — ацетон 1:9, выпаривают на водяной бане почти досуха и сушат в сушильном шкафу при температуре 60 °C в течение 30 мин.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -15 до -24 в пересчете на безводное вещество (5% раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Удельный показатель поглощения. От 260 до 300 в пересчете на безводное вещество при длине волны 272 нм (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора натрия гидрокарбоната раствором 4,2%.

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны 430 нм, не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Около 14,54 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и около 3,53 г калия дигидрофосфата помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 10 мл натрия гидроксида растворе 0,05 М и выдерживают в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь L: (6R,7S)-3-{[(5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)сульфанил]метил}-8-оксо-7-[2-(1H-тетразол-1-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка	125 x 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	45 °C;
Скорость потока	1,2 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	5 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 2	98	2
2 — 4	98 \rightarrow 85	2 \rightarrow 15
4 — 10	85 \rightarrow 60	15 \rightarrow 40
10 — 11,5	60 \rightarrow 35	40 \rightarrow 65
11,5 — 12	35	65
12 — 15	35 \rightarrow 98	65 \rightarrow 2
15 — 21	98	2

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цефазолин — 1 (около 6,5 мин), примесь L — около 1,05.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика цефазолина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

• разрешение (RS) между пиками цефазолина и примеси L должно быть не менее 2,0;
• фактор асимметрии пика (AS) цефазолина должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);
• суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать 3,5-кратную площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика цефазолина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 6,0% (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002%. (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 40 мг цефазолина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения — 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг цефазолина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,77 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 1,86 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — раствор А 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца цефазолина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефазолина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 5 мг фармакопейного стандартного образца цефуроксима натрия, растворяют в 10 мл раствора стандартного образца цефазолина и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 270 нм;
Объем пробы	20 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца цефазолина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками цефазолина и цефуроксима должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца цефазолина натрия:

• фактор асимметрии пика (AS) цефазолина должен быть не менее 0,8 и не более 3,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика цефазолина должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание цефазолина натрия C14H13N8NaO4S3 в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 100 \cdot 476,5}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W) \cdot 454,5} ,

где S1 — площадь пика цефазолина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора стандартного образца цефазолина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца цефазолина, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание цефазолина в фармакопейном стандартном образце цефазолина, %;

476,5 — молекулярная масса цефазолина натрия;

454,5 — молекулярная масса цефазолина.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищенном от света месте.

---