МУК 4.1.910-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-КАРБОКСИ-4,5-ДИМЕТОКСИФЕНИЛМОЧЕВИНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МУК 4.1.910-99

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

                    H CO     COOH
                     3  \___/
                        /   \

                    \___/

                 H OH CO/   \NHCONH
                   2  3            2

    C  H  N O  х H O                                  М. м. 258,24
     10 12 2 5    2

2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевина — твердое вещество белого цвета, Т. пл. — 163 °С. Вещество слабо растворимо в воде, растворимо в ацетоне, бензоле, метаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе — 3 мг/куб. м.

Характеристика метода

Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 0,06 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе — 1,5 мг/куб. м (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины в воздухе от 1,5 мг/куб. м до 25 мг/куб. м.

Определению вещества не мешает присутствие сульфат-п-циклогексилмочевины.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 19,3%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 30 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостной хроматограф НРР-5001 с насосом высокого давления <...>.

Хроматографическая колонка 150 х 3,3 мм.

Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические.

Аспирационное устройство.

Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Мерные цилиндры вместимостью 100 мл, ГОСТ 1730-84.

Пробирки колориметрические с притертыми пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Фильтродержатель.

Реактивы, растворы и материалы

2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевина 94%, ч.

Метанол для жидкостной хроматографии, ОСЧ ТУ 6-09-2192-85.

Вода бидистиллят, перегнанная с перманганатом калия.

Сепарон S GXC (неподвижная фаза), 7 ммк, <...>. 18

Фильтры АФА-ХП-20.

Подвижная фаза — смесь метанола и воды в объемном соотношении 7:3.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 1 мг/мл готовят растворением 25 мг вещества в смеси метанол:вода (7:3) в мерной колбе вместимостью 25 мл. Раствор устойчив в течение 1 месяца.

Градуировочные растворы с концентрацией 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 6,0; 12,0; 25,0; 50,0; 100,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 смесью метанол:вода (7:3).

Растворы устойчивы в течение 48 часов.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХП-20, помещенный в фильтродержатель.

Для определения 1/2 ОБУВ вещества необходимо отобрать 20 л воздуха.

Срок хранения отобранных проб — 2 дня.

Подготовка к измерению

Подготовку хроматографа к работе проводят согласно инструкции. Готовят подвижную фазу, смешивая 70 мл метанола и 30 мл воды. Насос хроматографа заполняют подвижной фазой. Готовят колонку к работе, пропуская через нее подвижную фазу в объеме 70 мл с рабочей скоростью 0,5 мл/мин.

Для построения градуировочного графика по 10 мкл градуированных растворов с концентрациями 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 6,0; 12,0; 25,0; 50,0; 100,0 мкг/мл вводят микрошприцем в колонку хроматографа, что соответствует 0,06; 0,12; 0,25; <...>; 1,0 мкг 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины.

С помощью интегрального компьютера или линейки и измерительной лупы на записанной хроматограмме измеряют площадь пика вещества. Для каждого градуировочного раствора делают не менее 5-ти измерений.

Затем строят градуировочный график зависимости площади пика (в кв. мм) от содержания 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины (в мкг).

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки         +20 °С
    Хроматографическая колонка             130 х 3,3 <...>
    Ультрафиолетовый детектор              дл. волны 254 нм
     твердая фаза                          сепарон S GXC   7 <...>

                                                    18

подвижная фаза смесь метанола и воды (7:3)

     элюирующая скорость                   0,5 мл/мин.
     скорость движения диаграммной ленты   0,6 см/мин.
     время удерживания вещества            около 3 мин.
     чувствительность                      8,0
     объем вводимой пробы                  10,0 мкл.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в мерную пробирку с притертой пробкой, заливают 5 мл смеси метанола и воды (7:3) и оставляют на 10 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества.

Степень десорбции вещества с фильтра — 97%.

Аликвота пробы объемом 10 мкл вводится с помощью микрошприца в колонку хроматографа.

Расчет концентрации

Концентрацию 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины в мг/куб. м (С) рассчитывают по формуле:

                            а х в

С = ------, с х V

где:

а — содержание 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

с — объем раствора пробы, взятой для анализа;

V — объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

                      V  (273 + 20) х Р
                       t

V = -------------------, (273 + t°) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  - барометрическое давление, кПа

(101,33 кПа = 760 мм рт. ст.); t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V на t соответствующий коэффициент.

Т, °С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2038	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1400	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0635	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0357
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9655	0,9605	0,9658	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9891	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Название вещества	Опубликованные Методические указания
Тетрафторбромэтан	Методические указания на фотометрическое определение фторорганических соединений в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 187
Диметилкетазин	Методические указания на фотометрическое определение гидразина в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 108
Цианокобаламин /витамин В / 12	Методические указания на фотометрическое определение кобальта и его соединений в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 14. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Сборник МУ 25, М., 1989, с. 100

---