ГОСТ 13979.9-69*. Государственный стандарт Союза ССР. Жмыхи и шроты. Методика выполнения измерений активности уреазы

(введен Постановлением Госстандарта СССР от 17.02.1969 № 204)

(ред. от 01.04.1995)

от 17 февраля 1969 г. № 204

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ЖМЫХИ И ШРОТЫ

МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ АКТИВНОСТИ УРЕАЗЫ

Oilcakes and oilmeals. Measurement of urease activity

Постановлением Комитета стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР от 17 февраля 1969 г. № 204 срок введения установлен

Переиздание (июнь 1997 г.) с Изменениями № 1, 2, 3, утвержденными в марте 1983 г., июне 1987 г., апреле 1995 г. (ИУС 7-83, 10-87, 6-95).

1. Настоящий стандарт распространяется на жмыхи и шроты, получаемые при переработке соевых семян, и устанавливает методику выполнения потенциометрического измерения активности уреазы в интервале значений 0,01 — 3,00 pH.

Сущность метода заключается в изменении pH фосфатного буферного раствора, который образуется в результате воздействия уреазы на содержащуюся в растворе мочевину.

(Измененная редакция, Изм. № 1, 2, 3).

2. Отбор проб — по ГОСТ 13979.0-86.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

2а, 3, 4, 5, 6, 7. (Исключены, Изм. № 2).

8. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ПОТЕНЦИОМЕТРИЧЕСКОГО ИЗМЕРЕНИЯ АКТИВНОСТИ УРЕАЗЫ

8а. Для проведения испытания должны применяться следующие аппаратура, материалы и реактивы:

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88 класса точности 2 с наибольшим пределом взвешивания 200 г или другие весы с таким же классом точности;

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88 класса точности 3 с наибольшим пределом взвешивания 500 г или другие весы с таким же классом точности;

pH-метр или аналогичный прибор, позволяющий измерять pH в пределах от 0 до 14 единиц pH, с разрешающей способностью не менее 0,01 единиц pH;

электрокофемолка бытовая по ГОСТ 19423-81 или аналогичное измельчающее устройство;

баня водяная с терморегулятором или другое термостатирующее устройство, позволяющее поддерживать температуру (30 +/- 2) °C;

электроплитка бытовая по ГОСТ 14919-83;

термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 28498-90, позволяющий измерять температуру в диапазоне 0 — 50 °C, с ценой деления 1 — 2 °C;

колба мерная 1-100-2 по ГОСТ 1770-74;

стаканы В-1-100 или В-1-150 ТС по ГОСТ 25336-82;

колбы конические Кн-2-500(1000)-34 ТХС или колбы плоскодонные К-2-500(1000)-34 ТХС по ГОСТ 25336-82;

цилиндр 1-50, 3-50 по ГОСТ 1770-74;

сито с отверстиями 0,25 мм из набора лабораторных сит;

мочевина по ГОСТ 6691-77;

известь натронная;

раствор фосфатный буферный образцовый с pH около 7 по ГОСТ 8.135-74;

калий фосфорнокислый однозамещенный (KH_{2}PO_{4}) по ГОСТ 4198-75 или натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный (NaH_{2}PO_{4} \cdot 2H_{2}O) по ГОСТ 245-76;

калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный (K_{2}HPO_{4} \cdot 3H_{2}O) по ГОСТ 2493-75 или натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный (Na_{2}HPO_{4}) по ГОСТ 11773-76, или натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный (Na_{2}HPO_{4} \cdot 12H_{2}O) по ГОСТ 4172-76;

вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72, не содержащая углекислого газа.

Допускается применение другой аппаратуры и реактивов, по качеству и метрологическим характеристикам не уступающих перечисленным выше.

(Измененная редакция, Изм. № 1, 2, 3).

9. ПОДГОТОВКА К ИЗМЕРЕНИЯМ

9а. Обработка дистиллированной воды

Дистиллированную воду кипятят на электроплитке в течение 15 мин для удаления углекислого газа и охлаждают в колбе, закрывающейся пробкой, снабженной трубкой с натронной известью.

(Введен дополнительно, Изм. № 1).

9б. Приготовление буферных растворов

При отсутствии стандарт-титров буферный раствор готовят следующим образом.

На весах класса точности 2 с записью результата до третьего знака взвешивают две пробы однозамещенной и двузамещенной солей калия или натрия в количествах, соответствующих приведенным в табл. 2, растворяют в дистиллированной воде, подготовленной по п. 9а, в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доводят объем раствора до 1000 см3.

---

<*> Табл. 1 исключена.

Масса однозамещенной соли, г		Масса двузамещенной соли, г
KH_{2}PO_{4}	NaH_{2}PO_{4} \cdot 2H_{2}O	NaHPO_{4} безводный	K_{2}HPO_{4} \cdot 3H_{2}O	Na_{2}HPO_{4} \cdot 12H_{2}O
3,4	-	3,5	-	-
3,4	-	-	5,7	-
3,4	-	-	-	8,95
-	3,9	3,5	-	-
-	3,9	-	5,7	-
-	3,9	-	-	8,95

Полученный буферный раствор А хранят в темном месте не более 1 мес.

Для приготовления буферного раствора Б с мочевиной растворяют мочевину в растворе А в колбе вместимостью 500 или 1000 см3 из расчета 1,5 г мочевины на 50 см3 раствора А.

Раствор Б хранят в темном месте не более 10 дней.

9в. Подготовка образца

Из средней пробы методом диагонального деления отбирают пробу для анализа массой около 10 г.

Пробу измельчают до прохода не менее 60% ее через сито с отверстиями диаметром 0,25 мм. Просеянный материал вновь смешивают с остатком на сите и используют для взятия пробы.

При масличности продукта более 2% после измельчения его обезжиривают в соответствии с ГОСТ 13979.2-94.

Допускается использовать содержимое патронов, оставшееся после определения масличности жмыхов и шротов, по ГОСТ 13979.2-94.

9б, 9в. (Измененная редакция, Изм. № 1, 3).

10. ПРОВЕДЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ

На весах классов точности 2 или 3 с записью результата до второго знака берут три пробы измельченного материала массой (1 +/- 0,01) г и помещают в стеклянные стаканы вместимостью 100 и 150 см3.

В один стакан приливают 50 см3 раствора А и помещают его в водяную баню с температурой (30 +/- 2) °C.

Во второй и третий стаканы с интервалом в 5 мин приливают по 50 см3 раствора Б и помещают их немедленно после приливания раствора в ту же водяную баню.

Время термостатирования — 30 мин, при этом следует каждые 5 мин перемешивать содержимое стаканов стеклянной палочкой, заканчивая перемешивания за 5 мин до конца нагрева. По истечении 30 мин выдержки жидкость над осадком из каждого стакана декантируют в стаканчики прибора и определяют pH каждого раствора в соответствии с прилагаемой к прибору инструкцией.

(Измененная редакция, Изм. № 1, 3).

11. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

Активность уреазы в единицах pH вычисляют по формуле

A = pH_{1} - pH_{0} ,

где pH_{1} — значение pH в основном измерении (с раствором Б);

pH_{0} — значение pH в контрольном измерении (с раствором А).

За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений, расхождения между которыми не должны превышать 30% от среднего арифметического значения pH при доверительной вероятности 0,95. Все вычисления проводят с записью результата до второго десятичного знака.

---