ФС.2.1.0513. Фармакопейная статья. Налоксона гидрохлорид дигидрат. Налоксон
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 22.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Налоксона гидрохлорид дигидрат | ФС.2.1.0513 |
|---|---|
| Налоксон | |
| Naloxoni hydrochloridum dihydricum | Вводится впервые |
 | |
| C19H21NO4-HCl-2H2O [51481-60-8] | М.м. 399,87 |
3,14-Дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-она гидрохлорид дигидрат).
Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% налоксона гидрохлорида C19H21NO4-HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
<*> Гигроскопичен.
<*> Приводится для информации.
Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96%.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.
2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.
Подвижная фаза (ПФ). Метанол — смесь растворителей 5:95.
Растворитель. Аммиака раствор 2 М — бутанол 36:60; используют верхний слой.
Испытуемый раствор. Растворяют 8 мг субстанции в 0,5 мл воды и доводят объем раствора метанолом до 1 мл.
Раствор стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Растворяют 8 мг фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата в 0,5 мл воды и доводят объем раствора метанолом до 1 мл.
Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г калия феррицианида, растворяют в железа (III) хлорида растворе 10,5% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.
Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции налоксона на хроматограмме раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.
3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
Удельное вращение. От -170 до -181 в пересчете на безводное вещество (2% раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор субстанции 2% в воде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
Кислотность или щелочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 50 мкл метилового красного раствора 0,05%. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида или 0,2 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.
1. Примесь D. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Буферный раствор. Растворяют 1,58 г аммония гидрокарбоната в 950 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25% до 9,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил — буферный раствор 200:800.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил — буферный раствор 400:600.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл испытуемого раствора, 2,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.
Примесь D: 3,14-Дигидрокси-7,8-дидегидро-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-он [26451-92-3].
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 50 | 100 | 0 |
| 50 — 51 | 100 \rightarrow 0 | 0 \rightarrow 100 |
| 51 — 60 | 0 | 100 |
Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Налоксон — 1 (около 50 мин), примесь D — около 0,8.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
- разрешение (RS) между пиками примеси D и налоксона должно быть не менее 5;
- фактор асимметрии пика (AS) примеси D должен быть не более 1,8.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси D не должна превышать 1,5 площади пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,0075%).
2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Буферный раствор. Растворяют 1,1 г натрия октансульфоната в 950 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведенной 42,5% до 2,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил — тетрагидрофуран — буферный раствор 20:40:940.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран — ацетонитрил — буферный раствор 40:170:790.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.
Раствор для идентификации. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца налоксона для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, D, E и F в 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1%.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.
Примесь A: 3,14-дигидрокси-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-он [33522-95-1].
Примесь B: 14-дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-3-[(проп-2-ен-1-ил) окси]-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-он [1352085-46-1].
Примесь C: 3,10 \alpha ,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-он [2139253-68-0].
Примесь E: 3,3',14,14'-тетрагидрокси-17,17'-бис(проп-2-ен-1-ил)-4,5 \alpha :4',5' \alpha -диэпокси[2,2'-биморфинан]-6,6'-дион [211738-08-8].
Примесь F: 3,10 \beta ,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5 \alpha -эпоксиморфинан-6-он [2139253-69-1].
| Колонка | 125 x 4,0 мм, силикагель октилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
|---|---|
| Температура | 40 °C; |
| Скорость потока | 1,5 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |
| Объем пробы | 20 мкл. |
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 40 | 100 \rightarrow 0 | 0 \rightarrow 100 |
| 40 — 50 | 0 | 100 |
| 50 — 51 | 0 \rightarrow 100 | 100 \rightarrow 0 |
| 51 — 60 | 100 | 0 |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Налоксон — 1 (около 11 мин); примесь C — около 0,6; примесь A — около 0,8; примесь F — около 0,9; примесь D — около 1,1; примесь E — около 3,0; примесь B — около 3,2.
Идентификация примеси. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E и F относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика налоксона должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора для идентификации пиков отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси D над нулевой линией и расстоянием от наиболее низко расположенной точки кривой, отделяющей пик примеси D от пика налоксона, над нулевой линией должно быть не менее 2,0.
На хроматограмме раствора сравнения:
- фактор асимметрии пика (AS) налоксона должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение площади пика налоксона должно быть не более 5,0%.
Поправочный коэффициент. Для расчета содержания площадь пика примеси E умножают на 0,5.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика каждой из примесей A, B, C, E и F не должна превышать площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырехкратную площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8%).
Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).
Вода. От 7,5% до 11,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг налоксона гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96%, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида, приготовленном в этаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объем титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.
1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 36,38 мг налоксона гидрохлорида C19H21NO4-HCl.
В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.