ФС.2.1.0499. Фармакопейная статья. Трипторелина ацетат. Трипторелин
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 23.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Трипторелина ацетат | ФС.2.1.0499 |
|---|---|
| Трипторелин | |
| Triptorelini acetas | Вводится впервые |
| H-Glp-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 x CH3COOH | |
| C64H82N18O13·xC2H4O2 [56-84-8] | М.м. 1311,5 (основание) |
5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-D-триптофил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролилглицинамида ацетат.
Содержит не менее 95,0% и не более 105,0% трипторелина C64H82N18O13 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.
Описание. Белого или почти белого со слабым желтоватым оттенком цвета порошок без запаха или со слабым запахом уксусной кислоты.
Растворимость. Легко растворим в воде и в уксусной кислоте ледяной.
1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика трипторелина на хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина (раздел «Количественное определение»).
2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1, анализ по методу 5). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну седьмую суммарного мольного содержания глутаминовой кислоты, серина, гистидина, глицина, аргинина, тирозина, лейцина, пролина по формуле:
X = \frac{n_{i} \cdot 7}{\sum n(Glu,His,Gly,Arg,Tyr,Leu,Pro)} ,
где ni — количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
\sum n(Glu,His,Gly,Arg,Tyr,Leu,Pro) — сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, глицина, аргинина, тирозина, лейцина и пролина, мкмоль.
Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: глутаминовая кислота — от 0,90 до 1,10; серин — от 0,70 до 1,10; гистидин — от 0,90 до 1,10; глицин — от 0,90 до 1,10; аргинин — от 0,90 до 1,10; тирозин — от 0,90 до 1,10; лейцин — от 0,90 до 1,10 и пролин — от 0,90 до 1,10.
Удельное вращение. От -65,0 до -75,0 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (0,5% раствор субстанции в уксусной кислоты растворе 1%, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH раствора. От 4,0 до 6,0 (0,2% раствор субстанции, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,85 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объем раствора водой до метки. К 700 мл полученного раствора прибавляют 100 мл ацетонитрила, перемешивают и доводят значение pH триэтиламином до 2,5.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — раствор А 100:900.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца трипторелина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца трипторелина, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор натрия азида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г натрия азида, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и пропускают через раствор аргона в течение 10 мин.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора раствором натрия азида до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора раствором натрия азида до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца трипторелина ацетата и 5 мг фармакопейного стандартного образца D-Trp-трипторелина, растворяют в 40 мл воды, доводят объем раствора этим же растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствором натрия азида до метки.
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Трипторелин — 1 (около 20 мин); примесь D-Pyr-трипторелин — около 0,6; D-Trp-трипторелин — около 0,8.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D-Trp-трипторелин используют относительное время удерживания соединений.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должен присутствовать пик D-Trp-трипторелина; разрешение (RS) между пиком трипторелина и пиком D-Trp-трипторелина должно быть не менее 3,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0%).
Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика трипторелина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).
Вода. Не более 6,0% (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют около 20,0 мг (точная навеска) субстанции.
Уксусная кислота. От 4,5 до 12,0% (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные эндотоксины. Не более 90 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.
Хроматографируют раствор стандартного образца трипторелина и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина:
- фактор асимметрии пика (AS) трипторелина должен быть не более 2,5;
- относительное стандартное отклонение площади пика трипторелина должно быть не более 2,0% (6 введений).
Содержание трипторелина C64H82N18O13 в субстанции в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 10 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 10 \cdot (100 - W - A)} ,
где S1 — площадь пика трипторелина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца трипторелина, мг;
W — содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
A — содержание уксусной кислоты в субстанции, %;
P — содержание трипторелина в фармакопейном стандартном образце трипторелина, %.
В защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °C.