ФС.2.1.0401. Фармакопейная статья. Дактиномицин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Дактиномицин	ФС.2.1.0401
Дактиномицин
Dactinomycinum	Взамен ФС 42-1554-87

C62H86N12O16 [50-76-0]	М.м. 1255,4

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Акриноцинил-бис(L-треонил-D-валинил-L-пролинил-саркозил-N-метил-L-валинил)-лактон.

Содержит не менее 95,0% и не более 103,0% дактиномицина C62H86N12O16 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Оранжево-красный кристаллический порошок.

<*> Чувствителен к свету. Гигроскопичен.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в метаноле и спирте 96%, очень мало растворим в воде при температуре от 8 до 10 °C, практически нерастворим в воде при температуре 20 °C.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина (раздел «Родственные примеси»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 445 нм должна быть не менее 95,0% и не более 103,0% по отношению к раствору стандартного образца дактиномицина.

Отношение значений оптической плотности испытуемого раствора и раствора стандартного образца дактиномицина А240/А445 должно быть 1,4 +/- 0,1.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -293 до -329 в пересчете на сухое вещество (0,1% раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 мг субстанции в 1 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Раствор выдерживают в течение 30 мин при температуре от -5 до -7 °C и доводят до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Вода — ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор феноксазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг феноксазина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают раствор стандартного образца дактиномицина и раствор феноксазина 2:1.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дактиномицина и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	20 °C;
Скорость потока	1,9 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика дактиномицина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дактиномицин — 1 (около 5 мин); феноксазин — около 0,8.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дактиномицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками феноксазина и дактиномицина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

• любая примесь — не более 0,5%;
• сумма примесей — не более 3,0%.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05% от суммы площадей всех пиков.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме до постоянной массы 0,1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °C и остаточном давлении 5 мм рт. ст.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 7 мкг дактиномицина в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения — 14 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 80 ЕЭ на 1 мг дактиномицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца дактиномицина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина:

• фактор асимметрии пика (AS) дактиномицина должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика дактиномицина должно быть не более 2,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дактиномицина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание дактиномицина C62H86N12O16 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика дактиномицина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца дактиномицина, мг;

P — содержание дактиномицина в фармакопейном стандартном образце дактиномицина, %;

W — потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.

---