ФС.2.1.0037. Фармакопейная статья. Стрептомицина сульфат. Стрептомицин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ФС.2.1.0037.15"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xiii-minzdrav-rossii-ministerstvo-334" "ФС.2.1.0037.15. Фармакопейная статья'Стрептомицина сульфат. ФС.2.1.0037.15'"
  n1["ФС.2.1.0037"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-1-0037" "ФС.2.1.0037. Фармакопейная статья. Стрептомицина сульфат. Стрептомицин (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

N,N'-Бис(аминоиминометил)-[O-2-дезокси-2-(метиламино)- \alpha -L-глюкопиранозил-(1 \rightarrow 2)-O-5-дезокси-3-C-формил- \alpha -L-ликсофуранозил-(1 \rightarrow 4)-D-стрептамина сульфат (2:3).

Стрептомицин образуется несколькими штаммами Streptomyces griseus. 1 мкг химически чистого стрептомицина основания соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

Содержит не менее 730 мкг/мг активного вещества в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

<> Гигроскопичен.*

<> Приводится для информации.*

Растворимость. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка с 0,75 мм слоем следующего состава: смешивают 0,3 г карбомера с 240 мл воды, выдерживают при умеренном встряхивании в течение 1 ч и доводят pH раствора натрия гидроксида раствором 8,5% до 7, прибавляют 30 г силикагеля H.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 110 °C в течение 1 ч и охлаждают. Подготовку пластинки проводят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Реактив для детектирования. 1,3-дигидроксинафталина в растворе серной кислоты. Смешивают равные объемы 1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2% и серной кислоты раствора 50%.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл раствора сравнения и 10 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при температуре 150 °C в течение 5 — 10 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 3 разделенные зоны адсорбции.

Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата на хроматограмме раствора сравнения.

2. Качественная реакция. Растворяют 8 мг субстанции в 4 мл воды и прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 4 мин. Полученный раствор нейтрализуют хлористоводородной кислоты раствором 2 М и прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 1%. Должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл \alpha - \text{нафтола} раствора 0,1% и 2 мл смеси равных объемов натрия гипохлорита раствора концентрированного и воды; должно появиться красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды и прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Прибавляют 2 мл \alpha - \text{нафтола} раствора 0,5% в натрия гидроксида растворе 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 1 мин. Должно появиться светло-желтое окрашивание.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельный показатель поглощения. Величина оптической плотности испытуемого раствора должна составлять не менее 90,0% от величины оптической плотности раствора стандартного образца (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Субстанцию сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °C и остаточном давлении, не превышающем 0,7 кПа (5 мм рт. ст.), в течение 3 ч. В мерную колбу объемом 100 мл помещают 0,1 г высушенной субстанции растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца. В мерную колбу объемом 100 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, высушенного, как указано для испытуемого раствора, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. К 5 мл воды прибавляют 5 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин. Затем колбу помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл 1,5% раствора железа(III) хлорида в 0,5 М растворе серной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

Железа(III) хлорида раствор 1,5% в серной кислоты растворе 0,5 М

В мерную колбу объемом 1000 мл помещают 15 г железа(III) хлорида, растворяют в 250 мл серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объем раствора водой до метки.

В мерные колбы вместимостью по 25 мл помещают по 5,0 мл испытуемого и стандартного растворов. В каждую колбу прибавляют по 5,0 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин. Затем колбы помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл железа(III) хлорида раствор 1,5% в серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объемы растворов водой до метки. Через 20 мин измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в кювете с толщиной слоя 10 мм в максимуме поглощения при 525 нм относительно раствора сравнения.

Прозрачность раствора. Опалесценция 25% раствора субстанции в воде после выдерживания его в защищенном от света месте при температуре 20 °C в течение 24 ч не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II. (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 4,5 до 7,0 (25% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Стрептомицин B. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная — метанол — толуол 1:1:2.

Испытуемый раствор. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют, при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная — метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, собирая смывы в колбу с раствором, и доводят объем полученного раствора метанолом до 20 мл.

Раствор сравнения. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают 36 мг (точная навеска) D-маннозы, растворяют при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная — метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, переносят количественно полученный раствор в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора метанолом до метки. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора метанолом до метки.

Полученный раствор содержит эквивалент 0,03% раствора стрептомицина B (1 мг D-маннозы соответствует 4,13 мг стрептомицина B).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают по 1 мл испытуемого и стандартного растворов.

Реактив для детектирования: Смешивают равные объемы 1,3-дигидроксинафталина в спирте 96% раствор 0,2% и серной кислоты раствор 20%. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл стандартного раствора и 10 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в (предварительно насыщенную парами растворителей в течение не менее 12 ч) камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при температуре 110 °C в течение 5 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделенные зоны адсорбции.

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции стрептомицина B по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции, полученную на хроматограмме раствора сравнения (не более 3%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,0%. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакуумном сушильном шкафу при температуре 60 +/- 1 °C и остаточном давлении, не превышающем 0,1 кПа в течение 24 ч.

Метанол. Не более 0,3% (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,0 мг метанола и доводят объем раствора до метки.

Хроматографические условия

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика, соответствующего метанолу не должна превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения.

Сульфатная зола. Не более 1,0% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. От 18,0 до 21,5% в пересчете на сухое вещество (ОФС «Сульфаты»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. Доводят pH полученного раствора до 11 (потенциометрически) аммиака раствором концентрированным 25%. К полученному раствору прибавляют 10 мл бария хлорида раствора 0,1 М и около 0,5 мг индикатора фталеинового пурпурного. Избыток бария хлорида раствора 0,1 М титруют натрия эдетата раствором 0,1 М до начала изменения окраски, прибавляют 50 мл спирта 96% и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-голубого окрашивания раствора.

1 мл бария хлорида раствора 0,1 М соответствует 9,606 мг сульфат-ионов.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

<**> Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза: 1,3 мг стрептомицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

<**> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг стрептомицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

<**> Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

<**> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Проводят определение в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.