ФС.2.1.0175. Фармакопейная статья. Рутозид тригидрат. Рутозид

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ФС.2.1.0175.18"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/fs-2-1-0175-18" "ФС.2.1.0175.18. Фармакопейная статья. Рутозид. Рутозида тригидрат (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n1["ФС.2.1.0175"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0175" "ФС.2.1.0175. Фармакопейная статья. Рутозид тригидрат. Рутозид (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3-{[6-O-(6-дезокси- \alpha -L-маннопиранозил)- \beta -D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)-5,7-Дигидрокси-4H-1-бензопиран-4-он тригидрат.

СВОЙСТВА

Содержит не менее 95,0% и не более 101,0% рутозида C27H30O16 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Желтый или зеленовато-желтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно или мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

<*> Растворяется в растворах гидроксидов щелочных металлов.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области спектрального диапазона от 210 до 450 нм должен иметь максимумы при 257 нм и 358 нм. Удельное поглощение при максимуме поглощения при 358 нм должно быть от 305 до 330 нм (безводное вещество).

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле, доводят этим же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рутозида тригидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, растворяют в метаноле, доводят этим же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Бутанол — уксусная кислота безводная — вода — метилэтилкетон — этилацетат 5:10:10:30:50.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (25 мкг) и раствора стандартного образца рутозида тригидрата (25 мкг).

Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в (предварительно насыщенную, в течение 1 ч) камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают смесью 2,5 мл железа (III) хлорида раствора 10% и 7,5 мл раствора калия феррицианида и просматривают в течение 10 мин в видимом свете.

Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и окраске должна соответствовать зоне адсорбции рутозида тригидрата на хроматограмме раствора стандартного образца рутозида тригидрата.

4. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл спирта 96%, прибавляют 1 г цинка и 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 25%. Раствор должен окраситься в красный цвет.

ИСПЫТАНИЯ

Вещества нерастворимые в метаноле. Не более 3,0%.

Испытуемый раствор. Встряхивают 2,5 г субстанции в 50 мл метанола при температуре 20 — 25 °C в течение 15 мин. Раствор фильтруют при пониженном давлении через фильтр из пористого стекла с диаметром пор 1,6 мкм, предварительно высушенный в течение 15 мин при температуре 100 — 105 °C, охлажденный в эксикаторе и взвешенный. Фильтр промывают тремя порциями метанола по 20 мл, сушат при температуре 100 — 105 °C в течение 30 мин, охлаждают и взвешивают. Масса вещества на фильтре не должна превышать 75 мг.

Светопоглощающие примеси. Спектр поглощения полученного раствора в диапазоне длин волн от 450 до 800 нм в кювете с толщиной слоя 1 см не должен превышать 0,10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 40 мл 2-пропанола, перемешивают в течение 15 мин, доводят объем раствора до метки и фильтруют. В качестве раствора сравнения используют 2-пропанол.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химическом стакане вместимостью 1000 мл помещают 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 900 мл воды, доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран — буферный раствор 5:95.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран — буферный раствор 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл метанола и доводят объем раствора ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца рутозида тригидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, растворяют в 2 мл метанола и доводят объем раствора ПФБ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора ПФБ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл раствора сравнения, доводят объем раствора ПФБ до метки и перемешивают. Концентрация раствора составляет 0,1% от концентрации испытуемого раствора.

Примечание

Примесь A: 5,7-дигидрокси-3-( \beta -D-глюкофуранозилокси)-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он (изокверцитрозид). [21637-25-2].

Примесь B: 5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-{[6-O-(6-дезокси- \alpha -L-маннопиранозил)- \beta -D-глюкопиранозил]окси}-4H-1-бензопиран-4-он. [17650-84-9].

Примесь C: 3,5,7-тригидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он (кверцетин). [117-39-5].

Хроматографические условия

Режим хроматографирования

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца рутозида тригидрата, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рутозид — 1 (около 7 мин); примесь B — около 1,1; примесь A — около 1,2; примесь C — около 2,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рутозида тригидрата разрешение (R) между пиками рутозида и примеси B должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси A — 0,8; примеси B — 1,0; примеси C — 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь каждого из пиков примесей A, B и C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%);
• суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1%).

Содержание любой единичной примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot K \cdot 1 \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 10 \cdot 50 \cdot 100} ,

где S1 — среднее значение площади пика любой единичной примеси на хроматограммах испытуемого раствора;

S0 — среднее значение площади пика рутозида на хроматограммах раствора сравнения;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, мг;

P — содержание рутозида тригидрата в стандартном образце рутозида тригидрата, %;

K — поправочный коэффициент для единичной примеси.

Суммарное содержание примесей в субстанции вычисляют арифметическим сложением найденного содержания каждой единичной примеси.

Вода. От 7,5% до 9,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,10% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 30,53 мг рутозида C27H30O16.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.