ФС.2.1.0601. Фармакопейная статья. Золедроновая кислота моногидрат. Золедроновая кислота
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 21.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Золедроновая кислота моногидрат | ФС.2.1.0601 |
|---|---|
| Золедроновая кислота | |
| Acidum zoledronicum monohydricum | Вводится впервые |
 | |
| C5H10N2O7P2·H2O [165800-06-6] | М.м. 290,11 |
[1-Гидрокси-2-(1H-имидазол-1-ил)этан-1,1-диил]бис(фосфоновая кислота) моногидрат.
Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% золедроновой кислоты C5H10N2O7P2 в пересчете на безводное вещество.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
Растворимость. Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96% и диметилсульфоксиде.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика золедроновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора Б (раздел «Родственные примеси»).
3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 0,01 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 190 до 250 нм должен иметь максимумы при 210 нм и минимумы при 200 нм.
Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
Светопоглощающие примеси. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 70 мл воды при нагревании на водяной бане при 40 °C, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,05.
pH раствора. От 2,0 до 3,5 (0,2% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Во избежание сорбции золедроновой кислоты на стекле, для приготовления, хранения и ввода в инжектор растворов, содержащих золедроновую кислоту, используют полимерные флаконы. Использование стеклянных мерных колб допустимо при условии того, что полученные растворы переносят в полимерные емкости сразу после приготовления.
Раствор натрия эдетата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,372 г натрия эдетата дигидрата, растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 2 М и доводят объем раствора водой до метки.
Буферный раствор. Растворяют 1 г тетрабутиламмония гидросульфата в 800 мл воды, прибавляют 4 мл раствора натрия эдетата, 5 мл триэтиламина и доводят pH раствора фосфорной кислотой разведенной 10% до 7,2. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — буферный раствор 50:950.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 18,7 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата, растворяют в 80 мл ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.
Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 80 мл ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.
Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,75 мл раствора стандартного образца золедроновой кислоты, 1,05 мл стандартного раствора А и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 105 мкл стандартного раствора А и доводят объем раствора испытуемым раствором до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объем раствора ПФ до метки.
Примесь A: 1H-имидазол [288-32-4].
Примесь D: (1H-имидазол-1-ил) уксусная кислота [22884-10-2].
Уравновешивают хроматографическую колонку ПФ до достижения стабильной базовой линии в течение не менее 60 мин.
Последовательно хроматографируют 100 мкл ПФ, 30 мкл ПФ, после чего по 30 мкл раствора для проверки чувствительности хроматографической системы, раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартного раствора Б и испытуемого раствора.
Относительное время удерживания соединений. Золедроновая кислота — 1 (около 21 мин); примесь A — около 0,3; примесь D — около 0,4.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси D и пика имидазола используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму испытуемого раствора.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:
- разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси D должно быть не менее 5,0;
- разрешение (RS) между пиками примеси D и золедроновой кислоты должно быть не менее 5,0.
На хроматограмме стандартного раствора Б:
- фактор асимметрии пика (AS) золедроновой кислоты должен быть не более 1,5;
- фактор асимметрии пика (AS) примеси A должен быть не более 2,0;
- фактор асимметрии пика (AS) примеси D должен быть не более 1,5;
- относительное стандартное отклонение площади пика золедроновой кислоты, примеси A, примеси D должно быть не более 5,0% (6 введений);
- относительное стандартное отклонение площади пика золедроновой кислоты должно быть не более 2,0% (6 введений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику золедроновой кислоты, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.
Содержание примесей A и D в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 1,05 \cdot 25 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика примеси A или D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора Б;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца соответствующей примеси, мг;
W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P — содержание примеси A или D в соответствующем стандартном образце, %.
Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 0,75 \cdot 25 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика золедроновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора Б;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата, мг;
W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P — содержание золедроновой кислоты в фармакопейном стандартном образце золедроновой кислоты моногидрата, %.
Допустимое содержание примесей:
- примеси A и D — не более 0,15% каждая;
- любая другая примесь — не более 0,10%;
- сумма примесей — не более 0,5%.
Не учитывают пики менее 0,05%.
Вода. От 5,0% до 8,0% (ОФС «Определение воды», метод 1).
Фосфат-ион, фосфит-ион и хлорид-ион. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Азотной кислоты раствор 1% в метаноле. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 15 мл азотной кислоты концентрированной, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.
Растворитель. Ацетонитрил — метанол 15:85.
Азотной кислоты раствор 0,016 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10 мл азотной кислоты раствора 70%, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Растворитель — азотной кислоты раствор 0,016 М 400:600.
Раствор натрия гидроксида 0,15 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 150 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объем раствора водой до метки.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе натрия гидроксида 0,15 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 135 мг (точная навеска) калия дигидрофосфата, 100 мг (точная навеска) фосфористой кислоты и 155 мг (точная навеска) натрия хлорида, растворяют в растворе натрия гидроксида 0,15 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора раствором натрия гидроксида 0,15 М до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 30 мг стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата в 1,0 мл стандартного раствора.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объем раствора раствором натрия гидроксида 0,15 М до метки.
Перед проведением испытания хроматограф и колонку в течение 1 ч промывают азотной кислоты раствором 1% в метаноле со скоростью 1 мл/мин, затем в течение 1 ч водой, после чего уравновешивают в течение 30 мин ПФ.
Хроматографируют раствор натрия гидроксида 0,15 М, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.
Порядок пиков на хроматограмме: фосфат-ион, золедронат-ион, фосфит-ион, хлорид-ион.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
- разрешение (RS) между пиками золедронат-иона и фосфат-иона должно быть не менее 2,5;
- разрешение (RS) между пиками золедронат-иона и фосфит-иона должно быть не менее 3,0;
- отношение высоты пика фосфат-иона и высоты долины, отделяющей пик фосфат-иона от пика золедронат-иона (отношение p/v), должно быть не менее 10;
- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками фосфит-иона и золедронат-иона должно быть не менее 10.
На хроматограмме стандартного раствора:
- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пиков фосфат-иона, фосфит-иона и хлорид-иона должно быть не более 10% (6 введений).
Расчет содержания фосфат-иона, фосфит-иона и хлорид-иона.
Содержание каждого из трех ионов в процентах (X) рассчитывают по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot K \cdot 2 \cdot 10}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 25} ,
где S1 — площадь пика фосфат-иона, фосфит-иона или хлорид-иона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора;
a0 — навеска калия дигидрофосфата, фосфористой кислоты или натрия хлорида, мг;
P — содержание калия дигидрофосфата, фосфористой кислоты или натрия хлорида в соответствующем реактиве, %;
K — коэффициент пересчета; K = 0,698 для пересчета калия дигидрофосфата в фосфат-ион (PO_{4}^{3 -}) , K = 0,963 для пересчета фосфористой кислоты на условную частицу PO3, K = 0,607 для пересчета натрия хлорида в хлорид-ион (Cl-).
При содержании иона менее 0,25% результат записывают как «менее 0,25%».
Допустимое содержание примесей:
Сульфатная зола. Не более 5,0% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные эндотоксины. Не более 43,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг в 1 мл воды для БЭТ.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 80 мг (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по третьему перегибу на кривой титрования.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 9,07 мг золедроновой кислоты C5H10N2O7P2.