МУК 4.1.0.416-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций витамина B1 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в воздухе рабочей зоны. Методические указания

(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ВИТАМИНА B1 МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (ВЭЖХ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.0.416-96

Дата введения: с момента утверждения

1. Разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Утверждены Председателем Госкомсанэпиднадзора России (Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 8 июня 1996 г.).

3. Разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам контроля измерения концентраций вредных веществ», ГОСТ Р 1.5-92, п. 7.3, ГОСТ 8.010-90 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений».

4. Одобрены комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Госкомсанэпиднадзора России и Проблемной комиссией «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

5. Предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также заинтересованных министерств и ведомств.

6. Введены впервые.

Ответственный исполнитель: Г.А. Дьякова.

Исполнители: Г.А. Дьякова, Л.Г. Макеева, Е.М. Малинина, С.М. Попова, Е.Н. Грицун, Т.В. Рязанцева, Г.Ф. Громова.

Структурная формула (не приводится).

М. м. 426,17.

Витамин В (тиамина бромид) — (4-метил-5-бета-оксиэтил-N- 1

*(2-метил-4-амино-5-метилпиримидил)-тиазолий  бромид гидробромид) -*
*кристаллическое  вещество  белого  цвета  со  слабым специфическим*
*запахом. Хорошо  растворим  в  воде, метиловом и этиловом спиртах.*
*Трудно  растворим  в  ацетоне.  Не  растворим  в  эфире,  бензоле,*
*хлороформе. Т    - 210 - 215 °С.*

         *пл.*

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает специфическим аллергенным действием.

ПДК в воздухе 0,1 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения витамина В в хроматографируемом 1

                                  1

(при отборе 600 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций витамина В в воздухе — от 1 0,05 до 1 мг/куб. м.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, — около 40 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф «Милихром-2» или другие модели с УФ-детектором

Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом «Силасорб SPH C » с размером 18 зерен 9 мкм, (ЧСФР)

Электроаспиратор ЭА-1                            ОСТ 95.10052-84
Микроскоп отсчетный типа ПМБ-2                   ТУ 3-3.824-78

Фильтродержатель, снабженный металлической сеткой

Стеклянная ректификационная колонна ТУ 25-1173.131-85

20 мм, флегмовое число 5 (или другая такого же типа). Насадка — спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм)

Колбы мерные вместимостью 100 мл ГОСТ 1770-74

Пипетки вместимостью 1 и 10 мл ГОСТ 20292-74

Пробирки с пришлифованными пробками ГОСТ 10515-75 вместимостью 10 мл

Реактивы, растворы, материалы

Витамин В фармакопейный, 99% чистоты 1

Калий марганцовокислый (калий перманганат) ТУ 20490-75

Ацетонитрил очищенный ТУ 6-09-3534-82

Ацетонитрил очищенный получают из ацетонитрила, ч., путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта № 4.

и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка — спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм)

Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °С Элюент: ацетонитрил — вода (4:1)

Основной стандартный раствор с концентрацией витамина В 200 1 мкг/мл готовят растворением 0,02 г вещества в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели. Фильтры АФА-ВП-10 ТУ 85-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 30 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 600 л воздуха.

Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления. Градуировочные растворы готовят согласно таблице.

Таблица

Инжектируют в хроматограф по 30 мкл каждого из градуировочных растворов (от 0,3 до 6 мкг витамина В ). 1

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

скорость подачи элюента 300 мкл/мин.; (ацетонитрил — вода, 5:1)

    длина волны УФ-детектора                         242 нм;
    скорость движения диаграммной ленты              3 мм/мин.;

    диапазон измерения самопишущего потенциометра    100 мВ;
    объем вводимой пробы                             30 мкл;
    время удерживания витамина В                     9 мин.;

                            1

эффективность колонки по витамину В 900 тт. 1

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят

градуировочный  график,  выражающий зависимость площади пиков (кв.

мм)  от  содержания  витамина В  в хроматографируемом объеме пробы

                           1

(мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Оба фильтра с отобранными пробами помещают в общую пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 3 мл воды и оставляют на 15 мин. при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра — 96,5%.

Инжектируют в хроматограф 30 мкл полученного раствора.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях и по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания витамина В в 1 хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концетрацию витамина В (С) в воздухе (мг/куб. м) вычисляют по 1 формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:
а  - содержание витамина В  в хроматографируемом объеме пробы,
                          1

найденное по градуировочному графику, мкг; б — объем пробы, взятой на хроматографирование, мл; в — общий объем анализируемого раствора, мл; V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Методические указания разработаны НИО «Экотокс», г. Москва.

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                          V  + (273 + 20) х Р
                    V   = -------------------,

                 20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -   барометрическое   давление,   кПа  (101,33  кПа  =  760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

Приложение 2

КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА

Приложение 3

Рис. 1. Ловушка-концентратор. Общий вид.

Рисунок не приводится.

Рис. 2. Ловушка-концентратор.

Рисунок не приводится.

Название вещества Методические указания

1. Аммоний винно-кислый Методические указания на кислый фотометрическое определение аммиака: Сб. МУ, в. 1 — 5. М., 1981. 58 с. К = 9,82

Аммоний винно-кислый Методические указания на фотометрическое определение аммиака: Сб. МУ, в. 1 — 5. М., 1981. 58 с. К = 5,41

2. Калий винно-кислый Методические указания по измерению

Калий винно-кислый кислый концентраций сульфата калия, калийной магнезии и хлорида калия в воздухе рабочей зоны: Сб. МУ, в. 22. М., 1988. 182 с. К = 2,9 и 4,82

3. Калий сурьмоксид Методические указания по винно-кислый полярографическому измерению концентраций сурьмы в воздухе рабочей зоны: Сб. МУ, в. 8. М.,

                          1983. 90 с. К = 2,66

4. Натрий винно-кислый Методические указания по измерению кислый концентраций натрия сульфата в воздухе рабочей зоны методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии: Сб. МУ, в. 21. М., 1986. 135 с. К = 7,48

Натрий винно-кислый Методические указания по измерению концентраций натрия сульфата в воздухе рабочей зоны методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии: Сб. МУ, в. 21. М., 1986. 135 с. К = 4.22

Калий-натрий винно-кислый Методические указания по измерению концентраций натрия сульфата в воздухе рабочей зоны методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии: Сб. МУ, в. 21. М., 1986. 135 с. К = 3,39

5. Полиметилмочевина Методические указания по гравиметрическому определению пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок: Сб. МУ, в. 1 — 5. М., 1981. 235 с.

6. Трифторметансульфофторид Методические указания на

(фторангидрид трифторметан    фотометрическое определение
сульфокислоты)                фторорганических соединений: Сб. МУ,

                          в. 1 - 5. М. 1981. 187 с. К = 2

7. Хлоргидрат Методические указания на изонипекотиновой кислоты фотометрическое определение диэтиламина в воздухе: Сб. МУ, в. 1 — 5. М., 1981. 123 с. Отбор проб на фильтр со скоростью 2 л/мин.